中华人民共和国国家标准
GB/T33123-2016
Detection and identification of Ctenopseustis obliquana (Walker)
中国国家标准化管理委员会 中华人民共和国国家质量监督检验检疫总局 发布
前言
本标准按照GB/T1.1一2009给出的规则起草.
本标准起草单位:中华人民共和国山东出入境检验检疫局、中华人民共和国珠海出人境检验检疫局.
本标准主要起草人:张京宣、魏晓案、尼秀媚、白桦、衣维贤、粟智平、廖力、王建力.
斜纹卷蛾检疫鉴定方法
1范围
本标准规定了斜纹卷Ctenopseuxtis obliquana(Walker)的检测、饲养、标本制作和鉴定方法等.本标准适用于斜纹卷蛾的检测、何养和鉴定.
2规范性引用文件
下列文件对于本文件的应用是必不可少的.凡是注日期的引用文件,仅注日期的版本适用于本文件.凡是不注日期的引用文件,其最新版本(包括的修改单)适用于本文件.
SN/T2959昆虫常规检疫规范
3术语和定义
下列术语和定义适用于本文件.
3.1
由鳞片排列成的斑纹.注:在基部的为基斑翅中部的为中带掌翅外缘前端的为编纹.
鳞翅目雄性外生殖器中两侧成对的由第九腹节演变而来的片状结构,大而显著.
抱器端cucullus 鳞翅目雄性外生殖器中,抱器的背面端部区域.
3.4阴片sterigma鳞翅目雌性生殖系统中围绕交配孔周围的骨化结构,其中包括前阴片和后阴片.
鳞翅目雄性外生殖器中形似屋脊状或头巾状结构,由第9腹节背板演变形成. 背兜tegumen
背兜后端向下弯曲的片状或者钩状结构,发达,上面有毛.
3.7
额形突gnathos:scaphium:subscaphium
又称”下齿形突”,由背兜后缘发生的一对附器,位于爪形突之下,并可以向下向后围绕肛管,在其下方中央会合.
GB/T 33123-2016
囊导管ductusbursae
鳞翅目雌性生殖系统中由阴门伸至交配囊的导管.
3.10
囊突signum
鳞翅目雌性生殖系统中交配囊壁内高度骨化的刺状或小钩状构造.1个或数个.
4斜纹卷螨基本信息
中文名:斜纹卷蛾.
别名:棕头卷叶蛾.
学名:Ctenopseustis obliguana(Walker).
英文名 :oblique tortrix -light-brown apple mothapple laef roller.
异名:Teras obliquana Walker Teras spurcatana Walker Sciaphila transtrigana Walker Scia phila turbalentana Walker Tortrix ropeana Felder &. Rogenhofer Tortrix herana Felder &.Rogenhofer Cacoecia charactana Meyrick Cacoecia inana Meyrick.
分类地位:属鳞翅目Lepidoptera,卷蛾科Tortricidae,黄卷族Archipini,Crenopseastis 属.
斜纹卷蛾幼虫为杂食性害虫,主要以幼虫为害幼果和收获后的果实,也可以取食嫩梢、叶、茎和芽等.主要以幼虫藏匿于果弯部位远距离转播扩散,其寄主、地理分布和生物学特性参见附录A.
vnα Walker;C.herana Felder &. Rogenhofer;C. filicis Dugdale;C.fraterna Philpott 其区分特征参 该属中具有重要经济意义的种类除斜纹卷蛾C.obligaana(Walker)外,还主要有以下4种:C.ser见附录B和附录C.
5方法原理
根据斜纹卷蛾的为害状、生物学特性和形态特征进行种类鉴定.在检疫现场仔细检查寄主植物,如果发现幼虫或需送实验室饲养至成虫,利用体视显微镜进行观察鉴定.如果利用外部形态特征判定其种类仍有疑问时,需进一步解剖雌雄成虫外生殖器并制成玻片标本,在生物显微镜下观察.
6器材和试剂
6.1器材
可封口塑料袋、标签、吸水纸、镊子、光照培养箱、小毛笔、指形管、纱布、冰箱、剪刀、刀片、昆虫针、滴管、培养皿、载玻片、盖玻片、体视显微镜、生物显微镜.
6.2试剂
霍氏封固剂(用阿拉伯树胶30g蒸馏水50mL:水合氯醛200g:甘油20mL配制而成)、幼虫保存液[甘油:福尔马林:乙醇(体积比)=1:1:1配制而成]、树脂胶、无水乙醇、75%乙醇、85%乙醇、95%乙醇、10%氢氧化钠或氢氧化钾、二甲苯、醋酸红、封片胶、蒸馏水.所用试剂为分析纯.
7检测与饲养
7.1检测
观察叶片、果实、花或者幼茎,如发现疑似幼虫、蛹粒用刀片等工具进行剖检后,可疑虫体用指形管盛 根据斜纹卷的为害状对寄主植物进行检查.观察寄主有无虫驻孔与蚌屑或者有疑似虫道,重点装:同时,注意检查集装箱或者包装材料的缝隙处是否有可疑虫体.如发现上述幼虫或者蛹粒,用可封口塑料袋装.上述管、袋均加标签,或编号,记录时间、地点、寄主、采集人等,带回实验室,按照SN/T2959进行检测.
7.2饲养
将幼虫连同寄主植物一起放入养虫笼内盛于指形管中,用纱布扎口,防止羽化成虫逃逸,放人光照培养箱中20℃~25℃,在相对湿度70%~75%的条件下培养至成虫.
8标本的制作
8.1成虫标本
8.1.1针插标本
将羽化后成虫冷冻条死(可置于冰箱一20℃下1h左右),软化后在展翅板上展翅,制成针插标本.干成虫标本需回软后制作.
8.1.2浸泡标本
无水乙醇浸泡幼虫或成虫,并冷冻保存. 幼虫一般制作浸泡标本.将幼虫清洗干净后保存在幼虫保存液中,如果要备分子试验用,期可用
8.2展翅标本的制作
用手术剪剪下成虫的越膀,放入75%的乙醇中,用小毛笔小心刷去鳞片,再顺次放人75%、85%、95%的乙醇和无水乙醇中脱水各约10min,然后放入醋酸红溶液中染色约5min,最后置于二甲苯中透 明,再放到载玻片上整形,滴一滴封片胶,盖上盖玻片,风干.
8.3成虫外生殖器玻片标本
用昆虫针取下成虫腹部投人10%氢氧化钠或氢氧化钾溶液中煮沸5min~10min(体视显微镜下现察,以骨质部分保留深色、肌肉脂肪等落解为佳):用滴管吸移至培养血装薄层蒸馏水中侵洗:在体视器):用针尖粘取第9背板及其附属构造至载玻片上霍氏封固剂滴中体视显微镜下整姿,尽量使成虫外 显微镜下(载物台为白色背景)用细针解剖,除去背腹板等物仅剩第9背板及其附属构造(成虫外生殖生殖器构造在视野中为正面图像:封片:自然干燥或用烘箱45C,24h烘干.
9实验室鉴定
将成虫标本置于体视显微镜下,成虫外生殖器玻片标本置于生物显微镜下,观察是否符合以下鉴定特征(参见附录D和附录B).