中华人民共和国国家标准
GB/T 35540-2017
Restriction thrombin
中国国家标准化管理委员会 中华人民共和国国家质量监督检验检疫总局 发布
目 次
前言1范围2规范性引用文件3术语和定义4技术要求5检验方法6包装、运输及贮存 7保质期附录A（规范性附录）限制性凝血酶酶活检测附录B（规范性附录）限制性凝血酶纯度检测
前言
本标准按照GB/T1.1-2009给出的规则起草
本标准由全国工具酶标准化工作组（SAC/SWG11）归口.
本标准起草单位：福建华灿制药有限公司、华灿南生（厦门）生物技术有限公司、福建南生科技有限公司、山东大学、安琪酵母股份有限公司、三明市产品质量检验所、福建农林大学、复且大学、苏州大学、 上海百赛生物科技有限公司、海狸纳米科技（苏州）有限公司、上海博仕生物科技有限公司.
本标准主要起草人：黄发灿、郑登忠、詹学雄、郭晓城、陈秀兰、赵品、章丽丽、庄丽琼、黄发喜、林乐钞、陈劲春、姚娟、刘斌、张熙颖、钟江、朱力、任辉、邢志刚.
引言
限制性凝血酶是一种专一性很强的丝氨酸蛋白水解酶，能识别LeuValProArgGlySer氨基酸序列，是基因工程中重组融合蛋白的酶切工具.制定限制性凝血酶国家标准，用以推动该类工具酶的产业化，对于限制性凝血酶的生产和使用具有重要意义.
限制性凝血酶
1范围
本标准规定了限制性凝血酶的技术要求、检验方法、包装、运输、贮存和保质期. 本标准适用于从猪血液中提取的限制性凝血酶.
2规范性引用文件
件.凡是不注日期的引用文件，其最新版本（包括的修改单）适用于本文件. 下列文件对于本文件的应用是必不可少的.凡是注日期的引用文件，仅注日期的版本适用于本文
GB/T191包装储运图示标志
3术语和定义
下列术语和定义适用于本文件.
3.1
限制性凝血酶restriction thrombin
凝血酶酶切位点的重组融合蛋白. 一种专一性很强的丝氨酸蛋白水解酶，能识别LeuValProArgGlySer氨基酸序列，用于酶切具有
3.2
限制性凝血酶活力单位activityunitofrestriction thrombin
的缓冲液里，16h内酶切水解1μmol融合蛋白所需的限制性凝血酶量为一个活力单位（Facanunit）. 20 C pH 8.4 条件下 ，在 50 μL 含有 20 mmol/L Tris-HC10.15 mol/1L NaCl 2.5 m mol/L CaCl
4技术要求
4.1外观
白色或类白色的冻干块状物或粉末.
4.2酶活
350 Facan unit/mg.
4.3纯度
20μg限制性凝血酶经SDS-PAGE电泳结果显示为单条带.
5检验方法
5.1外观
直接或将样品倒人无色透明试管中，在自然光条件下，肉眼观察.
