HG
中华人民共和国化工行业标准
HG/T 2535-2007代替HG/T2535-93
Photographic chemicalsThe method for the determination of sensitization dyesReversed phase high performance liquid chromatography
中华人民共和国国家发展和改革委员会发布
前言
本标准是在1993年行业标准HG/T2535-93《照相化学品增感染料含量的测定反相高效液相色谱法》的基础上修订的，本标准自发布之日起代替HG/T2535一93，
本修订版标准在内容上与前一版本相比，主要包括以下变化：
对色谱分离条件进行了优化：
试验样品由BD-01、BD-04、BD-06、BD-10代替样品SG-03、SB-16、SB-02、SR-03.
本标准由中国石油和化学工业协会提出.
本标准由全国感光材料标准化技术委员会归口.
本标准起草单位：沈阳感光化工研究院.
照相化学品增感染料含量的测定反相高效液相色谱法
1范围
本标准规定了反相高效液相色谱法测定增感染料含量的方法.本标准适用于醇溶性的、有紫外可见吸收的增感染料.
2提要
可见波长检测器检测，用面积归一法或外标法计算增感染料的含量. 称取样品、溶解，用微量注射器或定量进样阀将样品溶液注人色谱柱进行分离，用指定波长的紫外
3试剂与标准品
3.1甲醇：色谱纯. 3.2乙酸铵：分析纯.3.3水：新鲜二次蒸馏水，再经0.45μm滤膜过滤.3.4标准品：增感染料的标准品的主体含量不得低于99.0%，用于外标法定量分析的标准品需由感光材料与照相化学品检测中心认定.
4仪器与设备
4.1高效液相色谱（配有紫外可见光检测器）.4.2分析天平：感量为0.1mg.4.3过滤装置（配有0.45μm有机及水相滤膜），
5推荐色谱操作条件
色谱操作条件主要由色谱柱、流动相、检测波长、检测灵敏度、流速、柱温等因素组成.所选择的色谱条件应该使增感染料样品中组分完全分离，需梯度洗脱，主成分的色谱保留时间为5min~20min，总的洗脱时间一般不超过30min.在满足上述要求的基础上，尽量选用通用性强的色谱柱和试剂组成相对简单并易得易处理的流动相，尽可能地简化操作.常用增感染料的色谱操作条件如下.
流动相：溶剂A：0.01mol/L乙酸铵水溶液.溶剂B：甲醇.梯度洗脱：流速：1mL/min.柱温：30℃
色谱柱：ZorbaxEclipseXDB-C185μm 4.6mm×150mm（或相当型号色谱柱）.
检测波长：254nm（或根据需要确定）.
增感染料BD-04洗脱程序
增感染料BD-01洗脱程序
时间 AX B% 流量（mL/min）0.0 60 30 40 70 111.0 8.5 30 70 1 114.0 19.0 10 10 90 90 1 120.0 60 40 1
时间 A% B% 流量（mL/min）0.0 55 45 111.5 9.5 30 30 70 70 1 115.0 10 90 119.0 20.0 10 55 90 45 1 1
增感染料BD-10洗脱程序
增感染料BD-06洗脱程序
时间 A% B% 流量（mL/min）0.0 55 45 110.0 9.5 30 30 70 70 1 115.0 10 90 116.0 17.0 55 10 90 45 11
时间 A% B% 流量（mL/min）0.0 60 40 19.5 30 30 70 70 111.5 15.0 10 90 1 119.0 10 90 120.0 60 40 1
对不同的液相色谱仪和不同生产厂的色谱柱，上述参数可作适当调整，以获取适宜的色谱分离度.常用增感染料的分离色谱图见图1~图4.
图1选用500nm检测波长分离BD-01样品的色谱图
图2选用254nm检测波长分离BD-04样品的色谱图
图3选用254mm检测波长分离BD-06样品的色谱图
图4选用254mm检测波长分离BD-10样品的色谱图
6测试步骤
一般采用面积归一法，当含量测定值低于90%，或对其测定结果有疑义时，则用外标法进行仲裁分析.
本实验规定的样品（包括标准品）的称样量由样品溶液的进样量、色谱柱负荷、杂质峰检测限、检测器灵敏度等共同确定.
6.1面积归一法
6.1.1样品溶液的配制
称取一定量样品，精确至0.1mg，用甲醇溶解并定容至10mL，用0.45um有机滤膜过滤后并用黑纸包上待测.常用增感染料样品称样量见表1.
表1常用增感染料样品称样量
样品名称 BD-01 BD-04 BD-06 BD-10称样量/mg 5 5 5 5
6.1.2测定
进行色谱分离，得色谱图.常用增感染料样品溶液的进样量见表2. 根据被测样品所要求的色谱条件调试高效液相色谱仪，并使其稳定.注人规定量的被测样品溶液
表2常用增感染料样品溶液进样量
BD-06 BD-10进样量/pL 样品名称 BD-01 10 BD-04 10 10 10
