中华人民共和国国家标准
农业农村部公告第1012号一17-2026
Detection of geneticallymodified plants and derived productsRapid PCR methods on site
中华人民共和国农业农村部发布
前言
本文件按照GB/T1.1-2020《标准化工作导则第1部分：标准化文件的结构和起草规则》的规定起草.
请注意本文件的某些内容可能涉及专利.本文件的发布机构不承担识别专利的责任.
本文件由中华人民共和国农业农村部提出.
本文件由全国农业转基因生物安全管理标准化技术委员会归口.
本文件起草单位：中国农业科学院油料作物研究所、农业农村部科技发展中心、中国检验检疫科学研究院.
本文件主要起草人：高鸿飞、付伟、王梦雨、吴刚、陈子言、霍杉杉、武玉花、张华、蒋红叶、王智、李俊、王顯潜、陈红.
转基因植物及其产品成分检测 现场快速PCR方法
1范围
本文件规定了转基因植物及其产品中转基因成分筛查和转化体鉴定现场快速PCR方法.
本文件适用于大豆、玉米等作物的叶片、籽粒等组织中转基因成分筛查及转化体特异性快速PCR检测.
2规范性引用文件
下列文件中的内容通过文中的规范性引用面构成本文件必不可少的条款，其中，注日期的引用文件，仅该日期对应的版本适用于本文件；不注日期的引用文件，其最新版本（包括的修改单）适用于本 文件，
农业部2630号公告-1-2017农业转基因生物安全管理术语
NY/T672转基因植物及其产品检测通用要求
3术语和定义
NY/T672、农业部2630号公告-1-2017界定的以及下列术语和定义适用于本文件.
3. 1
快速PCR方法rapid PCRmethod
利用高效DNA聚合酶及快速传热的PCR循环仪，在40min内完成从制样到结果鉴定的一类快速分析方法.
3. 2
现场检测on-site detection
在采样现场进行的、利用便携式仪器及配套试剂快速得到检测结果的一种检测方式.
4原理
在取样现场，利用经验证的试剂或装备快速提取样品基因组DNA，并利用便携式快速PCR仪进行快速扩增.通过对PCR扩增产物进行实时荧光监测、核酸试纸检测等快速分析，现场判定样品中是否含有转基因成分.
5试剂和材料
5.1快速提取缓冲液
快速提取缓冲液为pH 8.0的碱性缓冲液，主要含有10 mmol/L~50 mmol/L Tris-HC]和 1mmol/L~100）和还原剂（如0.5%~2%β-疏基乙醇或1 mmol/L~10 mmol/L DTT).具体组分及浓度应通过验证实 20mmol/L NaEDTA;可根据样品类型添加适量的表面活性剂（如 0.5%~2%SDS或 1%~5%TritonX-验确定.
5.2PCR反应预混液
将高效DNA聚合酶、PCR缓冲溶液、氯化镁和dNTPs（含dATP、dCTP、dGTP、dTTP)配制成溶液或冻干粉预混液组分见表1，可根据实际需求调整.
