SN 中华人民共和国出入境检验检疫行业标准 SN/T2975—2011 鱼华支睾吸虫囊蚴鉴定方法 Identification for metacercaria of Clonorchis sinensis in fish 2011-09-09发布 2012-04-01实施 中，华人民共和国发布 国家质量监督检验检疫总局 SN/T2975-2011 前言 本标准按照GB/T1.1一2009给出的规则起草. 本标准由国家认证认可监督管理委员会提出并归口. 本标准起草单位：中华人民共和国厦门出入境检验检疫局检验检疫技术中心、中国疾病预防控制中 心寄生虫病预防控制所、中华人民共和国上海出人境检验检疫局、中华人民共和国江苏出入境检验检 疫局. 本标准主要起草人：陈信忠、郭书林、陈韶红、龚艳清、李树清、杨俊萍、陈飞、陈家旭、张仪、徐淑菲、 孔繁德、胡薇、黄燕. I SN/T2975-2011 鱼华支睾吸虫囊蚴鉴定方法 1范围 本标准规定了鱼体内华支睾吸虫囊蚴的压片检查法、蛋白酶消化法以及PCR鉴定方法. 本标准适用于鱼类华支睾吸虫囊蚴的病原鉴定及其流行病学调查和监测. 2规范性引用文件 下列文件对于本文件的应用是必不可少的.凡是注日期的引用文件，仅注日期的版本适用于本文 件.凡是不注日期的引用文件，其最新版本（包括的修改单）适用于本文件. GB/T6682分析实验室用水规格和试验方法 SN/T1193基因检验实验室技术要求 3术语和定义 下列术语和定义适用于本文件 3.1 囊呦metacercaria 复殖吸虫幼虫发育中的一个阶段.华支睾吸虫尾蚴进人第二中间宿主后或附着水生植物上，脱掉 尾部，躯干部变圆，头腺分泌囊壁而成为具有感染能力的囊蚴. 3.2 中间宿主intermediate host 寄生虫在幼虫或无性生殖时期所寄生的宿主.华支睾吸虫的幼虫需要经过两个中间宿主，第一中 间宿主包括多种淡水螺，第二中间宿主包括多种淡水鱼类和虾类. 3.3 终末宿主definitive host 寄生虫成虫或有性生殖阶段所寄生的宿主.华支睾吸虫的终末宿主主要包括人、犬、猫、猪等哺乳 动物. 4试剂和材料 4.1化学试剂均为分析纯.实验用水应符合GB/T6682中一级水的规格，用于DNA提取及 PCR实验的水需用灭菌双蒸水.PCR实验应在符合SN/T1193要求的实验室进行.Taq酶、dNTPs (含dATP、dUTP、dCTP、dGTP)等核酸提取及PCR所需试剂可选用商品化试剂和试剂盒. 4.2阳性对照为华支睾吸虫囊呦或成虫. 4.3PCR正向引物CS1:5’-CGAGGGTCGGCTTATAAAC-3' 反向引物CS2:5’-GGAAAGTTAAGCACCGACC-3’ 4.4胃蛋白酶消化液（见A.1). 4.5盐酸卡红染液（见A.2). 1 ...
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