NY
中华人民共和国农业行业标准
NY/T5422-2026
奶牛A2型β-酪蛋白基因测定 PCR方法
Determination of A2 type of β-casein gene in dairy cattle-PCRmethod
中华人民共和国农业农村部 发布
前言
本文件按照GB/T1.1一2020《标准化工作导则第1部分：标准化文件的结构和起草规则》的规定起草.
请注意本文件的某些内容可能涉及专利.本文件的发布机构不承担识别专利的责任.
本文件由农业农村部畜牧兽医局提出.
本文件由全国畜牧业标准化技术委员会（SAC/TC274）归口.
本文件起草单位：山东省农业科学院畜牧兽医研究所、山东奥克斯畜牧种业有限公司、山东省畜产品质量安全中心、内蒙古伊利实业集团股份有限公司、山东视界牧业有限公司、泰安市金兰乳业有限公司.
本文件主要起草人：黄金明、王秀革、高运东、李俊玲、韩吉雨、志花、魏晓超、高亚平、杨春红、王金鹏、冯鑫磊、刘婕、高立国、法文静、王亮.
奶牛A2型β-酪蛋白基因测定PCR方法
1范围
本文件描述了奶牛A2型β-酪蛋白基因检测的PCR方法.本文件适用于奶牛A2型β陷蛋白基因的检测与基因型判别.
2规范性引用文件
下列文件中的内容通过文中的规范性引用面构成本文件必不可少的条款.其中，注日期的引用文件，仅该日期对应的版本适用于本文件；不注日期的引用文件，其最新版本（包括的修改单）适用于本文件.
GB/T6682分析实验室用水规格和试验方法GB/T19495.2转基因产品检测实验室技术要求GB/T27642牛个体及亲子鉴定微卫星DNA法
3术语和定义
下列术语和定义适用于本文件.
3.1
β-酪蛋白基因β-casein gene CSN2 gene
位于牛第6号染色体g.-g.、全长8522bp、包含9个外显子、编码区长675 bp、编码224个氨基酸的核苷酸序列.
注：参考基因组版本为 ARS-UCD2.0基因编号为 GenBank 281099-转录本序列为 XM_010806178. 3.3. 2
A2型β-酪蛋白A2β-casein A2 CSN2
8个 SNPs 位点基因型分别为c245（CC)、c259（CC)、c.307（CC)、c 322（AA)、c 363（CC)、c. 411(CC)、c458（CC）和c.500（CC）的 CSN2基因编码的蛋白.
注:8 ↑ SNPs 位点分别为 c. 245 C>A、c 259 C>G、c 307 C>Ac 322 A>C、c. 363 C>A、c. 411 C>G、c. 458 C>T和l c 500 C>T.
A2奶牛A2 dairy cattle
拥有A2型β-酪蛋白基因的奶牛.
4原理
利用特异性PCR引物，扩增涵盖8个SNPs位点的β-酪蛋白基因片段，对PCR产物测序，分析8个SNPs位点的基因型，确定奶牛β-酪蛋白基因的基因型，签定出A2奶牛.
5试剂或材料
5.1水；GB/T6682.一级.5.210×PCR缓冲液（含Mg²）.5.3dNTP溶液（浓度为10mmol/L的 dATP、dCTP.dGTP和 dTTP 4 种脱氧核糖核苷酸溶液等体积混合的溶液）.
除非另有说明，仅使用分析纯试剂，试剂溶液均用无DNA酶和RNA酶污染的容器分装，
