团体标准
分枝杆菌液体培养操作规范
Technical practice for liquid culture ofMycobacterium
中国防痨协会发布
目 次
前言..31.范围2.规范性引用文件.3.术语和定义4.检验目的 .55.对象与样本6.样本管理和准备67.操作程序8.质量控制 119.生物安全 12附录A（资料性）分枝杆菌液体培养操作流程图 .13附录B（资料性）分枝杆菌液体培养结果报告流程图 14附录C（资料性）分枝杆菌液体培养试验试剂配置15附录D（资料性）用于质控的分枝杆菌标准株 16附录E（资料性）引起实验质控指标异常的原因分析及改进措施 .17附录F（资料性）结核分枝杆菌抗原快速检测程序 18参考文献 20
前言
本文件按照GB-T1.1-2020《标准化工作导则第1部分：标准化文件的结构和起草规则》的规定起草.
请注意本文件的内容可能涉及专利.本文件的发布机构不承担识别专利的责任.
本文件由中国疾病预防控制中心、山东省公共卫生临床中心、浙江省疾病预防控制中心共同提出.
本标准由中国防痨协会归口.
本标准起草单位：中国疾病预防控制中心、山东省公共卫生临床中心、浙江省疾病预防控制中心、首都医科大学附属北京胸科医院、河南省疾病预防控制中心、湖南省胸科医院、上海市疾病预防控制中心、广州市胸科医院、珠海贝索生物技术有限公司.
本标准主要起草人：赵冰、邓云峰、柳正卫、姜广路、苏丹、李辉、谭云洪、江渊、苏碧仪、赵雁林、夏辉、宋媛媛、欧喜超、于春宝、王俊玲、潘军航、王晓萌、范达股、刘义江.
分枝杆菌液体培养操作规范
1.范围
本文件规定了对痰液、支气管肺泡灌洗液等临床样本进行分枝杆菌液体培养检测的技术要求和操作规范.
本文件适用于我国各级疾病预防控制机构、医疗机构、科研机构、第三方检验机构、卫生检疫机构及其他相关机构开展分枝杆菌液体培养检测.
2.规范性引用文件
下列文件中的内容通过文中的规范性引用面构成本文件必不可少的条款.其中，注日期的引用文件，仅该日期对应的版本适用于本文件：不注日期的引用文件，其最新版本（包括的修改单）适用于本文件.
GB19489实验室生物安全通用要求
WS/T640临床微生物学检验样本的采集和转运
3.术语和定义
下列术语和定义适用于本文件.
3. 1
分枝杆菌培养Mycobacteriaculture
选用适合分枝杆菌生长的培养基和培养条件进行培养，其结果仍是目前诊断肺结核和非结核分枝杆菌感染的金标准，常用方法有固体分离培养和液体分离培养方法.
3.2
分枝杆菌液体培养MycobacterialLiquidCulture
对待检样本进行去污处理（杀灭样本中非分枝杆菌）后接种到基于米氏
T/CHATA 056-2026
7H9（Middlebrook7H9)肉汤为主的分枝杆菌专用复合型液体培养基进行分离培养，并通过检测培养管荧光信号值、颜色改变或管内气体压力变化等指标间接判定培养结果.
3.3
去污染处理decontamination
在分枝杆菌培养实验中，利用分枝杆菌具有一定耐酸碱的特性，使用碱性处理液对样本进行处理，以便杀死分枝杆菌以外的细菌，从面通过进一步培养得到纯的分枝杆菌培养物.3.4
墓-尼氏染色Ziehl-Neelsen Staining
常用的抗酸染色法之一，使用石炭酸复红进行初染，酸性乙醇脱色后，碱性关兰复染，抗酸杆菌在镜下呈红色，其他细菌为蓝色，可有效区分抗酸菌和其他细菌.
3.5
米氏7H9（Middlebrook7H9)肉汤
主要成分包括硫酸铵、L-谷氨酸、柠檬酸钠、毗哆醛、生物素、磷酸氢二钠、磷酸氢二钾、柠檬酸铁铵、硫酸铁、氯化钙、硫酸锌、硫酸铜等营养成分，是分枝杆菌培养用液体培养基主要成分.
4.检验目的
用于结核病和非结核分枝杆菌感染疾病的诊断及治疗过程中的疗效监测：其阳性培养物可用于进一步检测，如分枝杆菌菌种鉴定、抗结核药物敏感性试验及全基因组测序等检测.
5.对象与样本
检测对象为疑似分枝杆菌感染患者、随访治疗患者，检测样本为痰液、支气管肺泡灌洗液等临床样本.
