中华人民共和国国家标准
GB/T31270.17-2014
化学农药环境安全评价试验准则 第17部分：天敌赤眼蜂急性毒性试验
Test guidelines on environmental safety assessment for chemical pesticidesPart 17:Trichogramma acute toxicity test
中国国家标准化管理委员会 中华人民共和国国家质量监督检验检疫总局 发布
前言
GB/T31270《化学农药环境安全评价试验准则》分为21个部分：
第1部分：土壤降解试验； 第2部分：水解试验：一第3部分：光解试验：第4部分：土壤吸附/解吸试验；第5部分：土壤淋溶试验： 一第6部分：挥发性试验：第7部分：生物富集试验：第8部分：水-沉积物系统降解试验；-第9部分：乌类急性毒性试验；第11部分：家蚕急性毒性试验； 第10部分：蜜蜂急性毒性试验；-第12部分：鱼类急性毒性试验；第13部分：涵类急性活动抑制试验；第14部分：藻类生长抑制试验；第16部分：土壤微生物毒性试验： 第15部分：账蚂急性毒性试验；第17部分：天敌赤眼蜂急性毒性试验：一第18部分：天敌两栖类急性毒性试验；-第19部分：非靶标植物影响试验； 第20部分：家畜短期饲喂毒性试验；第21部分：大型甲壳类生物毒性试验.本部分是GB/T31270的第17部分.本部分按照GB/T1.1-2009给出的规则起草.请注意本文件的某些内容可能涉及专利.本文件的发布机构不承担识别这些专利的责任. 本部分由中华人民共和国农业部提出并归口.本部分负责起草单位：农业部农药检定所、环保部南京环境科学研究所.本部分主要起草人：林荣华、陈红英、王红、韩志华、张燕宁、余向阳、薛明、吴若涵.
第17部分：天敌赤眼蜂急性毒性试验 化学农药环境安全评价试验准则
1范围
GB/T31270的本部分规定了化学农药对赤眼蜂成蜂急性毒性试验的材料、条件、操作、质量控制、数据处理、试验报告等的基本要求.
本部分适用于为化学农药登记而进行的赤眼蜂成蜂急性毒性试验，其他类型的农药可参照使用.
本部分不适用于易挥发和难溶解的化学农药.
2术语和定义
下列术语和定义适用于本文件.
2.1
半致死用量medianlethalrate
在急性毒性试验中，引起50%供试生物死亡时的供试物使用量，用LR表示.
注：单位为mgai/cm²，即单位面积上所附着的供试物有效成分的量.
2.2
安全系数safetyfactor
赤眼蜂的半致死用量LR与供试农药的田间推荐施用浓度的比值，可用式（1）表示：
2.3
供试物test substance
试验中需要测试的物质.
2.4
化学农药chemical pesticide
创新而成，为仿生合成农药. 利用化学物质人工合成的农药.其中有些以天然产品中的活性物质为母体，进行仿制、结构改造，
同义词：有机合成农药 synthetic organic pesticide，
[NY/T 1667.1-2008，定义 2.3.1]
2.5
原药technical material
在制造过程中得到的有效成分及杂质组成的最终产品，不能含有可见的外来物质和任何添加物，必要时可加人少量的稳定剂.
[NY/T1667.2-2008，定义2.5.1]
2.6
制剂formulation product
由农药原药（或母药）和助剂制成使用状态稳定的产品.
[NY/T 1667.2-2008 定义 2.4]
GB/T 31270.17-2014
2.7
有效成分active ingredient；a.i.
农药产品中具有生物活性的特定化学结构成分.
[NY/T1667.2-2008.定义3.1]
3试验概述
将供试物用丙酮等溶剂配制成系列不同浓度的稀释液，定量加入指形管中滚吸成药膜管，然后将试验用赤眼蜂放入其中爬行1h后转人无药指形管，24h后调查管中的死亡和存活蜂数，求出农药对赤 眼蜂的LR值和95%置信限.
4试验方法
4.1材料和条件
4.1.1供试生物
选择松毛虫赤眼蜂（Trichogramma dendrolimi）、玉米赤眼蜂（Trichogramma ostriniae）、稻赤眼蜂（Trichogramma japonicam）、广赤眼蜂（Trichogrammarvanescens）、拟澳洲赤眼蜂（Tri-chogrammaconfasum）或舟蛾赤眼蜂（Trichogramma closterae）等的其中一种进行试验.
4.1.2供试寄主生物
作蚕（Antheraeα pernyi）卵或米蛾（Corcyrαcephalonica）卵.
4.1.3供试物
农药制剂、原药或纯品.制剂用蒸馏水溶解，原药或纯品用丙酮等溶剂溶解.
4.1.4主要仪器设备
主要仪器设备如下：
指形管：-移液器； 人工气候箱；容量瓶等.
4.1.5试验条件
试验应在温度25℃士2℃、相对湿度70%~80%、避光条件下进行.
4.2试验操作
4.2.1试验用成蜂的预培养
将被寄生的寄主卵置于温度25℃士2C、相对湿度50%~80%、避光条件下培养，羽化出的成蜂用于急性毒性试验.试验成蜂应来源于同一时间、同一批次的寄生卵.大量出蜂一般在开始羽化后的24h左右，试验应使用开始羽化后48h内羽化的成蜂.
4.2.2预试验
按正式试验的条件，以较大的间距设置4个～5个浓度组，求出试验用赤眼蜂最高全存活剂量与最低全致死剂量，以确定正式试验的用药剂量范围.
4.2.3正式试验
根据预试验结果，正式试验按等比关系设置至少5个梯度浓度（儿何级差应控制在2.2倍以内），并设空白对照组，用溶剂溶解的还需设溶剂对照组，对照组和每个处理组均设3个重复，每个重复100头士10头赤眼蜂.在指形管中加人定量的供试药液，将药液在指形管中充分滚吸直至晾干制成药膜管，然 后将供试赤眼蜂放人药膜管中爬行1h后转入无药指形管中，何喂10%蜂蜜水，并封紧管口.对照组的成蜂数量与处理组相同，对照组与处理组应同时进行.在转入无药指形管中24h后检查并记录管中死亡和存活蜂数.
4.2.4限度试验
设置上限剂量为供试物田间施用量的10倍.若试验用赤眼蜂在供试物达到上限用量时未出现死亡，则无需继续试验：若供试物溶解度小于田间施用量的10倍时，则采用其最大溶解度作为上限浓度.
4.3数据处理
4.3.1统计分析方法的选择
LR的计算可采用直线内插法、概率单位图解法或机率值法估算，也可应用有关毒性数据计算软件进行分析和计算.
4.3.2寇氏法
用寇氏法可求出赤眼蜂在24h的LR值及95%置信限.LR的计算见式（2）：
式中：
相邻浓度比值的对数；∑P一各组死亡率的总和（以小数表示）.
X.-最高浓度的对数；
95%置信限的计算见式（3）：
标准误的计算见式（4）：
（4)
式中：
-1个组的死亡率；q-1-p:"-各浓度组赤眼蜂的数量.
4.3.3直线内插法
采用线性刻度坐标，绘制死亡百分率对试验物质浓度的曲线，求出50%死亡时的LR值.
