中华人民共和国国家标准
GB/T30931-2014
Determination of benzalkonium chloride in cosmeticsHigh performance liquid chromatography
中华人民共和国国家质量监督检验检疫总局 中国国家标准化管理委员会 发布
前言
本标准按照GB/T1.1-2009给出的规则起草.
本标准由中国轻工业联合会提出.
本标准由全国香料香精化妆品标准化技术委员会（SAC/TC257）归口.
本标准起草单位：国家化妆品质量监督检验中心（北京）、北京市海淀区产品质量监督检验所、上海市日用化学工业研究所.
本标准主要起草人：刘艳琴、王浩、史海良、杨红梅、郭启雷、潘红艳、李琼、武晓剑、沈敏、钱茵.
化妆品中苯扎氯铵含量的测定 高效液相色谱法
1范围
本标准规定了化妆品中苯扎氯铵的高效液相色谱测定方法.本标准适用于膏霜、香波、水剂类等化妆品中苯扎氯铵的测定.本标准方法检出限为30mg/kg，定量限为100mg/kg.
2规范性引用文件
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GB/T6682分析实验室用水规格和试验方法
3原理
样品经含0.5%甲酸的甲醇溶液超声提取，旋转蒸发富集提取液后，经SCX色谱柱分离，利用二极管阵列检测器对其进行准确分析，外标法定量，液相色谱-质谱确证.
4试剂和材料
除非另有说明，所用试剂均为分析纯，水为GB/T6682规定的一级水.
4.1甲醇：色谱纯.4.2甲酸：色谱纯. 4.3乙晴：色谱纯.4.4乙酸铵.4.5三乙胺.4.7冰醋酸.4.850%甲醇水溶液：量取500mL甲醇（4.1）与500mL水混合. 4.90.5%甲酸的甲醇溶液：移取5mL甲酸（4.2）至1000mL容量瓶中，甲醇（4.1）定容.4.10标准样品：苯扎氯铵（-CH-CHNC1、n-CH-CHNCln-CH-C HNCD）标准样品纯度不小于99%.苯扎氯胺标准样品信息参见附录A.4.11标准溶液4.11.13种苯扎氯铵（-CH-C HNC1、n-CH-C HNCI、n-CH-CHNCl）标准储备液：各 称取0.5g（精确至0.000 1g）-CH-CHNC1-C H-C HNC1x-CHC HNCI 标准样品（4.10)，分别置于100mL容量瓶中，用50%甲醇水溶液（4.8）溶解定容.4.11.2苯扎氯铵（-C：H-CHNCl、n-CH-CHNC1-CH-C;HNCI）混合标准工作溶液：
4.6氯化钠
50mL容量瓶中，用含0.5%甲酸的甲醇溶液（4.9）定容，得到浓度分别为0.00mg/mL0.01mg/ml、0.05 mg/mL、0.10mg/mL、0.50 mg/mL、1.00mg/mL的混合标准工作溶液.（4.5），用冰醋酸（4.7）调节至pH=4.0，过0.45pm滤膜（4.13），待用.4.13滤膜：0.45pm，有机相.
5仪器与设备
5.1高效液相色谱仪：配二极管阵列检测器.5.2申联质诺仪：配有电喷雾离子源.5.3分析天平：感量分别为0.0001g和0.001g.5.4超声波清洗器.5.5旋转蒸发仪. 5.6具塞比色管：10mL和25ml.
6分析步骤
6.1样品制备
6.1.1膏霜、香波类样品
称取0.5g样品，精确至0.001g.置于25mL比色管中，用含0.5%甲酸的甲醇溶液（4.9）定容.超声波提取20min，经滤纸过滤[如有浑浊或乳化现象，加人约0.2g的氯化钠（4.6）]，吸取15mL滤液至100mL蒸发瓶内，并将其接至旋转器上，于45C水浴中减压蒸馏至干，用3mL含0.5%甲酸的甲醇溶 液（4.9）溶解，过0.45μm滤膜（4.13），滤液供液相色谱仅分析.
6.1.2水剂类样品
称取1.0g样品，精确至0.001g.置于10mL比色管中.用含0.5%甲酸的甲醇溶液（4.9）定容至刻度，超声波提取10min，经滤纸过滤，过0.45μm滤膜（4.13），滤液供液相色谱仅分析.
6.2测定
6.2.1液相色谱条件
液相色谱测定参考条件如下：
a）色谱柱：SCX色谱柱5μm，250mm×4.6mm（i.d），或性能相当者；b）柱温：25C；c）检测波长：260nm；d）进样量：20pl; e）流动相：溶剂A：乙晴（4.3）.溶剂B：乙酸铵溶液（4.12）.液相色谱梯度洗脱条件见表1.
表1液相色谱梯度洗脱条件
时间/min 乙睛/% 乙酸溶液/%0 100 015 80 2022.1 22 100 80 200
6.2.2标准工作曲线绘制
分别移取20prl浓度为0.00mg/mL、0.01mg/mL、0.05mg/mL、0.10mg/mL、0.50mg/mL1.00mg/mL的混合标准工作溶液（4.11.2），按液相色谱条件（6.2.1）进行测定，以色谱峰的峰面积为织坐标，对应的溶液浓度为横坐标作图，绘制标准工作曲线.3种苯扎氯铵同系物标准样品色谱图参见附录 B的图 B.1
6.2.3定量分析
按液相色谱条件（6.2.1)对待测样液进行测定，外标法定量.待测样液中被测物的响应值应在标准工作曲线的线性范围之内.含量高的样品可取适量样品溶液用含0.5%甲酸的甲醇溶液（4.9）稀释后进行测定.
6.3空白试验
除不称取样品外，均按上述测定条件和步骤进行.
7结果计算
7.1样品中3种苯扎氯铵含量的计算
样品中3种苯扎氯铵含量按式（1）计算：
式中：
X样品中每种苯扎氯铵的含量（即Xc，Xc，Xc），单位为毫克每千克（mg/kg）：c 样品测定液中每种苯扎氯铵的浓度，单位为微克每毫升（μg/mL）；V 一样品定容体积，单位为毫升（mL）；乘积因子，对于水剂类化妆品，k=1；对于膏霜、香波类化妆品，=0.2；m样品的质量，单位为克（g）. 计算结果应扣除空白值，计算结果保留至小数点后两位.
7.2样品中3种苯扎氯铵总量的计算
样品中3种苯扎氯铵总量按式（2）计算：
（2）
式中：
X-样品中3种苯扎氯铵的总含量，单位为毫克每千克（mg/kg）：
