中华人民共和国国家标准
GB/T22978-2008
Determination of dexamethasone residues in milk and milk powder-LC-MS-MS method
中国国家标准化管理委员会 中华人民共和国国家质量监督检验检疫总局 发布
前言
本标准的附录A、附录B为资料性附录.本标准起草单位：中华人民共和国秦皇岛出人境检验检疫局、中华人民共和国河北出人境检验检 本标准由中华人民共和国国家质量监督检验检疫总局提出并归口.疫局.本标准主要起草人：马育松、葛娜、郭春海、段文仲、陈瑞春、吕红英、窦彩云、贾海涛、庞国芳.
牛奶和奶粉中地塞米松残留量的测定 液相色谱-串联质谱法
1范围
本标准规定了牛奶和奶粉中地塞米松残留量的液相色谱-串联质谱测定方法.本标准适用于牛奶和奶粉中地塞米松残留量的测定和确证.本标准的方法检出限：牛奶为0.2μg/kg，奶粉为1.0pg/kg.
2规范性引用文件
下列文件中的条款通过本标准的引用而成为本标准的条款.凡是注日期的引用文件，其随后的修改单（不包括勘误的内容）或修订版均不适用于本标准，然面，鼓励根据本标准达成协议的各方研究是否可使用这些文件的最新版本.凡是不注日期的引用文件，其最新版本适用于本标准.
(GB/T 6379. 12004 ISO 5725-1:1994 IDT)
GB/T6379.2测量方法与结果的准确度（正确度与精密度）第2部分：确定标准测量方法重复性与再现性的基本方法（GB/T6379.2-2004，ISO5725-2：1994，IDT)
GB/T6682分析实验室用水规格和试验方法（GB/T6682-2008，1SO3696：1987，M0D)
3原理
牛奶和奶粉样品用乙晴提取试样，C固相萃取柱净化，液相色谱-串联质谱仪测定，外标法定量.
水为GB/T6682规定的一级水.
4.1甲醇：色谱纯.4.2乙睛：色谱纯.4.3甲酸：优级纯.4.5地塞米松标准物质（CAS：50-05-2）：纯度大于等于99%4.6地塞米松标准储备溶液：准确称取100mg地塞米松标准物质（4.5），用甲醇溶解并定容至100mL，配成浓度为1.0mg/mL的标准储备液.该溶液在4C保存.4.7地塞米松标准工作溶液：吸取适量的地塞米松标准储备溶液（4.6），用甲醇配成1pg/mL和0.1μg/mL两种浓度的标准工作溶液.该溶液在4C保存. 4.8地塞米松基质标准工作溶液：根据需要吸取适量的地塞米松标准工作溶液（4.7），用空白样品提取液稀释成适当浓度的基质标准工作溶液，临用前配制.4.9C固相萃取柱：500mg，3mL.使用前分别用3mL乙晴和3mL水预处理，保持柱体湿润.4.10滤膜：0.22pm
5仪器与设备
5.1液相色谱中联质谱仪：配有大气压化学电离源（APCI）.
GB/T 22978-2008
5.2分析天平：感量0.1mg和0.01g.5.3涡旋混匀器.5.4固相萃取装置. 5.5具塞塑料离心管：50ml.5.6真空泵：真空度应达到80kPa.5.7离心机.5.9氮气吹干仪. 5.8旋转蒸发器.5.10样品管：10mL.5.11梨形瓶：150mL.
6试样的制备与保存
6.1牛奶 取均匀样品约250g装人洁净容器作为试样，密封置4C下保存，并标明标记.6.2奶粉
取均匀样品约250g装人洁净容器作为试样，密封，并标明标记.
7测定步骤
7.1提取
7.1.1牛奶样品
称取10g试样（精确到0.01g）置于50mL具塞塑料离心管中，加人20mL乙腊，涡旋混匀1min，以5000r/min离心10min，取上清液至梨形瓶中.用旋转蒸发器于45C水浴上减压蒸发，将提取液 浓缩至体积小于5ml.
7.1.2奶粉样品
称取2g试样（精确到0.01g）置于50mL具塞塑料离心管中，加人入10mL水涡旋30s混匀，以下操作同牛奶样品.
7.2净化
将提取液移至经预处理的C：固相萃取柱中，用5mL水洗涤梨形瓶和萃取柱，弃去全部流出液.在65kPa的负压下，减压抽干1min，用5mL乙以小于等于3mL/min流速洗脱，收集洗脱液于10mL样品管中，在45C水浴中用氮气吹干，用0.50mL流动相溶解残渣，经0.22m滤膜过滤后供液相色谱-中联质谱仪测定.
7.3测定条件
7.3.1液相色谱参考条件
液相色谱参考条件如下：
a）色谱柱：Inertsil ODS-3 Cs5μm150mm×2.1mm（内径）或相当者；c）流速：200L/min; b）流动相：乙0.1%甲酸溶液（11）；d）柱温：40C：e）进样量：20pl.
7.3.2质谱参考条件
质谱参考条件如下：a）离子源：大气压化学电离源（APCI）：b）扫描方式：正离子扫描；
c）定性离子对（m/）：393.2/373.2 393.2/355.2；d）定量离子对（m/）：393.2/373.2：f）干燥气体流量：5L/min； e）喷雾压力：1.14×10°Pa：g）干燥气体温度：250C：h）大气压化学电离源蒸发温度：250C；i）电晕电流：4000nA：j）毛细管电压：1500V.
7.3.3液相色谱-串联质谱测定
7.3.3.1定性测定
样品谱图中各组分定性离子的相对丰度与浓度接近的混合基质标准校准溶液谱图中对应的定性离子的相对丰度进行比较，偏差不超过表1规定的范围，则可判定为样品中存在对应的待测物.
表1定性确证时相对离子丰度的最大允许偏差
相对离子丰度K K>50 20<K<<50 10<K<20 K≤10允许最大偏差 ±20 ±25 ±30 ±50 7.3.3.2定量测定 在上述色谱条件下，用6个不同浓度的地塞米松基质标准工作溶液分别进样，以基质标准工作溶液浓度为横坐标，以峰面积为纵坐标，绘制标准工作曲线.用标准工作曲线对样品进行定量，样品溶液中时间为3.4min.地塞米松的选择离子流图参见附录A中的图A.1. 本方法的添加回收率数据参见附录B中的表B.1. 7.4平行试验 按以上步骤，对同一试样进行平行试验测定. 7.5空白试验 除不称取试样外，均按上述步骤同时完成空白试验. 8结果计算 地塞米松残留量利用数据处理系统计算或按式（1）计算： （I 式中： X一试样中地塞米松残留量，单位为微克每千克（pg/kg）：V-试样溶液定容体积，单位为毫升（mL）； c从标准工作曲线得到的试样溶液中被测组分的浓度，单位为纳克每毫升（ng/mL）；m--最终试样溶液所代表的试样质量，单位为克（g）.计算结果应扣除空白值. 9精密度 9.1一般规定 本标准的精密度数据是按照GB/T6379.1和GB/T6379.2的规定确定的，重复性和再现性的值以95%的可信度来计算.
