中华人民共和国国家标准
GB/T30399-2013
皮革和毛皮化学试验 致癌染料的测定
Leatherand furChemical tests-Determination of carcinogenic dyestuffs
中国国家标准化管理委员会 中华人民共和国国家质量监督检验检疫总局 发布
前言
本标准按照GB/T1.1-2009给出的规则起草.本标准由中国轻工业联合会提出. 本标准由全国皮革工业标准化技术委员会（SAC/TC252）归口.本标准起草单位：中华人民共和国福建出人境检验检疫局、国家皮革质量监督检验中心（浙江）、中国皮革和制鞋工业研究院、国家鞋类检测中心.
本标准主要起草人：陈学灿、毛树禄、陈洪波、赵立国、王玲霞、王晓霞、尹洪雷.
皮革和毛皮化学试验 致癌染料的测定
1范围
本标准规定了染色皮革、毛皮产品中9种致癌染料及能裂解释故有害芳香胺的分散黄23、分散橙149染料的测定方法.
本标准适用于染色皮革、毛皮产品.
2规范性引用文件
下列文件对于本文件的应用是必不可少的.凡是注日期的引用文件，仅注日期的版本适用于本文件.凡是不注日期的引用文件，其最新版本（包括的修改单）适用于本文件.
GB/T6682分析实验室用水规格和试验方法QB/T1267毛皮成品样块部位和标志QB/T1272毛皮成品化学分析试样的制备及化学分析通则QB/T2706皮革化学、物理、机械和色牢度试验取样部位QB/T2716皮革化学试验样品的准备
3原理
样品经甲醇超声波提取、滤膜过滤后，采用具有二极管阵列检测器的高效液相色谱（HPLC-DAD）或高效液相色谱-质谐/质谱联用仪（HPLC-MS/MS）测定和确证，外标法定量.
4试剂
除非另有说明，在分析中所用试剂均为分析纯，水为符合GB/T6682规定的二级水，
4.2甲醇，HPLC级. 4.1乙晴，HPLC级.4.3乙酸，HPLC级.4.45%氨水（质量分数）.4.5磷酸二氢四丁基铵溶液，0.0025mol/L，用5%氨水（4.4）调节pH至7.5.4.6乙酸铵溶液，0.005mol/L 用乙酸（4.3）调节pH至6.0. 4.7单组分（附录A）标准储备溶液，200mg/L甲醇溶液.4.8混合标准溶液，分别移取一定体积的11种致癌染料的标准储备溶液（4.7），置于同一个棕色容量瓶中，用甲醇稀释至刻度，摇匀，混合标准溶液的浓度可根据实际需要配制.
5仪器和装置
5.1管状硬质玻璃提取器，50mL，带旋盖（有聚四氟乙烯垫片）.
GB/T 30399-2013
5.2可控温超声波发生器，输出功率：420W，频率：40kHz，（70土2）C.5.3分析天平，感量：0.1mg.5.5聚四氟乙烯薄膜过滤头，0.45μm. 5.4一次性注射器，2ml.5.6高效液相色谱仪：配有二极管阵列检测器（HPLC-DAD）.5.7高效液相色谱-质谱/质谱联用仪：配电喷雾离子源（HPLC-MS/MS）.
6试样制备
6.1取样
6.1.1标准部位取样
6.1.1.1皮革：按QB/T2706的规定进行.6.1.1.2毛皮：按QB/T1267的规定进行.
6.1.2非标准部位取样
如果不能从标准部位取样（如直接从鞋、服装上取样），应在可利用面积内的任意部位取样，样品应具有代表性，对于毛皮样品，取样过程应避免毛被损失，保持毛被完好，并在试验报告中详细记录取样情况，
6.2试样的制备
6.2.1皮革：按QB/T2716的规定进行.6.2.2毛皮：按QB/T1272的规定进行.6.2.3除去样品上面的胶水、附着物，将试样混匀，装人清洁的试样瓶内待测.
7试验步骤
7.1样品前处理
称取剪碎的试样1g（精确至0.01g）置于玻璃提取器（5.1）中.加入10.00m1甲醇（4.2），旋紧盖子，将提取器置于（70士2）℃C的超声波发生器（5.2）中处理40min，冷却至室温后，滤膜（5.5）过滤，作为测试液备用.
7.2标准工作溶液的制备
将混合标准溶液（4.8）用甲醇配制一系列合适浓度的标准工作溶液.
7.3HPLC-DAD方法
7.3.1HPLC-DAD分析条件
由于测试结果与使用的仪器和条件有关，因此不可能给出色谱分析的普遍参数.采用下列参数已被证明对测试是合适的：
a）色谱柱：ZORBAX Eclipse XDB，4.6 mm×250 mm×5pm，或相当者：b）流动相A：0.0025mol/L.磷酸二氢四丁基铵溶液；流动相B：乙睛：c）柱温：50℃；
d）流速：0.6mL/min;e)检测波长：200nm~900nm;定量波长：380nm.450nm，500nm，540nm和590nm; 进样量：20gL；h）梯度洗脱程序：见表1. g)
表1梯度洗脱程序
时间/min 流动相A/% 流动相B/% 通变方式0 20 80 线性35 100 0 线性40 100 0 线性41 20 80 线性45 20 80 线性
7.3.2HPLC-DAD 测定
分别取测试液和标准工作液进行HPLC-DAD分析，通过比较试样和标样在规定的检测波长处色谱峰的保留时间以及光谱图进行定性，以外标法定量.
注：采用7.3.1分析条件，11种染料色谱峰保留时间、色谱图和紫外线可见光谱图参见附录A、附录B和附录C.
7.4HPLC-MS/MS方法
7.4.1HPLC-MS/MS分析条件
由于测试结果与使用的仪器和条件有关，因此不可能给出色谱分析的普遍参数.采用下列参数已被证明对测试是合适的：
b）流动相A：0.005mol/L乙酸铵溶液（pH=6.0):流动相B：乙晴： a）色谱柱：EelipsePlusC、2.1mm×100mm×1.8gm，或相当者；c）柱温：40C；流速：0.2mL/min;e) 进样量：2L；g）离子化模式：电喷雾电离正负离子模式： 梯度洗脱程序：见表2.质谱扫描方式：多反应监测；i）分辨率：单位分辨率；j）干燥气温度：325C；k）干燥气流量：101/min；1）雾化气压力：2.7×10°Pa（40 psi）；
m）其他质谱条件参见附录D.
