中华人民共和国国家标准
GB/T37068-2018
牧草抗性鉴定技术规范 耐酸性测定
Technical specification for forage stress tolerance testAcid tolerance test
中国国家标准化管理委员会 国家市场监督管理总局 发布
前言
本标准按照GB/T1.1-2009给出的规则起草.本标准由中华人民共和国农业农村部提出.本标准由全国畜牧业标准化技术委员会（SAC/TC274）归口.本标准起草单位：中国农业科学院北京畜牧兽医研究所、全国畜牧总站. 本标准主要起草人：李向林、赵小丽、全宗永、何峰、万里强、王瑜、苗丽宏.
牧草抗性鉴定技术规范耐酸性测定
1范围
本标准规定了牧草抗性鉴定中耐酸性测定的技术规范.本标准适用于不同牧草和同一牧草不同品种间的耐酸性评价.
2规范性引用文件
下列文件对于本文件的应用是必不可少的.凡是注日期的引用文件，仅注日期的版本适用于本文件.凡是不注日期的引用文件，其最新版本（包括的修改单）适用于本文件.
GB/T2930.4牧草种子检验规程发芽试验
3术语和定义
下列术语和定义适用于本文件.
3.1耐酸性acid tolerance
牧草对不同酸性条件的耐受能力.
3.2 种子萌发期seed germination stage从播种到幼苗真叶完全展开的时期.
3.3苗期shoot stage从幼苗真叶完全展开到出现分枝或分的时期.
3.4 营养生长期vegetative growth stage从苗期到禾本科草抽穗期或豆科草现蕾期前的时期.
4耐酸性测定
4.1种子萌发期
4.1.1样品准备
每份待测牧草，携选饱满健康种子1600粒.
4.1.2酸胁迫处理
设置3个酸胁迫梯度，将稀盐酸溶液分别调至pH值为4.0、4.5和5.0.加人发芽床，每个酸度处理4次重复，每个重复100粒种子，其他参数按照GB/T2930.4的方法进行发芽试验，每2天校正一次 pH 值.
4.1.3对照处理
对照处理设4个重复，每个重复100粒种子，按照GB/T2930.4的方法进行发芽试验.
4.1.4种子发芽率计算
每个酸胁迫梯度处理分别进行计算.种子发芽率按式（1）、式（2）、式（3）计算：
........ ( 1)
式中：
G.--酸胁迫培养的发芽率，%； X--酸胁迫培养4次重复萌发种子数的平均值；X--酸胁迫培养4次重复种子总数的平均值；G.--对照培养的发芽率.%；Xca-对照培养4次重复萌发种子数的平均值；XTa-对照培养4次重复种子总数的平均值；RG.一一相对发芽率，即每个处理的实测发芽率与对照发芽率的百分比，%.
4.2苗期
4.2.1育苗
取饱满健康的种子，每个处理4个重复，每个重复100粒，按照GB/T2930.4的方法发芽后，用海绵条将幼苗固定在带有小孔的塑料板中，置于含有Hoagland营养液的方形培养盆中，pH调至7.O，每盆留苗30株，置于人工气候箱中培养，光照强度为25001x，光照周期为16h/8h（光照/黑暗），温度设置为25℃/20℃（光照/黑暗），培养盆内安置加氧泵，长出叶片后开始通气，每天保持24h通气，每2天校 正一次pH值.
4.2.2酸胁迫处理
胁迫处理的pH值分别稳定在4.0、4.5和5.0.每个处理4个重复.酸胁迫处理20d后，将幼苗移到 幼苗长至三叶时，进行苗期酸胁迫处理.用1mol/LHCI和NaOH调节培养液的酸碱度，使三个pH为7.0的正常培养液中培养4d，调查存活苗数，以叶片转呈鲜绿色者为存活.
4.2.3酸胁迫存活率计算
每个酸胁迫梯度处理分别进行计算，酸胁迫存活率按式（4）计算：
式中：
x-酸胁迫后4次重复存活苗数的平均值； S.酸胁迫存活率，%；X--酸胁迫前4次重复总苗数的平均值.
4.3营养生长期
4.3.1育苗
每盆留苗20株，育苗方法同4.2.1.
4.3.2酸胁迫处理
植株分或分枝达到3个时，进行酸胁迫处理.用1mol/LHCl和NaOH调节培养液的酸碱度，使其pH值分别稳定在4.0、4.5和5.0.酸胁迫20d后，将幼苗移到pH为7.0的正常培养液中培养4d，调查存活苗数，以叶片转呈鲜绿色者为存活.
4.3.3酸胁迫存活率计算
同4.2.3.
5耐酸性评价
moderatelyresistant）和弱（S，susceptible).种子萌发期、苗期、营养生长期的耐酸性等级分别见表1、表2和表3.按照pH值由高到低的次序进行评价，以相对发芽率或存活率数值达到要求所对应的最高 pH为准，进行耐酸性等级划分.
表1牧草萌发期耐酸性评价
pH 相对发芽率RG./% 耐酸性等级5 0 05> (S)4 5 4.0 50 50 极强（HR）
表2牧草苗期耐酸性评价
pH 存活率S /% 耐酸性等级5 0 50 （S）4 5 .0 <50 <50 中等（MR) 强(R)4.0 ≥50 极强（HR） 表3牧草营养生长期耐酸性评价 pH 存活率8./% 耐酸性等级5.0 <50 (S)4 5 <50 中等（MR）4 0 50 强(R)4 0 极强（HR)
