ICS 65.120 B46
中华人民共和国国家标准
GB/T14701-2019 代替GB/T14701-2002
饲料中维生素B2的测定
Determination of vitaminB2in feeds
2019-06-04发布2020-01-01实施
国家市场监督管理总局发布 中国国家标准化管理委员会
GB/T14701-2019
前言
本标准按照GB/T1.1一2009给出的规则起草。
本标准与GB/T14701一2002相比,主要技术内容修改如下: 修改了方法1、方法2适用范围以及检出限、定量限(见第1章,2002年版的第1章); 规定了不同饲料类型的仲裁法(见第1章,2002年版的第1章); 修改了样品的粉碎粒度(见第3章,2002年版的第3章); 补充了维生素B2紫外检测色谱条件下和荧光检测色谱条件下的标准色谱图(见附录A图A.1 和图A.2)。
本标准由全国饲料工业标准化技术委员会(SAC/TC76)提出并归口。
本标准起草单位:中国农业科学院农业质量标准与检测技术研究所[国家饲料质量监督检验中心 (北京)]。
本标准主要起草人:李兰、索德成、魏书林。
本标准所代替标准的历次版本发布情况为: GB/T14701-1993、GB/T14701-2002。
SAC
GB/T14701-2019
饲料中维生素B2的测定
1范围
本标准规定了饲料中维生素B(即核黄素CH2No)测定的荧光分光光度法和高效液相色谱法。
本标准方法1适用于动物性和植物性饲料原料、配合饲料、浓缩饲料中维生素B的测定,定量限为 0.25 mg/kg. 本标准方法2适用于维生素预混合饲料、复合预混合饲料、浓缩饲料中维生素B2的测定,以荧光检 测器检测时,定量限为5mg/kg;以紫外检测器检测时,定量限为10mg/kg。
浓缩饲料中维生素B的测定,方法1为仲裁法;维生素预混合饲料、添加剂预混合饲料中维生素 B的测定,方法2中的高效液相色谱荧光检测器方法为仲裁法。
2规范性引用文件
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GB/T6682分析实验室用水规格和试验方法 GB/T14699.1饲料采样 GB/T20195动物饲料试样的制备
3方法1荧光分光光度法
3.1原理
维生素B(核黄素)在440nm紫外光激发下产生绿色荧光,在一定浓度范围内其荧光强度与核黄 素含量成正比。
用连二亚硫酸钠还原核黄素成无荧光物质,由还原前后荧光强度之差与荧光强度的比 值计算样品中维生素B的含量。
3.2试剂或溶液
除非另有说明,所用试剂均为分析纯试剂,水为蒸馏水,符合GB/T6682中三级用水或相当纯度 的水。
3.2.1氢氧化钠溶液:0.05mol/L。
3.2.2氢氧化钠溶液:1.0mol/L。
3.2.3盐酸溶液:0.1mol/L。
3.2.4盐酸溶液:1.0mol/L。
3.2.5连二亚硫酸钠(Na2S2O4)。
3.2.6高锰酸钾溶液:40g/L。
3.2.7冰乙酸。
3.2.8冰乙酸溶液,0.02mol/L:将1.8mL冰乙酸用水稀释至1000mL。
3.2.9过氧化氢溶液,100mL/L,分析当天制备。
3.2.10维生素B标准溶液
1
GB/T14701-2019
3.2.10.1维生素B2贮备液I:称取在五氧化二磷干燥器里干燥24h的维生素B2标准品(纯度大于 95%)25mg(精确至0.0001g)于250mL棕色锥形瓶中,加人约200mL冰乙酸溶液(3.2.8),在沸水浴 中煮沸直至溶解,冷却后转移至250mL棕色容量瓶中,用冰乙酸溶液(3.2.8)稀释至刻度。
滴加甲苯覆 盖,2°℃~8°℃冰箱保存,保存期6个月。
该溶液含0.1mg/mL维生素B2。
3.2.10.2维生素B2贮备液Ⅱ:取维生素B2贮备液I(3.2.10.1)10mL用冰乙酸溶液(3.2.8)稀释至 100mL,置于棕色容量瓶中滴加甲苯覆盖,2℃~8C冰箱保存,保存期3个月。
该溶液中含10μg/mL 维生素B2。
制备。
该溶液中含1ug/mL维生素B2。
3.2.11荧光素标准溶液 3.2.11.1荧光素贮备液:称取荧光素0.050g,用水稀释至1000mL,置于棕色瓶中2°C~8C冰箱保 存。
该溶液中含50μg/mL荧光素。
3.2.11.2荧光素标准工作液:取1mL荧光素贮备液(3.2.11.1),用水定容至1000mL,置于棕色瓶中 2°℃~8℃冰箱保存。
该溶液中含0.05μg/mL荧光素。
3.2.12溴甲酚绿pH...