ICS19.020 CCS C04 T/FJCA 团体标准 T/FJCA 003-2024 特殊食品和化妆品减脂功效测试秀丽隐 杆线虫法 2024-03-29发布 2024-04-01实施 福建省特殊食品与化妆品协会 发布
T/FJCA003-2024 前言 本文件按照GB/T1.1-2020《标准化工作导则第1部分：标准化文件的结构和起草规则》的规定 起草。
请注意本文件的某些内容可能涉及专利，本文件的发布机构不承担识别专利的责任。
本文件由福建上源生物科学技术有限公司提出。
本文件由福建省特殊食品与化妆品协会归口。
本文件起草单位：福建上源生物科学技术有限公司、安发（福建）生物科技有限公司、广东丸美生 物技术股份有限公司、福建省食品药品质量检验研究院。
本文件主要起草人：张壬辉、高益槐、刘涵、刘用国、赵培、郑春源、孙怀庆、张熠、陈岚彬。
T/FJCA 003--2024 特殊食品和化妆品减脂功效测试秀丽隐杆线虫法 1范围 品进行减脂功效测试的方法。
本文件适用于特殊食品和化妆品减脂功效的测试，特殊食品和化妆品的原料可参考本方法执行。
2规范性引用文件 下列文件中的内容通过文中的规范性引用而构成本文件必不可少的条款。
其中，注日期的引用文件， 仅该日期对应的版本适用于本文件；不注日期的引用文件，其最新版本（包括的修改单）适用于本 文件。
DB35/T2132-2023实验用秀丽隐杆线虫饲育技术 T/GDCA013一2022化妆品抗氧化活性的评价秀丽线虫法 3术语和定义 本文件没有需要界定的术语和定义。
4符号和缩略语 下列符号和缩略语适用于本文件。
CAS：CAS登录号（CASRegistryNumber） CI：空白对照组平均总强度值（IntensityofBlankControlGroup） IL：脂质抑制率（InhibitionRateofLipid） LB：溶菌肉汤（Luria-Bertani） NGM：线虫生长培养基（NematodeGrowthMedium） OP50-NGM：含有尿嘧啶合成缺陷型大肠杆菌的线虫生长培养基（Escherichia coliOP50on Nematode Growth Medium) P:P值（Pvalue) SI：样品组平均总强度值（IntensityofSample Group） t-test:T检验（Student's I test） 5检测原理 油红O是一种脂溶性二唑染料，可与线虫的中性脂质和胆固醇酯特异性结合而着色。
线虫通身透明， 可以通过观测油红O在线虫体内的着色水平来判断其脂肪含量。
利用ImageJ2软件处理线虫的油红着 色样图即可进行定量分析。
6材料与试剂 6.1材料 所需材料如下： 一一线虫、尿嘧啶合成缺陷型大肠杆菌（Escherichia coliOP50，E.coliOP50）； -一挑虫器； -一培养Ⅲ；
T/FJCA 003-2024 一移液枪。
6.2试剂 除非另有说明，化学试剂使用符合国家标准的分析纯试剂。
配制方法见附录A及DB35/T2132-2023。
油红O（C2sH24N4O）、氯化钠（NaCI）、氯化钙（CaCl）、硫酸镁（MgSO4）、氯化钾（KCI）、 磷酸氢二钾（KHPO4）、磷酸二氢钾（KHPO4）、二甲基亚矾（DMSO）、无水乙醇、胆固醇、琼脂 粉（Agar）、LB、蛋白豚、异丙醇、免疫染色通透液（TritonX-100）、磷酸缓冲盐溶液（PBS缓冲液）。
6.3阳性对照品 奥利司他标准品（Orlistat），纯度≥98%，CAS：96829-58-2。
7实验仪器与设备 所需仪器与设备如下： -一体视显微镜，放大倍数5倍～50倍； 一恒温培养箱，精度±1C； 一一洁净工作台； 一一万分之一天平，精度0.1mg； 一一高压灭菌锅； -一高速离心机； 一恒温摇床； 一旋转混匀仪； --20°℃冰箱； 一一光学显微镜，物镜变倍不小于10倍。
8测试方法 8.1受试样品处理 配制受试样品测试母液时，若受试样品为水溶性物质，则使用无菌双蒸水作为溶剂：若受试样品为 非水溶性物质，可选用DMSO作为溶剂。
8.2线虫NGM制备 8.2.1空白对照组NGM的配制 空白对照组NGM的配制按照DB35/T2132-2023的相关规定执行。
8.2.2受试样品组NGM的配制 受试样品组NGM的配制按照T/GDCA013-2022的相关规定执行。
8.2.3阳性对照组NGM的配制 阳性对照奥利司他组：用DMSO配制成6mg/mL母液，取奥利司他母液分别同熔融的NGM及E.coli OP50菌液按999:1比例混合均匀，将奥利司他终浓度为6μg/mL的NGM加入6...
