中华人民共和国国家标准
GB/T33020-2016
Detection and identification ofDasineura mali （Kieffer)
中国国家标准化管理委员会 中华人民共和国国家质量监督检验检疫总局 发布
前言
本标准由全国植物检疫标准化技术委员会（SAC/TC271）提出并归口 本标准按照GB/T1.1一2009给出的规则起草.本标准起草单位：中华人民共和国天津出人境检验检疫局、天津农学院、南开大学.本标准主要起草人：牛春敬、焦克龙、胡佳续、冯洁、廖芳、卜文俊、黄国明、杨韶勇.
苹果痿蚊检疫鉴定方法
1范围
本标准适用于苹果樱蚊的检疫和鉴定. 本标准规定了苹果樱蚊的检测、何养、标本制作和室内鉴定等方法.
2术语和定义
下列术语和定义适用于本文件.
2.1 体长body length蚊成虫虫体头最前部到腹部末端的长度.
2.2翅长wing length
蚊成虫虫体从翅基到翅端的长度.
2.3翅端wing apex
蚊成虫翅的外缘离翅基最远端.
2.4
结部node
蚊成虫触角鞭小结（flagellomere）基部着生微刺的膨大部分，与其端部的细长的颈部（neck）相对.
2.5
环丝circumfila
或环状结构，其两端均着生于结部无游离端，雄虫通常比雌虫环丝发达. 蚊科多数种类在双翅目中的特有结构，为成虫触角鞭小节结部上横向环绕并有纵向相连的带状
3苹果瘦蚊基本信息
学名：Dasineura mali(Kieffer，1904).
英文名:apple leaf curling midge apple leaf midge.
中文名：苹果蚊，或称苹果（叶）樱蚊.
分类地位：苹果瘦蚊属于双翅目Diptera，擦蚊科Cecidomyidae，叶塞蚊属（也称达癌蚊属）Dasinenra Rondani.叶蚊属全世界已知466种（Gagne，2010），其中苹果瘘蚊的重要近似种为裂叶瘘蚊 Dasineura pyri (Bouehe 1847)
传播途径：苹果蚊主要以生活于寄主卷叶内的幼虫以及结茧于寄主植株附带土壤中的幼虫和蛹，随寄主植物果实和植株进行远距离传播.
苹果癌蚊其他信息参见附录A
4方法原理
根据苹果癌蚊危害状，在检疫现场肉眼观察寄主植物，取得幼虫、或成虫，如取得幼虫和蛹需饲养至成虫，解剖雌雄成虫并制成玻片标本在显微镜下观察，根据形态特征对种类进行判定.
5器材和试剂
5.1器材
显微镜、体视显微镜、干燥箱、解剖针、眼科镊、0号毛笔、解剖穴盘、表面Ⅲ、烧杯、载玻片、盖玻片、吸管、医用纱布、橡皮筋、养虫瓶（500mL或1L）、生物培养箱、解剖刀、小剪刀、培养土、标签、封口塑料袋，
5.2试剂
75%乙醇溶液、95%乙醇溶液、无水乙醇溶液、10%氢氧化钠溶液、二甲苯、苯酚、冰乙酸、香柏油、中性树胶（以上使用化学试剂均为分析纯）.
6检测与饲养
6.1检测
在检疫现场仔细观察寄主植物叶片、果实以及植株所带泥土上是否有幼虫或蛹如发现有卷叶，则用解副刀和小剪刀把卷叶剖开查找，如发现幼虫或，连同寄主植物一起装入可封口塑料袋.塑料袋加标签和编号，记录时间、地点、寄主、采集人、虫源地等，带回实验室.
6.2饲养
现场检查获得的幼虫或蛹需要进一步何养至成虫再进行鉴定.将带有幼虫的寄主叶片或踊放人养虫瓶中，期内置放一个盛有培养土的表面血供幼虫化及羽化，然后将养虫瓶置于温度25～30℃、相对湿度50%~80%的生物培养箱内饲养.
