中华人民共和国国家标准
GB/T28069-2011
Detection and identification of bulb mites (Rhizoglyphus spp.)
中国国家标准化管理委员会 中华人民共和国国家质量监督检验检疫总局 发布
前言
本标准按照GB/T1.1-2009给出的规则起草. 本标准由全国植物检疫标准化技术委员会（SAC/TC271）提出并归口，本标准起草单位：福建农林大学、中华人民共和国福建出人境检验检疫局.本标准主要起草人：范青海、陈艳、林阳武、苏秀霞.
根螨检疫鉴定方法
1范围
明确了根螨属螨类现场检疫、实验室分离与饲养、标本制作、样品保存的方法.
本标准规定了根螨属螨类（RhixoglyphussPp.）的检疫鉴定以雌、雄成螨的形态特征为鉴定依据：
本标准适用于蔬菜、花卉、中药材等根螨寄主植物球根、球茎、鳞茎及块茎中根螨的检疫鉴定.
2术语和定义
下列术语和定义适用于本文件.
2. 1额体gnathosoma
位于身体前端或前端腹面，由颤基和两对附肢即整肢和须肢组成.
2.2 躯体idiosoma蜱螨额体后方的体段，常以围额沟与额体分开，占身体的大部分，多呈囊状.
2.3前足体propodesoma第一对和第二对足着生的体段.
2. 4后足体metapodosoma第三对和第四对足着生的体段.
2.5格氏器Grandjean’s organ 粉螨前足体前侧缘形成的一环绕额体基部的薄骨板，为指状或叉状等多种形状.
生殖区内小型杯状或盘状结构，偶尔具柄，位于生殖板上、生殖孔或散布于生殖孔两侧的体墅上.
2. 8时节吸盘tarsal suckers雄成螨特有特征，位于节I，由节毛（d，e）特化而成的构造.
2.9生殖褶genital fold无气门螨类遮盖生殖孔的分叉形的褚.
2. 10
克氏器Claparede's organ
仅发现于前幼螨和幼螨期的一种器官，位于前、中两足基节之间，具柄和半球形的端部，或呈回陷状结构，
3根螨基本信息
根螨学名：Rhizoglyphao spp
英文名：bulb mites.
属蜱螨亚Acari 真螨总目Acariformes、济螨目 Sarcoptiformes、粉螨科Acaridae.
根端各发育螨态都可随货物、土壤、包装材料以及运输工具远距离传插；近距离传播主要以休眠体（第二若螨）附在昆虫等动作上或随真菌孢子等扩散.此外根端本身可做小范围移动.
根螨寄主植物的相关资料参见附录A.
4方法原理
显微镜观察检测获得的样本卵、幼螨、第一若螨、第二若螨（休眠体）或第三若螨和成螨等，依据形态特征进行整定.
5仅器、试剂
5.1仪器与用具
放大镜、体视显微镜、生物显微镜（具油镜）解剖刀、镊子、挑针、环形针、指形管、小培养皿、吸管、小号驼毛笔、载玻片、盖玻片、电热板、干燥箱、贝氏漏斗（Berlesefunnel）、标签、铅笔、油漆笔.
5.2试剂
除另有规定外，试剂均为分析纯.
5.2.2内氏液（Nesbitt's口uid）：标本清洗、软化液，经过清洗的标本透明、舒展.配方：水合氯醛40g、 5.2.1奥氏液（Oudemans'fluid）：液浸标本保存液.配方：70%乙醇87mL、冰醋酸8mL、甘油5mL.浓盐酸2.5mL、蒸馏水25ml.5.2.3霍氏液（Hoyer’smedium）：玻片标本封固液.配方：水合氯醛100g、阿拉伯胶15g、甘油10mL、蒸馏水25mL.5.2.4中性树胶（Neutral Balsam）：玻片标本封片液.
6现场检验
检查蔬菜、花卉、中药材等植物鳞茎、球茎、块蒸、根蒸和块根等表面有无腐烂、裂缝、伤口以及土壤，肉眼或放大镜下若发现有乳白色囊状物，即有可能是根螨或粉螨科其他属的端类，需要带回实验室做进一步检查鉴定.
7实验室检测
7.1检测方法
7.1.1表面检测
在放大镜或体视显微镜下检查植物体表面，重点检查有病菌发生的腐烂组织以及有裂缝或伤口的组织，借助解剖刀和挑针仔细检查，若有乳白色囊状物活动，需要调整显微镜故大倍数检查，确认是螨类 后，用挑针或驼毛笔挑人盛有奥氏液的指形管中，同时放人采集标签，并登记采集地点、时间、输出国家或地区、寄主、采集人等内容.
7.1.2贝氏漏斗分离
取待检植物活体、残片、土屑等放置于贝氏漏斗网上，漏斗下放置承接器Ⅲ，器Ⅲ内放少量清水，以防螨逃逸或干死，用40W灯泡为热源，烘烤干燥24h，然后将承接器Ⅲ放在体视显微镜下检查，发现螨类后，挑人盛有奥氏液的指形管，并做好标签和记录.
7.2根螨的饲养
对无法确定种类的卵、幼螨、若螨，可将其放置在盛有酵母片的培养Ⅲ或指形管里，然后放于温度为25℃～30℃、相对湿度90%以上的黑暗培养箱里何养，同时做好饲养记录，数天至十多天后发育为成螨，在体视显微镜下进行初步观察，制作成玻片标本，再进行鉴定.
7.3标本制作
7.3.1清洗
在体视显微镜下，用环形针将螨移入盛有内氏液的小培养Ⅲ中，浸泡24h.
7.3.2制片
在载玻片上滴1滴～2滴的霍氏液.从内氏液中挑出根螨，触碰滤纸去除多余液体，然后故人霍氏液，整姿后，盖上盖玻片，放在60W白炽灯或500W电热板上加热至气泡排出，用油漆笔在载玻片下方 标出螨体位置，并写明采集标签（见图1）.在低倍显微镜下检查、调整螨体位置，用40倍以下物镜进行初步鉴定.
图1玻片标本标签标注方法图示
7.3.3玻片标本保藏
将玻片标本放在50℃左右干燥箱中干燥，1周后即可用于油镜（100倍）观察.干燥约3个月后，在盖玻片周围封中性树胶，继续干燥1d～2d即可在常温下保存，也可置于干燥器中长期保存.
