中华人民共和国国家标准
GB/T15670.4-2017部分代替GB/T15670-1995
农药登记毒理学试验方法 第4部分：急性经口毒性试验 概率单位法
Toxicological test methods for pesticides registration-Part 4:Acute oral toxicity test-Miller and Taninter's method
中国国家标准化管理委员会 中华人民共和国国家质量监督检验检疫总局 发布
前言
GB/T15670《农药登记毒理学试验方法》分为以下部分：
第1部分：总则：第2部分：急性经口毒性试验霍恩氏法：第3部分：急性经口毒性试验序贯法； 第4部分：急性经口毒性试验概率单位法：第5部分：急性经皮毒性试验；第6部分：急性吸人毒性试验：一第7部分：皮肤刺激性/腐蚀性试验；第8部分：急性眼刺激性/腐蚀性试验； 一第9部分：皮肤变态反应（致敏）试验；第10部分：短期重复经口染毒（28天）毒性试验；第11部分：短期重复经皮染毒（28天）毒性试验：第12部分：短期重复吸人染毒（28天）毒性试验；第13部分：亚慢性毒性试验； 第14部分：细菌回复突变试验；第15部分：体内哺乳动物骨简嗜多染红细胞微核试验；第16部分：体内哺乳动物骨简细胞染色体畸变试验；第17部分：哺乳动物精原细胞/精母细胞染色体畸变试验； 第18部分：啮齿类动物显性致死试验：第19部分：体外哺乳动物细胞染色体畸变试验：第20部分：体外哺乳动物细胞基因突变试验：第21部分：体内哺乳动物肝细胞程序外DNA合成（UDS）试验：第22部分：体外哺乳动物细胞DNA报害与修复/程序外DNA合成试验： 第23部分：致畸试验；第24部分：两代繁殖毒性试验；-第25部分：急性迟发性神经毒性试验；第26部分：慢性毒性试验：第27部分：致癌试验； 第28部分：慢性毒性与致癌合并试验；第29部分：代谢和毒物动力学试验.本部分为GB/T15670的第4部分.本部分按照GB/T1.1-2009给出的规则起草.本部分部分代替GB/T15670-1995《农药登记毒理学试验方法》. 本部分与GB/T15670-1995的急性经口毒性试验部分相比主要变化：修改和调整了总体结构和编排格式：增加了一些条款（见第1章、第2章、第3章、第5章、6.4、第8章）；增加了附录A"反应率-概率单位表”和附录B"反应率0%及100%的概率单位的近似值”本部分由中华人民共和国农业部提出并归口.
GB/T 15670.4-2017
本部分起草单位：农业部农药检定所.本部分主要起草人：贺锡雯、张丽英、曲亮、陶传江.本部分所代替标准的历次版本发布情况为：GB/T 15670-1995
农药登记毒理学试验方法 第4部分：急性经口毒性试验 概率单位法
1范围
GB/T15670的本部分规定了急性经口毒性试验概率单位法的基本原则、方法和要求.本部分适用于为农药登记而进行的急性经口毒性试验.
2规范性引用文件
下列文件对于本文件的应用是必不可少的.凡是注日期的引用文件，仅注日期的版本适用于本文件.凡是不注日期的引用文件，其最新版本（包括的修改单）适用于本文件.
GB14925实验动物环境及设施
农药登记资料规定（中华人民共和国农业部令[2007）第10号）
3术语和定义
下列术语和定义适用于本文件.
急性经口毒性acute oral toxicity
一次或在24h内多次经口给予实验动物受试物后，动物在短期内出现的健康损害效应.
所给受试物的量，以实验动物单位体重所接受受试物的质量表示（mg/kg体重）.
半数致死剂量medianlethaldose
LD;
一次或在24h内多次给予实验动物受试物后，引起实验动物总体中半数死亡的毒物统计学剂量.以实验动物单位体重接受受试物的质量表示（mg/kg体重）.
3.4
剂量-反应关系dose-response relationship
剂量与特定效应的发生率间的关系.
4试验目的
急性经口毒性试验是评估农药毒性的第一步，通过短时间经口染毒初步了解受试物的毒性特征和剂量-反应关系，为急性毒性分级、标签管理和其他毒理学试验剂量选择提供依据.
5试验概述
概率单位法（Miller and Taninter’smethod）亦称目测法或对数概率单位绘图法.以灌饲法经口给各试验组动物不同剂量的受试物.染毒剂量的选择可通过预试验确定.染毒后观察动物的毒性反应 和死亡情况，试验期间死亡动物要进行户检，试验结束时仍存活的动物应人道处死并进行大体解剖.
6试验方法
6.1受试物
基纤维素钠、明胶和淀粉可将受试物配制成混悬液或糊剂.除水以外的溶剂，用前应了解其毒理学特 受试物可配制成水溶液、油溶液或悬浮液，尽可能选用水或食用油（如玉米油）作溶剂，其他如羧甲性，必要时设立溶剂对照组.不同浓度受试物现用现配.一次染毒容量不超过1mL/100g体重，水溶液可达到2mL/100g体重.通过调整受试物溶液的浓度，使各剂量组经口染毒的容量一致.如果一次染毒容量太大，也可在24h内分2次~3次给予.
6.2实验动物
6.2.1种属和性别
啮齿类动物中可选用SD大鼠或Wistar大鼠.两种性别，雌性动物应是未妊娠和未经产的.
6.2.2年龄和体重
进行分组. 健康成年大鼠鼠龄在8周～10周内，体重变异不超过同性别动物平均体重的土20%.按随机原则
6.3分组和剂量水平
各剂量的组间距应使各试验组产生不同程度的毒性反应和死亡率，一般以0.65～0.85为宜.所得数据 要有足够不同剂量的试验组，至少3个剂量（通常设4个~5个剂量），每组动物10只，雌雄各半.应能绘出剂量-反应曲线并能测出LD.剂量选择可采用较大组距和较少动物进行预试验.如果受试物毒性很低，也可采用一次限量5000mg/kg体重染毒.
6.4饲养环境和条件
饲养环境和条件应符合GB14925的有关规定.喂饲常规动物铜料，饮水量不限.试验前动物应在饲养环境中至少检疫、适应3d.
6.5试验步骤
6.5.1试验前的准备
试验前，大鼠禁食过夜，不限制饮水，若采用代谢率高的其他动物，禁食时间可以适当缩短.
6.5.2预试验
可查阅有关资料和文献确定预试验剂量.如无法获得毒理学信息，一般采用10mg/kg体重、100mg/kg体重和1000mg/kg体重三个剂量，每个剂量经口染毒2只~3只动物.染毒后24h内， 10 mg/kg体重和100mig/kg体重剂量组动物未出现死亡，而1000mg/kg体重剂量组动物全部死亡，2
