中华人民共和国国家标准
GB/T25174-2010
饲料添加剂 4'，7-二羟基异黄酮
Feed additive-4' 7-dihydroxyisoflavone
中国国家标准化管理委员会 中华人民共和国国家质量监督检验检疫总局 发布
前言
本标准由全国饲料工业标准化技术委员会提出并归口，本标准主要起草人：倪迎冬、杨晓静、赵茹茜、陈杰、付光武、王珍芹、王雨娜. 本标准起草单位：南京农业大学、中牧实业股份有限公司.
饲料添加剂4'.7-二羟基异黄酮
1范围
本标准规定了饲料添加剂4'，7-二羟基异黄酮的要求、试验方法、检验规则以及标签、包装、运输和贮存的要求.
4'，7-二羟基异黄酮. 本标准适用于以间苯二酚、对羟基苯乙酸和原甲酸三乙酯为主要原料经化学合成的饲料添加剂
化学名称：4，7-二羟基异黄酮
英文名称：4'，7-dihydroxyisoflavone（daidzein）
分子式：CHO
相对分子质量：254.24（2005年国际相对原子质量）
化学结构式：
2规范性引用文件
下列文件中的条款通过本标准的引用而成为本标准的条款.凡是注日期的引用文件，其随后是否可使用这些文件的最新版本.凡是不注日期的引用文件，其最新版本适用于本标准.
GB/T191包装储运图示标志GB/T13079饲料中总砷的测定 GB/T13080饲料中铅的测定原子吸收光谱法
GB/T6435饲料中水分和其他挥发性物质含量的测定GB/T6682分析实验室用水规格和试验方法GB 10648饲料标签GB/T14699.1饲料采样
3要求
3.1性状
醇，不落于水. 本品为白色或类白色粉末，无臭、无味.熔点：315℃～323℃.易溶于二甲基甲酰胺，微溶于乙
3.2技术指标
技术指标应符合表1规定，
表1技术指标
项 目 指标4'.7-二羟基异黄酮/% >97 5水分/% ≤1.0规约残渣/% <0.1销/（mg/kg) 总弹/(mg/kg) 《1 4试验方法 4.1抽样按GB/T 14699.1进行. 4.2主要仪器和设备 4.2.1 高效液相色谱仪，带紫外检测器.4.2.2超声波振荡器.4.2.3分析天平，感量0.01mg.4.2.4马福炉. 4.3试剂和溶液 除非另有规定，仅使用分析纯试剂，水为去离子水，符合GB/T6682中规定的二级水. 4.3.1三氯化铁.4.3.2铁氰化钾.4.3.3乙醇：色谱纯 4.3.4甲醇：色谱纯.4.3.585%乙醇溶液（乙醇和水的体积比为85：15）.4.3.655%甲醇溶液（甲醇和水的体积比为55145）.4.3.7标准样品：4'，7-二羟基异黄酮（含量≥98.0%）.4.3.8标样工作液：精密称取标准品0.02g~0.04g（精确至0.01mg），置于100mL的容量瓶中，加 人85%乙醇溶液适量，超声波振荡5min使试样溶解.用85%乙醇溶液定容至刻度，摇匀，于4C下保 存备用，有效期一周， 4.4鉴别 0.5%三氯化铁试液10滴，混匀，再加入0.5%铁氰化钾试液10滴，立即出现兰绿色. 4.4.1称取试样0.2mg，置小试管中，加乙醇溶液0.2mL，在水浴锅上加热65C士5C使溶解，加人4.4.2在含量测定项下记录的高效液相色谱中，样品主峰的保留时间与标准品峰的保留时间一致. 4.54.7-二羟基异黄酮含量的测定 定量， 试样用85%乙醇溶液溶解，注人高效液相色谱仪反相色谱仪中进行分离，紫外检测器检测，外标法 4.5.2液相色谱操作条件 液相色谐操作条件如下：检测波长：249nm； 色谱柱：C柱：内径4.6mm.长250mm，粒度5pm；流动相：55%甲醇，等浓度洗脱：流速：1.0mL/min; 进样体积：10pl. 4.5.3测定步骤 4.5.3.1试样溶液的制备 精密称取试样0.02g~0.04g（精确至0.01mg），置于100mL容量瓶中，加人85%乙醇溶液适量，超声波振荡5min使试样溶解.用85%乙醇溶液定容至刻度，摇匀，过0.45μm微孔滤膜. 4.5.3.2测定 按高效液相色谱仪说明书调整色谱的工作参数，向液相色谱柱中依次注人标样工作液（4.3.8）和试样溶液（4.5.3.1），得到色谱峰面积的响应值，用外标法定量. 4.5.4计算与结果表示 试样中4，7-二羟基异黄酮w以质量分数表示，数值以%表示，按式（1）计算： 式中： A：试样溶液中4'.7-二羟基异黄酮峰面积；m-标样的质量，单位为克（g)； w:-标样中4'.7-二羟基异黄酮的含量，%；A-标样溶液中4'.7-二羟基异黄酮峰面积；m：一试样的质量.单位为克（g）. 4.5.5允许差 同一分析者对同一试样同时两次平行测定结果的相对偏差应不大于5%. 4.6水分测定 按GB/T 6435执行. 4.7炽灼残渣测定 4.7.1测定步骤 称取1.0g试样（精确至0.01g），置于已在750℃士50℃炽灼至恒重的瓷坩蜗内，展平.先用小火缓缓加热至完全炭化，放冷后，加浓硫酸0.5mL~1.0mL，使其湿润，低温加热至硫酸蒸汽除尽后移人马福炉中，在750℃士50℃中炽灼至恒重. 4.7.2计算 炽灼残渣w以质量分数表示，数值以%表示，按式（2）计算： 式中： m样品质量，单位为克（g）. m：坩城与残渣总质量，单位为克（g）； m坩蜗质量，单位为克（g）； 4.8总砷测定 按GB/T 13079执行. 4.9铅含量测定 按 GB/T 13080执行. 5检验规则 5.1出厂检验 5.1.1出厂检验项目性状、4'，7-二羟基异黄酮含量.
