中华人民共和国粮食行业标准
粮油检验 谷物中脱氧雪腐镰刀菌烯醇的 测定荧光免疫层析快速定量法
Inspection ofgrain andoilsDetermination ofdeoxynivalenol incerealsFluorescent immunochromatographicmethod
国家粮食和物资储备局 发布 出版
前言
本文件按照GB/T1.1-2020《标准化工作导则第1部分：标准化文件的结构和起草规则》的规定起草.
请注意本文件的某些内容可能涉及专利，本文件的发布机构不承担识别专利的责任.
本文件由国家粮食和物资储备局提出.
本文件由全国粮油标准化技术委员会（SAC/TC270）归口.
本文件起草单位：国家粮食和物资储备局科学研究院、中储粮成都储藏研究院有限公司、中储粮江苏质检中心有限公司、中国农业大学、安徽省粮油产品质量监督检测站、江南大学、北京工商大学、广西壮族自治区粮油质量检验中心、陕西省粮食质量安全中心、上海市农业科学院、北京市农林科学院、 广西-东盟食品检验检测中心、南京微测生物科技有限公司、北京维德维康生物技术有限公司、江苏省苏微微生物研究有限公司、广东达元绿洲食品安全科技股份有限公司、北京中仪智控科技有限公司、北京济全生物科技有限公司.
本文件主要起草人：叶金、王松雪、崔华、温凯、陈晋莹、袁华山、胡斌、孙秀兰、李健、李丽、吴宇、伍先绍、蒋国振、刘洪美、韩钟、王蒙、王海波、李森、纪剑、孙嘉笛、聂冬霞、倪保霞、肖理文、马立才、 张海涛、刘芸、李勇、邓庆、王平东、陈红亮.
粮油检验谷物中脱氧雪腐镰刀菌烯醇的 测定荧光免疫层析快速定量法
1范围
本文件描述了荧光免疫层析法测定谷物中脱氧雪腐镰刀菌烯醇的方法，规定了试剂及材料、仅器及设备、样品制备、样品测定、结果表述和精密度的要求.
本文件适用于小麦、玉米中脱氧雪腐镰刀菌烯醇的快速定量检测.
本文件的方法检出限为100μg/kg，定量限为260μg/kg.
2规范性引用文件
下列文件中的内容通过文中的规范性引用而构成本文件必不可少的条款.其中，注日期的引用文件，仅该日期对应的版本适用于本文件：不注日期的引用文件，其最新版本（包括的修改单）适用于本文件.
GB/T6682分析实验室用水规格和试验方法 GB/T5491粮食、油料检验扦样、分样法GB/T27404实验室质量控制规范食品理化检测
3术语和定义
本文件没有需要界定的术语和定义.
4原理
合后，抑制了层析过程中抗体与硝酸纤维膜检测线上脱氧雪腐刀菌烯醇-BSA偶联物的免疫反应，使 试样中脱氧雪腐镰刀菌烯醇与含销-整合物的聚苯乙烯微球等荧光材料标记的特异性抗体发生结检测线上荧光强度降低，通过荧光强度变化和荧光分析仪的内置标准曲线，自动计算出试样中脱氧雪腐镰刀菌烯醇的含量.
5试剂及材料
除另有说明外，所用试剂均为分析纯，实验室用水应符合GB/T6682中三级水的要求.5.1脱氧雪腐镰刀菌烯醇荧光免疫层析卡（以下简称"检测卡"）：性能应满足附录A的要求，不同品牌不同批次的检测卡使用前，应按照附录A进行检测卡性能测定. 5.210μg/mL脱氧雪腐刀菌烯醇标准储备溶液.液100pL于10mL容量瓶中，用水定容至刻度线.冷藏条件下可保存3个月.5.4样品稀释液：由检测卡配套提供，或根据产品说明书配制.5.5离心管：50mL和1.5mL
LS/T
6仪器及设备
6.1粉碎机：转速≥1000r/min.6.3天平：感量0.01g- 6.2分样筛：1mm孔径.6.4离心机;转速≥4000r/min.6.5振荡器：转速≥2500r/min.6.7真菌毒素荧光定量快速检测仪：激发波长为365nm土5nm，发射波长为615nm土5nm，或根据产 6.6计时器.品说明书设置.6.8定性滤纸：孔径>8μm.6.9孵育器：能进行控温（控温精度土1℃）孵育，具有时间调整功能.
7样品制备
7.1扦样与分样
按照GB/T5491执行，在采样过程中，应防止样品污染，取代表性样品不少于500g.
7.2样品粉碎
用粉碎机（6.1）将被测样品粉碎至全部通过1mm分样筛（6.2），充分混合均匀.
7.3待测溶液制备
用天平（6.3）准确称取粉碎后的样品5.0g（精确到0.01g）于50mL离心管（5.5）中，加人20mL水.使用振荡器（6.5）提取5min~7min，静置3min，过滤或离心得上清液，准确吸取450yL平衡至 室温的样品稀释液（5.4）与50pL上清液涡旋混合，此溶液为待测溶液.
注：不同厂家检测卡所用的样品制备方法可能不同，需按照产品使用说明中规定方法进行.
8样品测定
8.1将检测卡（5.1）放置室温平衡15min.8.2仪器校准：选取测试项目为脱氧雪腐镰刀菌烯醇，准确吸取100gL.脱氧雪腐镰刀菌烯醇标准溶液后，将其放人真菌毒素荧光定量快速检测仪（6.7）中点击仪器主界面”测量”菜单中"标准测量“按钮然 （5.3）通过样品稀释液（5.4）稀释10倍后，加到检测卡加样小孔中，在室温或在孵育器（6.9）孵育10min后按“是”按钮进行校准.8.3样品检测：准确吸取100gL待测溶液（7.3），加到检测卡加样小孔中，室温孵育10min后，将其放雪腐镰刀菌烯醇的含量.
注：不同厂家真菌毒索荧光定量快速检测仪操作菜单和读取界面可能不同需按照产品使用说明中规定进行.
9结果表述
试样中脱氧雪腐镰刀菌烯醇含量由真菌毒素荧光定量快速检测仪自动计算并显示，单位为μg/kg.2
计算结果以重复性条件下获得的两次独立测定结果的算术平均值表示，保留至小数点后两位.
10精密度
件下获得的两次独立测定结果的绝对差值不应超过算术平均值的25%. 在重复性条件下获得的两次独立测定结果的绝对差值不应超过算术平均值的20%.在再现性条
