中华人民共和国国家标准
GB/T29663-2013
Determination of sudanI，Ⅱ，ⅢVin cosmeticsHigh performance liquid chromatography
中国国家标准化管理委员会 中华人民共和国国家质量监督检验检疫总局 发布
前言
本标准按照GB/T1.1-2009给出的规则起草.本标准由中国轻工业联合会提出. 本标准由全国香料香精化妆品标准化技术委员会（SAC/TC257）归口本标准起草单位：上海市日用化学工业研究所（国家香料香精化妆品质量监督检验中心）中国检验检疫科学研究院、上海市计量测试技术研究院.本标准主要起草人：武晓剑、李琼、马强、李懿睿、沈敏、康薇.
引言
本标准的被测物质是我国（化妆品卫生规范》规定的禁用物质，不得作为化妆品原料即组分添加到范》对化妆品的一般要求，即在正常及合理的可预见的使用条件下，不得对人体健康产生危害. 化妆品中.如果技术上无法避免禁用物质作为杂质带人化妆品时，则化妆品成品应符合《化妆品卫生规
目前我国尚未规定这些物质的限量值，本标准的制定仅对化妆品中测定这些物质提供检测方法.
化妆品中苏丹红I、Ⅱ、Ⅲ、V的测定 高效液相色谱法
1范围
本标准规定了化妆品中苏丹红色素I、Ⅱ、Ⅲ、IV的液相色谱测定方法，本标准适用于唇膏、唇彩、粉、粉块、指甲油彩妆类化妆品中苏丹红I、Ⅱ、Ⅲ、I的测定，检出限均为50 μg/kg，定量限均为150μg/kg.
2规范性引用文件
下列文件对于本文件的应用是必不可少的，凡是注日期的引用文件，仅注日期的版本适用于本文件.凡是不注日期的引用文件，其最新版本（包括的修改单）适用于本文件.
GB/T6682分析实验室用水规格和试验方法
3原理
样品用乙晴超声提取，过滤后，经配有二极管阵列检测器的高效液相色谐仪检测，外标法定量.
4试剂和材料
除非另有规定，所用试剂均为分析纯，水为GB/T6682规定的一级水.4.1苏丹红I、II、I、IV标准物质：苏丹红I、I、Ⅲ、IV标准物质的纯度不小于90.O%，CAS登录号、 中文名称、英文名称、分子式、相对分子质量、结构式参见附录A.4.2丙酮：色溶纯.4.3乙晴：色谱纯.4.4甲酸：分析纯.4.5四氢呋哺：分析纯. 4.6N.N-二甲基甲酰胺：分析纯.4.7甲酸的水溶液（0.1%）：取1mL甲酸（4.4），用水定容至1000ml.4.8甲酸的乙睛溶液（0.1%）：取1m1甲酸（4.4），用乙睛（4.3）定容至1.000mL.4.9苏丹红混合储备液：准确称取苏丹红标准样品I、Ⅱ、Ⅲl、IV（4.1）各0.05g（精确至0.0001g)，用4.10标准工作溶液：用乙晴（4.3）将上述混合标准储备液分别配制成5μg/mL、10pg/mL、15 yg/ml、 乙（4.3）定容于100mL容量瓶中，得苏丹红混合标准储备液，于4C避光保存三个月，25μg/mL、50pg/ml.标准工作溶液，现用现配.
5仅器和设备
5.1高效液相色谱仪：配二极管阵列检测器，5.2分析天平：感量分别为0.0001g和0.01g.
GB/T 29663-2013
5.3超声波清洗器.5.40.22μm有机微孔滤膜（避免使用尼龙材质）.
6测定步骤
6.1样品处理
6.1.1粉、粉块类样品
称取样品1.0g（精确至0.0001g）于25mL比色管中，用乙晴（4.3）定容至刻度，超声提取后，经0.22μm微孔滤膜（5.4）过滤，以待进样.
6.1.2唇彩类样品
称取样品1.0g（精确至0.0001g）于25mL比色管中，先加入适量四氢呋喃（4.5）溶解基质，用乙睛（4.3）定容至刻度，超声提取后，经0.22μm微孔滤膜（5.4）过滤，以待进样.
6.1.3指甲油样品
基质，用乙精（4.3）定容至刻度，超声提取后，经0.22μm微孔滤膜（5.4）过滤，以待进样. 称取样品1.0g（精确至0.0001g）于25mL比色管中，先加入适量N，N-二甲基甲酰胺（4.6）溶解
6.2测定
6.2.1色谱条件
高效液相色谱测定的参考条件如下：
a）色谱柱：C18柱（i.d.5pm 250mm×4.6mm）;b）流动相A相：V（0.1%甲酸的水溶液）：V（乙晴）=85：15，B相：V（0.1%甲酸的乙晴溶液） V（丙酮）=8020；c）梯度洗脱时间：见表1；d）流速：1. 0 mL/min;e）柱温：30℃；f）检测波长：苏丹红1号478nm、苏丹红l号500nm、苏丹红Ⅲ号500nm、苏丹红IV号520nm； g）进样量：10pl
表1流动相梯度表
流动相时间/min A/% B/%0 25 7510 25 7525 0 10032 0 10035 40 25 25 75 75
