NY
中华人民共和国农业行业标准
NY/T5403.2-2026
病毒微生物农药斜纹夜蛾核型 多角体病毒第2部分：斜纹夜蛾核型 多角体病毒悬浮剂
Virus-based insecticides-Spodoptera litura nucleopolyhedrovirus (SpltNPV)Part 2:Spodoptera litura nucleopolyhedrovirus suspension concentrate (SC)
中华人民共和国农业农村部 发布
前言
本文件按照GB/T1.1-2020《标准化工作导则第1部分：标准化文件的结构和起草规则》的规定起草.
发布了以下部分： 本文件是NY/T5403《病毒微生物农药斜纹夜蛾核型多角体病毒》的第2部分.NY/T5403已经
第1部分：斜纹夜蛾核型多角体病毒母药：第2部分：斜纹夜蛾核型多角体病毒悬浮剂；第3部分：斜纹夜蛾核型多角体病毒可湿性粉剂；第4部分：斜纹夜蛾核型多角体病毒水分散粒剂.
请注意本文件的某些内容可能涉及专利.本文件的发布机构不承担识别专利的责任.
本文件由农业农村部种植业管理司提出.
本文件主要起草人：郭明程、类承风、孙修炼、王晓军、胡薇、田义超、陈立薛、聂东兴. 本文件起草单位：农业农村部农药检定所、湖北天勤生物科技有限公司、中国科学院武汉病毒研究所.
病毒微生物农药斜纹夜蛾核型多角体病毒 第2部分：斜纹夜蛾核型多角体病毒悬浮剂
1范围
装、储运和质量保证期. 本文件规定了斜纹夜蛾核型多角体病毒悬浮剂的要求，试验方法，产品的检验与验收，标志、标签、包
本文件适用于以病毒包涵体为主要成分的斜纹夜蛾核型多角体病毒母药添加适宜助剂加工面成的斜纹夜蛾核型多角体病毒悬浮剂.
2规范性引用文件
下列文件中的内容通过文中的规范性引用而构成本文件必不可少的条款.其中，注日期的引用文件，仅该日期对应的版本适用于本文件：不注日期的引用文件，其最新版本（包括的修改单）适用于本文件.
GB/T1601农药pH值的测定方法GB/T1604商品农药验收规则GB/T1605商品农药采样方法 GB3796农药包装通则GB/T4789.2食品卫生微生物学检验菌落总数测定GB/T6682分析实验室用水规格和试验方法GB/T8170数值修约规则与极限数值的表示和判定GB/T14825农药悬浮率测定方法 GB/T16150农药筛析试验方法GB/T19137农药低温稳定性测定方法GB/T20813农药产品标签通则GB/T28137农药持久起泡性测定方法GB/T31737农药倾倒性测定方法
3术语和定义
下列术语和定义适用于本文件.
3.1
斜纹夜蜡核型多角体病毒悬浮剂Spodoptera litura nucleopolyhedrovirus（SpltNPV） suspension con-centrate (SC)
以斜纹夜核型多角体病毒母药与适宜的载体及分散剂混合均匀的液体制剂.
3.2
病毒包涵体occlusionbody（OB）
病毒水平传播的主要载体形式，其结构特征是病毒粒子包埋于蛋白质基质的多角体中.
3.3
生测效价比potency ratio
根据药物的药理和对生物体的作用设计试验，比较样品、标准品引起的生物反应，测定药物效价或其生物学活性.
3. 4
菌落形成单位colony forming units（CFU）
由单个菌体或聚集成团的多个菌体在固体培养基上生长繁殖所形成的集落.指在琼脂平板上在一定温度下，经过一定时间培养后形成的每一个菌落，是计算细菌或霉菌数目的单位.
3.5
杂菌菌落总数number ofmicrobial contaminants
将斜纹夜蛾核型多角体病毒母药样品稀释后涂布在琼脂营养培养基上，在一定温度下，经过一定时间培养所得到的微生物（真菌和细菌）菌落数之和.
4要求
4.1外现
应是可流动、易测量体积的悬浮液体：存放过程中可能出现沉淀，经搅动能恢复为均匀的悬液，不应有结块.
4.2规范项目及指标
斜纹夜蛾核型多角体病毒悬浮剂还应符合表1的要求.
表1斜纹夜核型多角体病毒悬浮剂控制项目指标
项目 指标病毒包函体含量.OB/ml 生测效价比（标准品LC/待测样品LC）.% 标示值 80 0杂菌菌落总数.CFU/mL ≤1. 0×10pH 花围 悬浮率，% 5. 0~7. 5 80.0细度（通过75mm试验箱）.% >95. 0例性 倾后残余物.% 洗涤后残余物.% ≤5.0 ≤0.5持久起泡量（1min后），ml. ≤30.0低温稳定性 低湿稳定性试验每3个月至少检验1次. 合格
5试验方法
5.1一般规定
除非另有说明，本文件所用试剂均为分析纯，所述溶液均为水溶液，试验用水为GB/T6682中规定的三级水.
5.2抽样
按GB/T1605中"液体制剂采样"方法进行.用随机数表法确定抽样的包装件，最终抽样量一般不少于600 ml.
5.3PCR扩增及DNA测序法对病毒毒种的鉴定
提取试样中病毒DNA作为模板，用杆状病毒poh基因、lef-8基因及lef-9基因的简并性引物（连接m13通用引物序列）进行PCR扩增反应，琼脂糖凝胶电泳检测后，用m13通用引物对PCR产物进行测序，将测序结果与斜纹夜核型多角体病毒G2株的polh基因、lef-8基因及lef-9基因的核苷酸序列进行比对分析，这3个基因的核昔酸一致性均大于98%，即认定试样中的病毒为斜纹夜蛾核型多角体病毒.
斜纹夜蛾核型多角体病毒有效成分描述见附录A.
斜纹夜蛾核型多角体病毒毒种的鉴定按照附录B的规定执行.
5.4病毒包涵体含量的测定
5.4.1方法提要
斜纹夜螺核型多角体病毒包涵体含量的测定采用血球计数板计数法.称取少量病毒试样，用定量的水稀释成水悬浮液，并稀释至适当倍数后，滴加在血球计数板上在光学显微镜下计数根据血球计数板2
