GB/T 18935-2018口蹄疫诊断技术.pdf

判定,病毒,诊断,试剂,试验,推荐性国家标准
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中华人民共和国国家标准

GB/T 18935-2018 代替GB/T18935-2003

口蹄疫诊断技术

Diagnostic techniques for foot and mouth disease

中国国家标准化管理委员会 国家市场监督管理总局 发布

目次

1范围2规范性引用文件3缩略语4临床诊断4.1易感动物 4.2临床症状4.3病理变化4.4结果判定5实验室诊断样品采集5.1器材5.2试剂 5.3样品采集5.4样品处理6病毒分离6.1器材6.2试剂6.3试验动物与细胞 6.4试验程序6.5病毒鉴定6.6结果判定7定型酶联免疫吸附试验(定型ELISA)7.1器材 7.2试剂7.3试验程序7.4试验成立条件7.5结果判定8多重反转录-聚合酶链式反应(多重RT-PCR)8.2引物 8.1器材8.3试剂8.4样品准备8.5试验程序8.6试验成立条件 8.7结果判定

9定型反转录-聚合酶链式反应(定型RT-PCR)9.1器材9.2引物9.3试剂9.4 样品准备9.5 9.6 试验成立条件 试验程序 10 99.7 结果判定10病毒VP1基因序列分析 1010.1器材 1010.2引物 1010.3试剂 10.4样品准备 10 1010.5试验程序 1010.6试验成立条件 1110.7结果判定与分析 1111荧光定量反转录聚合酶链式反应(荧光定量RT-PCR) 1111.1器材 11.2引物和探针 11 1111.3试剂 1111.4样品准备 1211.5试验程序 11.6试验成立条件 12 1211.7结果判定 1212病毒中和试验(VN) 1212.1器材 1212.2试剂 1212.3试验程序 12.4试验成立条件 13 1312.5结果判定 1313液相阻断酶联免疫吸附试验(LPB-ELISA) 1413.1器材 1413.2试剂 1413.3对照血清 13.4试验程序 14 1413.5试验成立条件 1413.6结果判定 1414固相竞争酶联免疫吸附试验(SPC-ELISA) 1514.1器材14.2试剂 14.3试验程序 15

14.4试验成立条件 1514.5结果判定 1515非结构蛋白3ABC抗体间接酶联免疫吸附试验(3ABC-1-ELISA) 1515.1器材 1515.2试剂 1615.3试验程序 15.4试验成立条件 16 1615.5结果计算与判定 1616非结构蛋白3ABC抗体阻断酶联免疫吸附试验(3ABC-B-ELISA) 1616.1器材 1616.2试剂 1616.3 16.4 试验结果有效性判定 试验程序 17 1716.5结果判定 1717综合判定附录A(规范性附录)样品保存液和细胞培养液“ 18附录B(规范性附录) 酶联免疫吸附试验用溶液的配制 20附录C(规范性附录)核酸检测用液体配制

前言

本标准按照GB/T1.1-2009给出的规则起草.

本标准代替GB/T18935-2003《口蹄疫诊断技术》,本标准与GB/T18935-2003相比,除编辑性修改外,主要技术变化如下:

增加了临床诊断: 删除了微量补体结合试验;取消了查毒试验部分,其相关内容在其他部分规定:删除了病毒感染相关(VIA)抗原琼脂凝胶免疫扩散试验(VIA-AGID),增加了非结构蛋白3ABC抗体间接酶联免疫吸附试验(3ABC-1-ELISA)和非结构蛋白3ABC抗体阻断酶联免疫 吸附试验(3ABC-B-ELISA)以替代VIA-AGID;一增加了定型反转录-聚合酶链式反应:-增加了病毒VP1基因序列分析;增加了荧光定量反转录-聚合酶链式反应.

本标准由中华人民共和国农业农村部提出.

本标准由全国动物卫生标准化技术委员会(SAC/TC181)归口.

本标准起草单位:中国农业科学院兰州兽医研究所.

本标准主要起草人:刘湘涛、张强、郭建宏、何继军、刘在新、卢曾军、包慧芳、常惠芸、田宏、郑海学、尚佑军、马军武、吴国华、新野、林密、马维民、卢永干、朱彩珠.

本标准所代替标准的历次版本发布情况为:

GB/T18935-2003

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