中华人民共和国国家标准
GB/T33125-2016
Detection and identification of Cacoecimorpha pronubana (Hubner)
中国国家标准化管理委员会 中华人民共和国国家质量监督检验检疫总局 发布
前言
本标准按照GB/T1.1-2009给出的规则起草.
本标准起草单位：中华人民共和国山东出入境检验检疫局、中华人民共和国浙江出人境检验检疫局.
本标准主要起草人：魏晓棠、尼秀媚、吴志毅、朱研研、胡东青、王宇、张宁.
荷兰石竹卷蛾检疫鉴定方法
1范围
本标准规定了荷兰石竹卷Cacoecimorpha pronabana（Habner）的检疫鉴定方法.本标准适用于荷兰石竹卷蛾的检疫和鉴定.
2术语和定义
下列术语和定义适用于本文件.
2.1
鳞翅目昆虫有些种类前翅花斑比较发达有许多波状纹横的或斜的，位于翅基部的一块为基斑.注：鳞目前翅花斑中间的一条斜带为中带（median fascin）：攀外缘顶角的一块为端纹（costal patch）；墓前翅外缘的一条横带为亚外缘模带（suhterminal fascia）.
鳞翅目雄虫背兜后端向下弯曲的片状或钩状结构.
2.3
其下方中央汇合. 鳞翅目雄虫外生殖器中，由背兜后缘发生的一对附器，位于爪形突之下，并可向下向后围绕肛管，在
2.4
抱器舞valvae
注：鳞目雄虫腹侧边缘的基部区域称为抱器腹（saccuus），背侧边缘区域称为抱器背（costa）. 鳞翅目雄虫外生殖器两侧成对的由第9腹节演变而来的片状结构.
围绕鳞翘目雄虫阳茎基部的环状骨化构造，与支持阳茎有关.
2.6 囊突signum鳞翅目雌虫的交配囊壁内高度骨化的刺状或小钩状构造，一个或数个.
2.7臀棘cremaster 鳞翅目昆虫踊的尾端带钩的刺，起附着作用.
鳞翅目雌性外生殖器中围绕交配孔周围的骨化结构，其中包括前阴片和后阴片.
3荷兰石竹卷基本信息
中文名：荷兰石竹卷蛾，又名康乃馨卷叶蛾.
学名：Cacoecimorpha pronubana Hubner.
英文名：Mediterranean carnation leafroller.
异名 : Tortrix pronutxona Hiubner Cacoecimor pha ambustana Hubner Cacoecinorpha herminean Du-ponchel Cacoecimor pha insolatana LucasCacoecia promuboeno Hubner.
分类地位：属鳞翅目Lepidoptera，卷科Tortricidae，黄卷族Archipini，石竹卷蛾属Cacoecimor-pha .
荷兰石竹卷以幼虫取食寄主植物的芽、叶及花造成为害，主要以幼虫随寄主植物运输面进行远距离传插，其寄主、地理分布和生物学特性参见附录A.
石竹卷属中仅荷兰石竹卷一个种，该属与黄卷族中其他属的区分特征参见附录B.
4方法原理
根据荷兰石竹卷蛾寄主、生物学特性和形态特征进行种类鉴定.如果现场检疫发现低龄幼虫，需要时，需进一步解剖雌雄成虫外生殖器并制成玻片标本，在生物显微镜下观察. 饲养至老熟幼虫或成虫，利用体视显微镜进行观察鉴定.如果利用外部形态特征判定其种类仍有疑问
5仪器、用具和试剂
5.1仪器
体视显微镜、生物显微镜、培养箱、烘箱、水浴锅.
5.2用具
展翅板、硫酸纸、瓦楞纸片、三角纸、样品袋、小毛笔、养虫缸、酒精灯、解剖刀、手术剪、镊子、解副针、昆虫针、白瓷盘、指形管、标签纸、量筒、烧杯、玻璃棒、培养皿、载玻片、盖玻片等.
5.3试剂
无水乙醇、乙醇溶液（30%、70%）、10%氢氧化钠溶液（或10%氢氧化钾溶液）、二甲苯、中性树胶、醋酸红、蒸馏水、幼虫保存液（100mL75%乙醇溶液1mL甘油）等.所用试剂均为分析纯.
