中华人民共和国国家标准
GB/T15670.24-2017部分代替GB/T15670-1995
农药登记毒理学试验方法 第24部分：两代繁殖毒性试验
Toxicological test methods for pesticides registrationPart 24:Two-generation reproduction toxicity study
中国国家标准化管理委员会 中华人民共和国国家质量监督检验检疫总局 发布
前言
GB/T15670《农药登记毒理学试验方法》分为以下部分：
第1部分：总则；第2部分：急性经口毒性试验霍恩氏法：第3部分：急性经口毒性试验序贯法； 第4部分：急性经口毒性试验概率单位法；第5部分：急性经皮毒性试验；第6部分：急性吸人毒性试验；第7部分：皮肤刺激性/腐蚀性试验：第8部分：急性眼刺激性/腐蚀性试验； 第9部分：皮肤变态反应（致敏）试验：第10部分：短期重复经口染毒（28天）毒性试验：第11部分：短期重复经皮染毒（28天）毒性试验；第12部分：短期重复吸人染毒（28天）毒性试验：第13部分：亚慢性毒性试验； 第14部分：细菌回复突变试验：一第15部分：体内哺乳动物骨髓嗜多染红细胞微核试验；-一第16部分：体内哺乳动物骨髓细胞染色体畸变试验；第18部分：嘀齿类动物显性致死试验： 一第17部分：哺乳动物精原细胞/精母细胞染色体畸变试验；第19部分：体外哺乳动物细胞染色体畸变试验；第20部分：体外哺乳动物细胞基因突变试验：第21部分：体内哺乳动物肝细胞程序外DNA合成（UDS）试验：第23部分：致畸试验； 第22部分：体外哺乳动物细胞DNA损害与修复/程序外DNA合成试验；第24部分：两代繁殖毒性试验；第25部分：急性迟发性神经毒性试验；第26部分：慢性毒性试验；第27部分：致癌试验； 第28部分：慢性毒性与致癌合并试验；第29部分：代谢和毒物动力学试验.本部分为GB/T15670的第24部分.本部分按照GB/T1.1-2009给出的规则起草.本部分部分代替GB/T15670-1995（农药登记毒理学试验方法》. 本部分与GB/T15670-1995的两代繁殖试验部分相比主要变化如下：修改和调整了标准的总体结构和编排格式；增加了部分章节内容（见第1章、第2章、第3章、第5章、6.1、6.2.3和第8章）；一修改了剂量和分组的内容（见6.3，1995年版的16.5）： 修改了对实验动物的要求（见6.2.1995年版的16.4）；
GB/T 15670.24-2017
一修改了现察指标的内容（见6.4.4，1995年版的16.11）.本部分由中华人民共和国农业部提出并归口.本部分起草单位：中华人民共和国农业部农药检定所.本部分主要起草人：李宁、张丽英、陶传江.本部分所代替标准的历次版本发布情况为： *GB/T 156701995
第24部分：两代繁殖毒性试验 农药登记毒理学试验方法
1范围
GB/T15670的本部分规定了两代繁殖毒性试验的基本原则、方法和要求. 本部分适用于为农药登记而进行的两代繁殖毒性试验.
2规范性引用文件
件，凡是不注日期的引用文件，其最新版本（包括的修改单）适用于本文件. 下列文件对于本文件的应用是必不可少的.凡是注日期的引用文件，仅注日期的版本适用于本文
GB14925实验动物环境及设施
3术语和定义
下列术语和定义适用于本文件.
繁殖毒性reproductive toxicity
受试物引起的亲代雌性或雄性繁殖功能损伤或生殖能力下降.
3.2
发育毒性developmental toxicity
接触受试物的妊娠动物的子代在出生前、围产期和出生后所表现出的机体缺陷或功能障碍.
4试验目的
用于检测受试物对雌性和雄性动物繁殖功能的影响，如性腺功能、发情周期、交配行为、妊娠、分娩、哺乳和断乳以及子代的生长发育等.并可提供有关受试物发育毒性的信息，如出生缺陷、死亡和畸形等.
5试验概述
将雌雄动物各分成儿个剂量组，为评价受试物对精子生成的影响，染毒期限为亲代雄性动物（P）至少覆盖一个完整的精子形成周期（小鼠约56d，大鼠约70d）.亲代雌性（P）动物至少为两个完整的发 情周期.此后，交配动物（P）均给予受试物，雌性亲代妊娠期持续给予受试物直至F1代断奶.F1代断奶后持续给予受试物，从子代F1的青春期、成熟期、交配，子代F2的出生直至F2代断奶，以评价受试物的两代繁殖毒性效应.
6试验方法
6.1受试物配制
灌胃给予时，根据不同受试物的特性选择合适的溶剂或介质，通常首选溶剂为水，不溶于水的受试物可使用食用油（如橄榄油、玉米油等），不落于水或油的受试物可使用羧甲基纤维素钠、淀粉等配成混 悬液.掺人饲料给予时，要将受试物与饲料或水混匀并保证受试物配制的稳定性，应进行稳定性、含量和均一性的测定.受试物掺人饲料或水时，应不影响饲料营养质量和水的平衡，一般在饲料中的掺人量不超过何料浓度的5%.
6.2实验动物
6.2.1种属和周龄
4周～5周，试验开始时动物体重差异不应超过同性别平均体重的土20%.所用动物应注明种类、品系、 首选大鼠和小鼠.不可使用繁殖率低和/或发育缺陷发生率高的品系.常用雌雄动物为初断乳性别、体重和周龄.
6.2.2动物性别和数量
雌性和雄性动物通常按1：1或2：1比例合笼交配，每个剂量组和对照组至少能获得20只孕鼠，以评价受试物对两代动物繁殖过程的影响，包括对亲代动物繁殖能力、怀孕、妊娠行为和哺育过程的影响，对子代F1从出生到成熟期以及对子代F2从出生到断乳期生长发育的影响.
6.2.3饲养条件
实验动物饲养条件应符合GB14925的有关规定.实验期间自由饮水和摄食，妊娠动物应单笼饲养.
6.3剂量及分组
试验至少设三个剂量组和一个对照组.高剂量组应使亲代动物出现明显的毒性反应，但不引起动物的死亡，如果发生不期望的死亡，亲代动物（P）死亡率应小于10%.中间剂量可引起轻微的毒性反应，低剂量不引起亲代和子代任何毒性反应.当掺人饲料染毒时，如果食物摄人量和利用率降低，则需考虑设配对饲养对照组.
的预试验中有母体毒性但未观察到发育毒性时，则可不必设定三个剂量.对照组为溶剂对照组或介质 如果受试物毒性较低，预期在1000mg/kg体重剂量不可能对繁殖产生任何毒性影响或在高剂量对照组，除不给予受试物外，其余处理均与剂量组相同.
6.4操作步骤
6.4.1染毒途径和时间
灌胃染毒，每日灌胃一次，时间地点应相同，并定期按体重调整灌胃量，以维持染毒剂量不变.灌胃量一 根据受试物的特性或试验目的，可将受试物混人饲料、灌胃或饮水给予.首选掺人何料给予，如果般不超过10mL/kg体重各组灌胃体积一致.
动物染毒时间，以大鼠为例，初断乳4周～5周的雌雄大鼠染毒8周后进行交配，交配期最长持续2周，雌性动物妊娠、哺乳期继续染毒至仔鼠断乳为止，雄性动物染毒至交配结束为止.染毒时间见 表1.
