中华人民共和国国家标准
GB/T 18448.4-2001代替 GB/T 14926.361994
实验动物 卡氏肺孢子虫检测方法
Laboratory animalMethod for examination of Pneumocystis carinii
中华人民共和国 国家质量监督检验检疫总局 发布
前言
本标准由GB/T14926.36-1994《实验动物卡氏肺孢子虫检验方法》修订而成.
本标准增加了实验动物处死前的麻醉.将原标准中“腹部消毒“改为“胸部消毒”,副除“暴露胸腔内容物”.
本标准由中华人民共和国科学技术部提出并归口.
本标准起草单位:中国实验动物学会.
本标准主要起草人:李冠民、诸欣平、潘振业、刘兆铭.
本标准于1994年1月首次发布,
中华人民共和国国家标准
GB/T 18448.4-2001
实验动物卡氏肺孢子虫检测方法
代替 GB/T 14926.36--1994
Laboratory animalMethod for examination of Pneumocystis carini
1范围
本标准规定了实验动物的卡氏肺孢子虫的检测方法和结果判定,并描述了其形态特征.本标准适用于小鼠、大鼠、地鼠等实验动物的卡氏肺孢子虫的检测.
2原理
主要寄生于肺细胞内(或释放于细胞外)的卡氏肺孢子虫经固定、染色,可直接在显微镜下观察,
3材料和试剂
3.1显微镜.3.3姬姆萨稀释液. 3.2载玻片.
4检测步骤
4.1取样
麻醉处死动物,胸部消毒,切开胸腔,取出肺脏,用生理盐水冲洗.用手术刀切开肺脏的各叶,分别涂压在同一载玻片上,自然干燥.
4.2固定和染色
将自然干燥后的肺印片,用甲醇固定5min,然后自来水冲洗,自然干燥,用姬姆萨稀释液染色15min~20min,自来水冲洗,干燥待检.
5结果判定
经染色后的肺印片,油镜检查.此方法可检查出卡氏肺孢子虫的包囊和滋养体,在显微镜下检查到包囊或滋养体皆为阳性.
小体,数目2~8个,成熟包囊含8个囊内小体,呈半月形.姬姆萨染色细胞质呈浅蓝色,细胞核呈深索 包囊为圆形或卵圆形,直径4μm~8μm,平均5.5pm,内含一些细胞质、残余线粒体和新月形囊内色,囊壁不着色.
滋养体大小为1.2pm~5.0gm.单核,有一个核仁,胞质中还有一些糖原额粒与脂肪粒,
6结果报告
根据结果判定,作出报告.