中华人民共和国国家标准
GB/T 18654.12-2008代替GB/T 18654.12-2002
Inspection of germplasm for cultured fishesPart 12:Method for the karyotype analysis
中国国家标准化管理委员会 中华人民共和国国家质量监督检验检疫总局 发布
前言
GB/T18654（养殖鱼类种质检验）分为下列部分：
第1部分：检验规则； 第2部分：抽样方法；第3部分：性状测定：第4部分：年龄与生长的测定；-第6部分：繁殖性能的测定： 第5部分：食性分析：一第7部分：生态特性分析：一第8部分：耗氧率与临界室息点的测定：一第9部分：含肉率测定：-一第11部分：肌肉中主要氨基酸含量的测定； 一第10部分：肌肉营养成分的测定：第12部分：染色体组型分析：第13部分：同工酵电泳分析；第14部分：DNA含量的测定；
第15部分：RAPD分析；
本部分为GB/T18654的第12部分.本部分代替GB/T18654.12-2002《养殖鱼类种质检验第12部分：染色体组型分析》.本部分与GB/T18654.12-2002相比主要变化如下： -增加了数码照相等先进技术；对7.2.9中的低渗时间进行了调整修订：对5.4中碳酸氢钠（NaHCO）的浓度做了补充说明：对3.6、7.2.4、7.2.12、7.3.2和8.3中描述的部分操作方法予以修改补充：对第6章中仪器设备予以补充完善：一对第3章至第8章中的部分实验描述修改准确，对部分文字描述予以更正； -一对附录A.3.4和A.3.5中部分文字描述予以修订，增加B.2.1数码显微照相内容.本部分的附录A和附录B为资料性附录.本部分由中华人民共和国农业部提出.本部分由全国水产标准化技术委员会淡水养殖分技术委员会归口.本部分起草单位：中国水产科学研究院长江水产研究所. 本部分主要起草人：方耀林、周瑞琼、邹世平.本部分所代替标准的历次版本发布情况为：GB/T 18654.12-2002.
第12部分：染色体组型分析 养殖鱼类种质检验
1范围
GB/T18654的本部分规定了鱼类染色体组型分析的原理、试剂和材料、仪器和设备、玻片标本的制备和组型分析.
本部分适用于养殖鱼类染色体组型分析，对于自然种群鱼类及其他水生动物亦可参照执行.
2规范性引用文件
下列文件中的条款通过GB/T18654的本部分的引用而成为本部分的条款.凡是注日期的引用文件，其随后的修改单（不包括勘误的内容）或修订版均不适用于本部分，然而，鼓励根据本部分达成 协议的各方研究是否可使用这些文件的最新版本.凡是不注日期的引用文件，其最新版本适用于本部分.
GB/T18654.2养殖鱼类种质检验第2部分：抽样方法
3术语和定义
下列术语和定义适用于GB/T18654的本部分.
3.1
体细胞体外培养法somaticcellcultureinvitro
巴细胞大量进入分裂状态.然后，加人适当浓度的秋水仙素，使细胞分裂被阻抑在分裂中期，而获得鱼 通过无菌操作，获取鱼的肾脏组织细胞或血细胞，在体外培养过程中，加人细胞分裂刺激物，刺激淋类细胞染色体中期分裂相.
3.2
体细胞体内培养法somatic cell culture invivo
通过向鱼体内注射细胞分裂刺激物，刺激淋巴细胞大量进入分裂状态.取出头肾组织在生理盐水中将其充分撕碎，再加人适当浓度的秋水仙素.
体细胞直接法direet methodof somatic cells
得鱼类细胞染色体中期分裂相. 将小鱼浸泡在适当浓度的秋水仙素溶液中，使其分裂旺盛的鲲丝上皮细胞被阻抑在分裂中期，而获
3.4
胚胎细胞直接法directmethodofembryo cells
胞阻抑在分裂中期获得鱼类细胞染色体中期分裂相. 选用发育正常的囊胚期或原肠期早期胚胎，将其细胞吹打分散后，加人适当浓度的秋水仙素，将细
3.5
空气干燥法air-drying technique
将收集的细胞经过低渗、固定、滴片，然后斜放静置，待其自然干燥.
3.6
火焰干燥法flame-drying technique
将收集的细胞经过低渗、固定、滴片，然后立即将玻片置于酒精灯的火焰上均匀烘烤（以玻片上刚出
