KJ 食品快速检测方法 KJ202303 动物源性食品中四环素类药物的 快速检测胶体金免疫层析法 2023-06-13发布 国家市场监督管理总局 发布 KJ202303 动物源性食品中四环素类药物的 快速检测胶体金免疫层析法 1范围 本方法规定了动物源性食品中四环素类药物的胶体金免疫层析快速检测方法. 本方法适用于生乳、灭菌乳、巴氏杀菌乳、乳粉、猪肉、牛肉、鸡肉、鱼肉中四环素、金霉素、土霉素、多 西环素的快速定性测定. 2原理 本方法采用竞争免疫层析原理.样品中四环素类药物经提取后，与胶体金标记的特异性抗体结合， 抑制抗体与试纸条中检测线(T线)上抗原的结合，从而导致试纸条上检测线颜色深浅的变化.通过检 测线与控制线(C线)颜色深浅比较，对样品中四环素类药物残留量进行定性判定. 3试剂与材料 3.1试剂 除另有规定外，本方法所用试剂均为分析纯，实验用水为GB/T6682规定的二级水. 3.1.1乙腈(CHCN). 3.1.2磷酸氢二钠(Na2HPO4优级纯) 3.1.3一水合柠檬酸(CHO H2O). 3.1.4氢氧化钠(NaOH). 3.1.5盐酸(HC1 37%). 3.1.6乙二胺四乙酸二钠(Na2EDTA2H2O). 3.1.7十二水合磷酸氢二钠(Naz HPO412H2O). 3.1.8二水合磷酸二氢钠(NaH2PO42H2O). 3.1.9氯化钠(NaCl). 3.2试剂配制 3.2.1乙腈溶液：分别量取180mL乙腈(3.1.1)和20mL水，混合均匀. 3.2.2磷酸氢二钠溶液(0.2mol/L):称取28.41g磷酸氢二钠(3.1.2)于500mL烧杯中，加人200mL 水，充分搅拌至溶解，加水定容至11. 3.2.3柠檬酸溶液(0.1mol/L):称取21.01g一水合柠檬酸(3.1.3)于500mL烧杯中，加入200mL 水，充分搅拌至溶解，加水定容至1L. 3.2.4氢氧化钠溶液(1mol/1):称取4.00g氢氧化钠(3.1.4)于50mL烧杯中，加入20mL水，充分搅 拌至溶解，待冷却至室温，加水定容至100mL. 3.2.5样品提取液：分别量取625mL磷酸氢二钠溶液(0.2mol/L)(3.2.2)和1000mL柠檬酸溶液 (0.1mol/L)(3.2.3)混合均匀，加人适量盐酸(3.1.5)或氢氧化钠溶液(1mol/L)(3.2.4)将pH调节至 1 KJ202303 4.0 再加入60.50g乙二胺四乙酸二钠(3.1.6)充分搅拌至溶解.或使用胶体金免疫层析检测试剂盒配 套提取液. 3.2.6乳品样本稀释液：分别称取5.80g十二水合磷酸氢二钠(3.1.7)，0.60g二水合磷酸二氢钠 (3.1.8) 8.77g氯化钠(3.1.9)于500mL烧杯中，加入200mL水，充分搅拌至溶解，加入适量盐酸 (3.1.5)或氢氧化钠溶液(1mol/L)(3.2.4)将H调节至7.4，加水定容至1L.或使用胶体金免疫层析 检测试剂盒配套稀释液. 3.2.7组织样本稀释液：分别称取29.01g十二水合磷酸氢二钠(3.1.7)，2.96g二水合磷酸二氢钠 (3.1.8) 5.84g氯化钠(3.1.9)于500mL烧杯中，加入200mL水，充分搅拌至溶解，加人适量氢氧化钠 溶液(1mol/L)(3.2.4)将pH调节至8.0，加水定容至1L.或使用胶体金免疫层析检测试剂盒配套稀 释液. 3.3标准物质 四环素类药物标准物质的中文名称、英文名称、CAS号、分子式、相对分子质量见表1，纯度≥95%. 注：或等同可溯源物质....
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