NY
中华人民共和国农业行业标准
NY/T1857.8-2010
黄瓜主要病害抗病性鉴定技术规程 第8部分：黄瓜抗南方根结线虫病 鉴定技术规程
Rules for evaluation of cucumber for resistance to diseasesPart8:Rule for evaluation of cucumber forresistance tosouthernroot-knotnematode disease
中华人民共和国农业部发布
前言
NY/T1857-2010《黄瓜主要病害抗病性鉴定技术规程》为系列标准，共8部分：
第1部分：黄瓜抗霜霉病鉴定技术规程；一第2部分：黄瓜抗白粉病鉴定技术规程； 第3部分：黄瓜抗枯萎病鉴定技术规程；一第4部分：黄瓜抗疫病鉴定技术规程；一第5部分：黄瓜抗黑星病鉴定技术规程；第6部分：黄瓜抗细菌性角斑病鉴定技术规程；一第8部分：黄瓜抗南方根结线虫病鉴定技术规程. 一第7部分：黄瓜抗黄瓜花叶病毒病鉴定技术规程；本部分为NY/T1857-2010的第8部分.本部分的附录A为资料性附录.本部分由中华人民共和国农业部种植业管理司提出并归口. 本部分起草单位：中国农业科学院蔬菜花卉研究所.本部分主要起草人：杨宇红、谢丙炎、冯兰香、杨翠荣、龚慧芝.
第8部分：黄瓜抗南方根结线虫病鉴定技术规程 黄瓜主要病害抗病性鉴定技术规程
1范围
病情调查、抗病性评价和鉴定记载表格. 本部分规定了黄瓜抗南方根结线虫病鉴定的术语和定义、接种体制备、鉴定条件及试验设计、接种、
本部分适用于各种黄瓜资源对南方根结线虫病抗性的室内鉴定及评价.
2术语和定义
下列术语和定义适用于本部分.
2. 1抗病性diseaseresistance植物体所具有的能够减轻或克服病原物致病作用的可遗传性状.
2.2 抗病性鉴定identification of diseaseresistance通过适宜技术方法鉴定植物对南方根结线虫病害的抵抗水平.
2.3抗性评价evaluationofresistancelevels根据采用的技术标准判别植物对特定病害反应程度和抵抗水平的描述.
2. 4 致病性pathogenicity病原物所具有的破坏寄主和引起病变的能力.
2.5人工接种artificialinoculation 在适宜条件下，通过人工操作将接种体置于植物体适当部位并使之发病的过程.
2.6根结级别root-knot rating scale人为定量植物个体或群体根结线虫发病程度的数值化描述.
2.7 接种体inoculum用于接种以引起病害的病原物或病原物的一部分.
通过对植物个体发病程度（根结级别）数值的计算所获得的群体发病程度的数值化描述形式.
鉴别寄主differential host
用于鉴定和区分特定病原体的生理小种/致病型/株系的一套带有不同抗性基因的寄主品种/品系或材料.
2.11
黄瓜南方根结线虫病Cucumber southernroot-knotnematode
由南方根结线虫（MeloidogyneincognitaChitwood）所引起的以根部产生大小不等的瘤状根结症状的黄瓜线虫病害.
3接种体制备
3.1根结线虫的分离
采集感染根结线虫的病根，以直接解剖分离法或悬浮网筛技术分离根结线虫，经形态学和同工酶表种在感病寄主上保存备用.
3.2生理小种鉴定
对用于抗性鉴定接种的南方根结线虫首先进行生理小种鉴定，生理小种鉴别寄主是6种植物，不同小种在鉴别寄主上的繁殖能力不同.具体鉴定方法见附录A的A.2.
3.3接种体的繁殖与保存
在接种前需要进行南方根结线虫接种体的繁殖.常用繁殖方法为将已纯化的南方根结线虫接种于感病番茄品种Rutgers.Micro-Tomoto、早粉2号或丽春上，在温室中进行繁殖与保存.接种前采用直 接解剖分离法或悬浮网筛技术分离卵块（将待分离植物根部洗净，切成长1cm~2cm的小段，放人大型烧杯中，加人0.5%次氯酸钠溶液没过根段浸泡30s，边浸泡边搓抓根部或用力搅动，然后经上层200目、下层500目的两层网筛过滤，再用自来水清洗下层网筛，最后收集下层网筛上的卵块，并用蒸馏水悬浮卵块），在25℃~28℃下孵化3d~5d，收集2龄幼虫（J2）备用.
日常保存方法：采用活体保存，即在日光温室里种植“早粉2号"或“Rutgers"等感病番茄，幼苗长至2~3片真叶时，将病原线虫接种在番茄植株的根部.
4室内抗性鉴定
4.1鉴定室设置
人工接种鉴定室应具备人工调节温度、湿度及光报的条件，使人工接种后具备良好的发病环境.
4.2鉴定对照品种
鉴定时设“翠宝”黄瓜为感病对照品种，目前尚未发现抗南方根结线虫的黄瓜材料.
4.3鉴定设计
鉴定材料随机或斯序排列，每份材料重复3次，每重复10株苗.
4.4鉴定材料育苗
鉴定材料种子经5%次氯酸钠溶液浸种10min后，用清水冲洗，放人垫有两层滤纸的培养Ⅲ中，然后于恒温培养箱中28℃催芽.待胚根长至0.5cm时，将其播于装有播种基质的塑料育苗体内.育苗基质为草炭、蛭石和莱田土（2：1：1)，基质经高温蒸汽灭菌（134℃，30min），在20℃~25C的目光温室内育苗，幼苗应生长健壮、一致.
4.5接种
4.5.1接种期
黄瓜根结线虫病抗性鉴定接种期为1~2叶期.
4.5.2接种浓度
2龄幼虫J2）约400条/mL.
4.5.3接种方法
采用根部注入法，在根部附近打一小孔，取1mL线虫接种液注入孔内.
4.6接种后管理
接种后将植株置于鉴定室内保持70%～80%土壤湿度48h，以后在自然光照条件下正常管理，接种期间温度控制在25℃~30C范围内.
5病情调查
5.1调查时间
病情调查于接种后40d~45d进行.
5.2调查方法
调查每份鉴定材料根部发病情况，根据病害症状描述，逐份材料进行调查，记载病情级别，计算出根结指数（RKI).
根结指数按公式（1）计算：
∑（sXn)RKI= N (1)
式中：
RKI 根结指数；s- 各病情级别病株数； 各病情级别代表数值；N-调查总株数，
5.3病情分级标准
室内病情分级及其对应的症状描述见表1.
表1黄瓜南方根结线虫病情级别划分
病情级别 症状插述0 1 根系轻微感染，般结数10个以下，根结百分率小于10% 整个根系没有概结2 根结明量，根结数10~50个，根结百分率11%~25%3 根结百分率26%~50%4 5 根结百分率76%~100% 根结百分率51%~75%
6抗性评价
6.1鉴定有效性判别
当感病对照材料达到其相应感病程度（RKI>3.0），该批次抗根结线虫病鉴定视为有效.
6.2抗性评价标准
依据鉴定材料的发病程度（根结指数）确定其对根结线虫病的抗性水平，划分标准见表2.
表2黄瓜对南方根结线虫病抗性评价标准
根结指数 抗性评价0<RKI≤1.0 高抗（HR）1. 0<RKI≤2.0 抗病（R）