6检测与饲养
6.1检测
根据荷兰石竹卷蛾的为害状对寄主植物进行检查.注意检查植物表面是否有食痕和昆虫排泄物，是否有蚌孔与蚌屑.一般植物的受害部位在叶片、腋芽、花梗及细嫩的果实上.叶片扭曲、有丝状物包襄、幼茎有蛀食隧道、果皮本栓化、有褪色及黑色斑点等都是典型的为害状.还要注意检查附近或包装 材料的缝隙处是否有老熟幼虫与.如发现疑似蝇状物，用指形管盛装；如发现上述幼虫，摘取叶片，用可封口塑料袋装；若发现成虫，直接用三角纸包装放入样品袋.上述管、袋均加标签，或编号，记录时间、地点、寄主、采集人等，带回实验室.
6.2饲养
每天进行观察，如食料不足，可适当补充苹果屑作为食物，直至化.对于的饲养，可在养虫缸内放一 将幼虫连同寄主植物一起放人养虫缸内，置于25℃左右、相对湿度70%～75%的培养箱内饲养.薄层瓦楞纸片，将小心置于细沙或瓦楞纸上，盖上纱网盖，将养虫缸置于培养箱，在20C～30C、相对湿度为65%的条件下饲养至成虫羽化.
7标本的制作
7.1针插标本
成虫标本可制作为针插标本.将羽化后成虫冷冻杀死（可置于冰箱一20C下1h左右），软化后在展翅板上展递，制成针插标本.干成虫标本需回软化后制作.
7.2浸渍标本
幼虫一般制作浸渍标本.将幼虫清洗干净后保存在幼虫保存液中，如果要备分子试验用，则可用无水乙醇浸泡幼虫或成虫，并冷冻保存.
7.3成虫外生殖器玻片标本
10min左右至腹部透明（或在水溶锅中加热到腹部透明）；取出后放人蒸馏水中浸洗；将剩余的腹壁和 将成虫腹部取下，放人盛有10%氢氢化钠（或氢氧化钾）溶液的试管中，在沸水中加热5min～外生殖器放人醋酸红溶液中染色约2h，然后顺次放人30%、70%乙醇中各脱水10min，将腹壁和外生殖器分开，再移至无水乙醇中脱水10min：最后置于二甲苯中透明，取出外生殖器置于载玻片上中性树胶滴中，体视显微镜下整姿，尽量使雄外生殖器构造在视野中为正面图像：盖上盖玻片：风干或用烘箱45C下24h烘干，制成玻片标本.
8实验室鉴定
8.1卷科的主要形态特征
体中或小型；多为福、黄、棕、灰等色，并有条、斑纹或云斑：前翘略呈长方形，肩区发达，前缘弯曲，有的种类雄虫前缘向反面折叠：静止时，两前翅平叠在背上，合成钟状：下唇须第1节常被有厚鳞，故呈三 角形：除头部有竖立的鳞毛外身上的鳞片平贴：前越翅脉均从基部或中室直接伸出，CuA2出自中室下缘近中部处，后递ScR1与Rs分离.
幼虫体圆柱形：体色多为深浅不同的绿色，有的白色、粉红色、紫色或褐色：趾钩二序或三序，环式：前胸气门前的骨片有3根毛：肛门上方常有警栉.
8.2黄卷族的主要形态特征
头部或多或少被有粗鳞毛.胸部光滑或有直立毛额.有少数种类触角第二节有凹陷.下唇须向上或向前钟，前翅前缘呈波状，静止时福叠成吊钟状：花纹有基斑、中带和端纹，各斑有时分散成许多斑离或同出于一点，但很少共柄.雄性外生殖器有广阔的抱器瓣和发达的抱器腹，抱器瓣基部有毛垫.爪 点：R4和R5脉分离或共柄R4脉末端止于翅尖或外缘上：雄性大多有前缘裙.后翅M3和CuA1脉分形突发达，背腹扁平面稍宽，匙状，末端钝.颤形突成两臂状在中央合并成钩.尾突发达、发育不全或缺少.抱器背基突强烈儿丁质化，呈横带状，中间间断呈齿状或全部消失.阳茎针长针状，有时消失，雌
