ICS65.020.30 B44 中国实验动物学会团体标准 T/CALAS89—2020 实验动物””鼠痘病毒环介导等温扩增 (NCOR)检测方法 Laboratory animal-Detection of ectromelia virus by loop-mediated isothermal amplification assay 4242-34-03”发布NN0”4243-23-23”实施 中国实验动物学会发布 前言 本文件按照GB/T1.1一2020给出的规则起草. 本文件由中国实验动物学会归口. 本文件由全国实验动物标准化技术委员会(SAC/TC281)技术审查. 本文件由中国实验动物学会实验动物标准化专业委员会提出并组织起草. 本文件起草单位：上海实验动物研究中心、中国农业科学院哈尔滨兽医研究所. 本文件主要起草人：周洁、于海波、李昌文、陶凌云、陈洪岩. 实验动物 鼠痘病毒环介导等温扩增(LAMP) 检测方法 1范围 本文件规定了实验动物鼠痘病毒(ectromelia virus Ect)LAMP检测的原理、方法和 结果判定. 本文件适用于实验小鼠鼠痘病毒的检测. 2规范性引用文件 本文件无规范性引用文件. 3术语和定义 下列术语和定义适用于本文件. 3.1 环介导等温扩增法loop-mediated isothermal amplification LAMP 环介导等温扩增法是利用4~6条特异性引物在具有链置换活性的Bst DNA聚合酶的 作用下，恒温条件下1h内完成核酸扩增反应的一种特异、高效、可视化的链取代核酸扩 增技术. 4基本原理 DNA在65℃左右处于动态平衡状态，利用可以产生环状结构的引物和Bst DNA聚合 酶链置换合成的活性，在靶序列两端引物结合处循环不断地产生环状单链结构.任何一个 引物向双链DNA的互补部位进行碱基配对延伸时，另一条链就会解离变成单链，引物 在恒温条件下引发新链的合成，达到高效扩增靶基因的目的.最后通过核酸扩增过程中产 生焦磷酸镁沉淀与荧光染料结合产生的绿色荧光判定阳性结果. 5主要试剂和器材 5.1试剂 a)病毒基因组DNA提取试剂盒. b)核糖核酸环介导等温扩增试剂盒. c)环介导等温扩增荧光目视检测试剂盒. 5.2器材 a)水浴锅. ...
T/CALAS 89-2020 实验动物 鼠痘病毒环介导等温扩增（LAMP）检测方法.pdf
