标
体
准
T/SHPPA 030-2025
生物制品中支原体核酸扩增技术检查法 验证要求
Requirements for validating rapid mycoplasma testing of biologics by nucleic acid amplification techniques
上海医药行业协会 发布
目次
前言引言1范围2规范性引用文件3术语和定义4总体原则.5技术要求，5.1验证要求，5.2验证参数.5.3干扰物质试验附录A（资料性） 检测原理.参考文献
前言
本文件按照GB/T1.1-2020《标准化工作导则第1部分：标准化文件的结构和起草规则》的规定起草.
请注意本文件的某些内容可能涉及专利.本文件的发布机构不承担识别专利的责任.
本文件由上海市生物医药科技产业促进中心、上海医药行业协会提出.
本文件由上海医药行业协会归口.
本文件起草单位：上海市生物医药科技产业促进中心、上海药品审评核查中心、上海农林职业技术学院、上海医药行业协会.
蓓芬、尉茜、钱洋、徐增辉、韩忠阳、顾莉萍、唐勇、王利俭、杨清、孙晓亮、卢洪秀徐莉. 本文件主要起草人：刘厚佳、唐军、陈明伟、郑熊媛、梅妮、张洋、赵思扬、夷征宇、吴罐卫、朱
本文件首批执行单位：深圳赛诺菲巴斯德生物制品有限公司、上海细胞治疗集团、上海金检检测有限公司、北京艺妙神州医药科技有限公司、上海药知科技有限公司.
引言
支原体是生物制品生产过程中越来越不可忽视的污染源，按照目前的法规和检测方法常指代的是柔膜菌纲微生物.它们是目前已知的最小最简单的单细胞微生物，具有多形性，生产过程中所使用的除菌滤膜无法对其有效拦截：对常用抗生素具有一定耐药性：且有黏附性，易污染生产用细胞株/系且较 难清除.
真核细胞株/系易受支原体污染，会导致反应系统的效能和产物质量下降，损失成本和生产时间，对直接用于患者治疗的如细胞治疗产品，其支原体污染的控制尤为重要.
现有支原体检查法检查时间较长，故可通过验证建立快速支原体检查法，用于中间过程控制或产品放行检查.本文件用于指导生物制品中支原体核酸扩增技术检查法的验证，以确保方法正确性.
生物制品中支原体核酸扩增技术检查法验证要求
1范围
本文件给出了生物制品中支原体核酸扩增技术检查法的验证原则及要求.
病毒载体等）及其他生物培养体系生产的疫苗（包括：鸡胚产灭活疫苗等）、细胞治疗产品等支原体核 本文件适用于采用真核细胞株/系进行生产的生物制品（包括：重组疫苗、单克隆抗体、偶联抗体、酸扩增技术检查法的验证管理.
生物制品和细胞治疗产品研发、临床试验，及中间过程控制时采用支原体核酸扩增技术检查法的验证可参照执行.
2规范性引用文件
下列文件中的内容通过文中的规范性引用面构成本文件必不可少的条款.其中，注日期的引用文件，仅该日期对应的版本适用于本文件：不注日期的引用文件，其最新版本（包括的修改单）适用于本 文件.
药品生产质量管理规范（2010年修订）药品生产质量管理规范（2010年修订）无菌药品附录（征求意见稿）（2025年3月14日）中华人民共和国药典<9203）药品微生物实验室质量管理指导原则（2025年版） 中华人民共和国药典支原体检查法（2025年版）
3术语和定义
下列术语和定义适用于本文件.
3. 1
核酸扩增技术nucleic acid amplification techniques，NAT
利用引物和聚合酶链式反应（polymerase chainreaction）在体外对目标核酸进行特异性扩增的
方法.
3. 2
聚合酶链式反应polymerase chainreaction，PCR
利用DNA双链复制的原理，在生物体外复制特定DNA片段的核酸合成技术，通常利用热循环仪完成变性、退火、延伸三个基本步骤的循环.
3.3
基因拷贝数gene copy，GC
某个基因在生物体基因组中的个数.
3.4
阳性临界值positive cut-offpoint
95%的测试循环中可以检测到的每单位体积样本中的最小目标序列数.
3.5
