中华人民共和国国家标准
GB/T33417-2016
过氧化氢气体灭菌生物指示物检验方法
Test method of biological indicator for hydrogen peroxide vapoursterilization processes
中国国家标准化管理委员会 中华人民共和国国家质量监督检验检疫总局 发布
前言
本标准按照GB/T1.1一2009给出的规则起草.
本标准由中华人民共和国国家卫生和计划生育委员会提出并归口.
本标准起草单位：中国疾病预防控制中心环境与健康相关产品安全所、中国人民解放军疾病预防控制所、中国医学科学院协和医院.
本标准主要起草人：张流波、张剑、姚楚水、张青、王立飞、张玮、王香、王洪敏、史绍毅、王妍彦、邱侠、马玲、朱亭亭.
过氧化氢气体灭菌生物指示物检验方法
1范围
本标准规定了过氧化氢气体灭菌生物指示物的检验方法.本标准适用于过氧化氢气体灭菌生物指示物的检验.
2规范性引用文件
下列文件对于本文件的应用是必不可少的.凡是注日期的引用文件，仅注日期的版本适用于本文件.凡是不注日期的引用文件，其最新版本（包括的修改单）适用于本文件.GB18281.1医疗保健产品灭菌生物指示物第1部分：通则GB/T24628医疗保健产品灭菌生物与化学指示物测试设备消毒技术规范（2002年版）卫生部
3术语和定义
下列术语和定义适用于本文件.
3.1生物指示物biologicalindicator：BI
对指定条件下的特定灭菌程序具有一定抗力，并装在内层包装中可供使用的染菌载体.
3.2过氧化氢气体灭菌hydrogen peroxidevapour sterilization以汽化的过氧化氢作为主要条灭微生物因子的灭菌方式.
3.3 载体carrier试验微生物的支持物.
3.4存活时间survival time:ST测定生物指示物抗力时，受试样本经杀菌因子作用后全部有菌生长的最长作用时间.
3.5 杀灭时间killing time:KT
测定生物指示物抗力时，受试样本经杀菌因子作用后，全部无菌生长的最短作用时间.
9D值Dvalue杀灭微生物数量达到90%所需要的时间.
3.7自含式生物指示物self-containedbiologicalindicator含有微生物复苏生长所需培养基的生物指示物.
GB/T 33417-2016
3.8
生物指示物抗力测试仪biological indicator evaluatorresistometer
产生限定条件下灭菌过程中物理变化规定组合，以测量抗力的专用设备.
4检验指标与方法
4.1抗力
4.1.1菌种
用于制作过氧化氢气体灭菌生物指示物的菌株为嗜热脂肪杆菌芽孢（GeoacilasearotheraophilasATCC7953或SSIK31)或被证明具有本标准所要求的同等性能的微生物.
4.1.2菌量
在一50%~300%之间.测定菌量时，应最少测试4个样本，具体检测方法参见附录A. 回收菌量大于或等于1X10CFU/片，对于成品的指示物，载体回收的菌量与说明书上的菌量误差
4.1.3D值
测试时应使用生物指示物抗力测试仪，生物指示物抗力测试仪要求见GB/T24628.在使用浓度为59%土2%过氧化氢，灭菌舱内作用浓度为2.3mg/L±0.4mg/L，作用温度50℃±0.5C的条件下，D值的要求为0.75s~8s.对于成品的生物指示物，测试的D值应在说明书上的D值士20%范围内. 应使用下列2种方法进行测试：
a）部分阴性法测试D值，参见附录B：b）验证法测试D值，将a）测试出的D值和4.1.2的回收菌量的平均数带入式（1）和式（2），计算出ST值和KT值.参见附录C.
ST≥(logN.-2)×D 值KT ≤(logN. 4) × D 值
式中：
N.一每批生物指示物的回收菌量的平均数.
4.2载体
按GB18281.1的要求进行灭菌过程兼容性的测试.
4.3恢复培养基
4.3.1恢复培养基应满足下列要求：
a）有使10CFU~100CFU的微生物恢复生长的能力：b）有使损伤的微生物恢复生长的能力，并且有中和残留的灭菌因子对微生物抑制生长的能力：c）经过过氧化氢气体灭菌后不会产生抑制微生物生长的物质.
4.3.2恢复培养基按以下方法检验：
每个样本的恢复培养基中，接种10CFU~100CFU的嗜热脂肪杆菌芽孢（ATCC7953），同时设置化）.如果恢复培养基有菌生长，并且阴性对照无菌生长和阳性对照有菌生长，判断恢复培养液合格.
4.4稳定性试验
效期限，取出再次进行评价，生物指示物应符合4.1、4.2和4.3的要求. 取包装完好的同批次生物指示物放置于制造商建议的保存条件下，存放至标签和说明书规定的有
