ICS65.020.30 B43 SN 中华人民共和国出入境检验检疫行业标准 SN/T5202—2020 代替SN/T3011.1一2011 梅花鹿物种鉴定技术规范 实时荧光PCR法 Protocol for species identification of Cervus Nippon- Real-time PCR method 2020-12-30发布 2021-07-01实施 中华人民共和国海关总署发布 SN/T5202—2020 梅花鹿物种鉴定技术规范一实时荧光PCR法 1范围 本文件规定了梅花鹿物种鉴定实时荧光PCR方法. 本文件适用于梅花鹿源性产品（梅花鹿茸、梅花鹿血、梅花鹿胎盘、梅花鹿托等非深加工产品） 的定性检测. 2规范性引用文件 下列文件中的内容通过文中的规范性引用而构成本文件必不可少的条款.其中，注日期的引用文 件，仅该日期对应的版本适用于本文件；不注日期的引用文件，其最新版本（包括的修改单）适 用于本文件. GB/T6682分析实验室用水规格和试验方法 3术语和定义 下列术语和定义适用于本文件. Ct值clycle threshold 每个反应管内的荧光信号达到设定的阈值时所经历的循环数. 4缩略语 下列缩略语适用于文件. PCR:链式聚合反应(polymerase chain reaction). DNA:脱氧核糖核酸(deoxyribonucleic acid) dNTP:脱氧核糖核苷三磷酸(deoxy-ribonucleoside triphosphate)o CTAB:十六烷基三甲基溴化铵(cetyltrimethylammonium ammonium bromide)e Tris:三羟甲基氨基甲烷(trs-(hydroxymethyl)-aminometha)o EDTA:乙二胺四乙酸(ethylenediaminetetraacetic acid). Taq:水生栖热菌(thermusaquaticus). UNG:尿嘧啶-N-糖基化酶(uracil--N-glycosylase). OD:光密度值(optical density)o ddH O:双蒸水(double distilled water)o 5试剂与材料 除另有规定外，试剂为分析纯或生化试剂，实验用水符合GB6682的要求. 5.1检测用引物和探针 5’端引物F:5-TCTGCCCTATCAACTTTCGATGGTA-3; SN/T5202-2020 3’端引物R:5-AATTTGCGCGCCTGCTGCCTTCCTT--3; 探针P:5-FAM-CCGTTTCTCAGGCTCCCTCTCCGGAATCGAACC-TAMRA-3; 梅花鹿基因扩展靶标参考序列参见附录A. 5.2试剂 5.2.1CTAB提取缓冲液：20ng/L CTAB 0.1mol L T...
SN/T 5202-2020 梅花鹿物种鉴定技术规范-实时荧光PCR法.pdf
