SC
中华人民共和国水产行业标准
SC/T3066-2025
Determination of fucoxanthin in seaweed and its products-High performance liquid chromatography
2025-12-09发布
前言
本文件按照GB/T1.1-2020《标准化工作导则第1部分：标准化文件的结构和起草规则》的规定起草.
请注意本文件的某些内容可能涉及专利.本文件的发布机构不承担识别专利的责任.
本文件由农业农村部渔业渔政管理局提出.
本文件由全国水产标准化技术委员会水产品加工分技术委员会（SAC/TC156/SC3）归口.
本文件起草单位：中国水产科学研究院黄海水产研究所、山东省海洋资源与环境研究院、山东洁品集团股份有限公司、山东海之宝海洋科技有限公司、青岛聚大洋藻业集团有限公司、中国海洋大学、中国水产 科学研究院南海水产研究所.
本文件主要起草人：徐英江、朱文嘉、韩典峰、孙伟红、孙琰晴、赵丽、刘小静、曹体宏、丁玉竹、李振兴、刘晓勇、吴仕鹏、秦绪娟、张波、程跃谟、崔庆奎、赵永强、周全利、龙晓珊、姜芳、李佳蔚.
海藻及其制品中岩藻黄素含量的测定 高效液相色谱法
1范围
本文件描述了用高效液相色谱法测定海藻及其制品中岩藻黄素含量的原理，试剂和材料，仪器设备，样品的制备与保存测定步骤，数据处理，方法灵敏度、准确度和精密度.
本文件适用于鲜海藻、盐渍海藻、即食海藻、干海藻及岩藻黄素粉中岩藻黄素含量的测定.
2规范性引用文件
下列文件中的内容通过文中的规范性引用面构成本文件必不可少的条款.其中，注日期的引用文件，仅该日期对应的版本适用于本文件：不注日期的引用文件，其最新版本（包括的修改单）适用于本文件.
GB/T6682分析实验室用水规格和试验方法
3术语和定义
本文件没有需要界定的术语和定义.
4原理
试样中岩藻黄素经乙醇溶液提取，采用高效液相色诺-紫外检测器测定，外标法定量.
5试剂和材料
除另有说明，试剂均为分析纯，试验用水应符合GB/T6682一级水的规定.
5.1试剂
5.1.1乙醇（CH;CH;OH).5.1.2乙晴（CHCN）：色谱纯.5.1.3丙酮（CHCOCH）；色谱纯.
5.2标准品
岩藻黄素标准品（CHO，CAS号：3351-86-8）：纯度≥98%.
5.3溶液配制
5.3.278%乙晴溶液：乙晴（5.1.2）：水=78：22（体积比），混匀.
5.4标准溶液配制
5.4.1岩藻黄素标准储备溶液（1000μg/mL）：称取10mg（精确至0.01mg）岩藻黄素标准品（5.2），用5.4.2岩藻黄素标准中间溶液（100μg/mL）：准确移取岩藻黄素标准储备溶液（5.4.1)1.00mL，于 丙酮（5.1.3）溶解并用棕色容量瓶定容至10mL，避强光操作.一18℃以下密封避光保存，有效期2个月.10ml棕色容量瓶中，用78%乙晴溶液（5.3.2）稀释并定容，4℃保存有效期5d.5.4.3岩藻黄素标准工作液：准确移取适量标准中间溶液（5.4.2）.用78%乙溶液（5.3.2）配制成浓度依次为 0. 05 μg/mL、0. 10 μg/mL0 50 yg/mL、1. 00 μg/mL、5. 00 μg/mL 和 10 0 μg/mL 的系列标准溶液，现用现配.
5.5材料
SC/T 3066-2025
聚偏二氟乙烯微孔滤膜：0.45umm.
6仪器设备
6.1高效液相色谱仪：配紫外检测器.6.2分析天平：感量0.00001g.6.3电子天平：感量0.001g.6.4匀浆机.6.5高速组织粉碎机；转速不低于25000r/min.6.6超产波发生器：60kHz.6.8离心机：转速不低于4000r/min. 6.7旋涡混合器.
7样品的制备与保存
7.1湿基试样
取适量湿基试样（鲜海藻、盐渎海藻、即食鲜海藻），去除沙石、盐粒等杂质，剪或切成小块用匀浆机均质.制样过程中避强光.
7.2干基试样
取适量干基试样（干海藻、即食干海藻），剪或切成小块，放人高速组织粉碎机，应多次粉碎，至试样全部通过830pm（20目）筛：取适量岩藻黄素粉，过830m（20目）筛.制样过程中避强光.
7.3试样的保存
试样置于一18℃以下密封避光保存，保存期不超过2个月，
8测定步骤
8.1提取
8.1.1湿基试样
8.1.1.1称取湿基试样2.0g（精确至0.001g）于50mL离心试管中，加人20mL70%乙醇溶液（5.3.1），涡旋振荡混匀.
8.1.1.2取上述涡旋混匀后溶液，超声提取30min.4000r/min离心10min，将上层清液转移至50ml容量瓶中，残渣中加人20mL70%乙醇溶液（5.3.1)，超声30min，4000r/min离心10min，合并2次离心的上清液，用70%乙醇溶液（5.3.1）定容至50mL.取1mL定容液过0.45μm微孔滤膜（5.5），待测.分析过程避强光.
8.1.2干基试样
振荡混匀，于避光处静置16h，按8.1.1.2中的操作进行， 称取干基试样0.5g（精确至0.001g）于50mL离心试管中，加人20ml70%乙醇溶液（5.3.1），涡旋
8.2测定
8.2.1高效液相色谱参考条件
高效液相色谱仪的色谱参考条件如下：
a）色谱柱：C色谱柱（250mm×4.6mm，5gm）或性能相当者；b）流速：1.0mL/min； c）进样量：20pL；d）柱温：30C;e）检测波长；450nm；f）流动相：A为乙睛，B为水，A：B=78：22（体积比），等度洗脱.