7标本的制作准备
7.1标本准备
饲养羽化后的或直接采集到的癌蚊成虫，用0号毛笔蘸取75%乙醇溶液将成虫移人75%乙醇溶液中保存，以备制片.
7.2雌雄成虫玻片标本
苹果癌蚊雌雄成虫玻片标本制作方法参见附录B.
8实验室鉴定
8.1瘦蚊科鉴定特征
成虫是微小至小型的蚊类昆虫，体长通常0.50mm～5.00mm，触角通常较长，翅脉脉序简单，纵脉
不多于5条，腔距缺失.幼虫圆柱状或扁圆柱状，老熟幼虫前胸腹面具胸骨片.
8.2叶痴蚊属鉴定特征
下额须4节；踏节爪均具齿：R脉在翅端稍前与C脉汇合：雄虫生殖节上的抱器基节中基瓣由基部向端部渐细，并儿乎与阳茎等长；雌虫产卵器可伸缩，且尾须融合；雌虫第8腹节背板明显长于第7腹节背板，并且趋向于纵向延伸并左右分离.
8.3苹果痿蚊鉴定特征
8.3.1成虫
成虫鉴定特征如下（参见附录C）：
-体型：体小型，体长：雄虫1.50mm~2.00mm，雌虫1.70mm~2.30mm（正常体态，即非产卵状态，产卵器不完全伸长）;翅长：雄1.30mm~1.50mm雌1.55mm~1.70mm-一体色：虫体深棕色，雌虫腹部呈淡红色或浅棕色：一下额须：下额须41节（包括负唇须节）（参见图C.1中A）；-触角：212~13节，多为213节.触角单结型，雄虫触角颈部相对较长，雌虫颈部极短，环 丝带状贴生（参见图C.1中B C）；翅：透明，密被毛和鳞片：R脉、C脉和R；脉粗壮；R：脉在翅基部1/2靠前处与C脉汇合：R:脉在翅端稍靠前处与C脉汇合：M脉微弱在翅基部和翅缘处弱化近于消失：Cu脉分叉呈大约50°角：PCu脉与Cu脉儿乎平行（参见图C.1中D）；一时节爪：各足踏节的爪均具基齿，爪缓慢弯曲，其基部具较小的三角状突出物，基齿约为爪长的 2/3，爪间突约与爪等长，爪垫细长棒状，约为爪长的1/2（参见图C.2中E）；雄虫生殖节：抱器基节较壮，近基部内侧具被短毛的中基瓣在一侧抱握阳茎；抱器端节粗壮、不明显弯曲，近基部膨大，端部具单齿；尼须分2瓣，瓣间宽阔深凹：肛下板略短于尾须，分2瓣，间宽阔浅凹；阳茎骨化，略短于抱器基节（参见图C.2中F，G，H，1）；一雌虫生殖节：产卵器较长，可伸缩.尾须融合、不分瓣，不骨化，近圆柱状，具稀疏的长刚毛，末 端着生微刺；肛下板细管状，不骨化，密被短毛，末端着生若干长刚毛（参见图C.2中J）.
8.3.2卵
长卵圆状，呈涉红色，长约0.60mm，其长为宽的5倍左右，
8.3.3幼虫
初龄幼虫体色为白色至乳白色，至老熟后转变为橘红色：老熟幼虫体长1.50mm~2.50mm，最长可达 3.00 mm
8.3.4蝇
离包覆于白色丝质茧中：体色橘红色.体长1.90mm~2.00mm
8.4苹果痿蚊与近似种的区别
苹果擦蚊与重要近似种裂叶樱蚊D.pyri（Bouche，1847）区别如下：
-成虫：前者雄虫生殖节抱器端节略直、弯曲不明显，且其基部明显膨大，而后者雄虫抱器端节向内均匀弯曲明显，且其基部不明显膨大：前者雄虫肛下板端缘浅回，即其凹形长明显短于宽，而后者雄虫肛下板端缘明显深回，即其凹形宽明显短于长（参见图C.3）.
