B 41 ICS 11.220
GB 中华人民共和国国家标准
GB/T34745-2017
猪圆环病毒2型病毒SYBRGreenI实时 荧光定量PCR检测方法
Porcine circovirus type 2-Methodofdetectingvirus bySYBR GreenIreal-timePCR
2017-11-01发布2018-05-01实施 中华人民共和国国家质量监督检验检疫总局发布 中国国家标准化管理委员会
GB/T34745-2017
前言
本标准按照GB/T1.1一2009给出的规则起草。
本标准由中华人民共和国农业部提出。
本标准由全国动物卫生标准化技术委员会(SAC/TC181)归口。
本标准起草单位：河南农业大学、中国动物卫生与流行病学中心。
本标准主要起草人：魏战勇、郑兰兰、邵卫星、胡慧、陈红英、王亚宾、王学兵、崔保安、寇亚楠。
GB/T 34745-2017
猪圆环病毒2型病毒SYBRGreenI实时 荧光定量PCR检测方法
1范围
本标准规定了SYBRGreenI实时荧光定量PCR检测猪圆环病毒2型的技术要求。
本标准用于检测猪圆环病毒2型核酸，适用于临床样品中猪圆环病毒2型的快速检测。
2规范性引用文件
下列文件对于本文件的应用是必不可少的。
凡是注日期的引用文件，仅注日期的版本适用于本文 件。
凡是不注日期的引用文件，其最新版本（包括的修改单)适用于本文件。
GB/T6682分析实验室用水规格和试验方法
3缩略语
下列缩略语适用于本文件。
Ct值：循环阈值（CycleThreshold） DNA：脱氧核糖核酸（DeoxyribonucleicAcid) EDTA：乙二胺四乙酸（EthylenediaminetetraaceticAcid) PBS：磷酸盐缓冲溶液（PhosphateBufferSaline） PCR：聚合酶链式反应（Polymerase ChainReaction) PCV2：猪圆环病毒2型（PorcineCircovirusType2） PMWS：仔猪断奶后多系统衰竭综合征（PostweaningMultisystemicWastingSyndrome） Taq酶：TaqDNA聚合酶（TaqDNAPolymerase) tm值：解链温度（MeltingTemperature）
4试剂
除非另有规定，仅使用分析纯试剂。
试剂均用无RNA酶污染的容器（用DEPC水处理后高压 灭菌)分装。
4.1蛋白酶K（配制见附录A)：一20°C保存。
4.2裂解缓冲液（配制见附录A)：4°C保存。
4.3异硫氰酸胍裂解液（配制见附录A）：4°C保存。
平衡酚（配制见附录A)：4°C保存。
4.5酚-氯仿-异戊醇（25：24：1)混合液（配制见附录A)：4°C保存。
4.6氯仿-异戊醇（24：1)（配制见附录A)：4°C保存。
4.7氯仿：常温保存。
4.8异丙醇：常温保存。
4.970%乙醇：用新开启的无水乙醇和灭菌去离子水配制（符合GB/T6682要求），一20C预冷。
1...
