中华人民共和国粮食行业标准
粮油检验 粮食中T-2/HT-2毒素的 测定胶体金快速定量法
Inspection of grain and oils-Determination of T-2/HT-2 toxins ingrain-Colloidalgoldrapidquantitativemethod
国家粮食和物资储备局 发布 出版
前言
本文件按照GB/T1.1-2020《标准化工作导则第1部分：标准化文件的结构和起草规则》的规定起草.
请注意本文件的某些内容可能涉及专利，本文件的发布机构不承担识别专利的责任.
本文件由国家粮食和物资储备局提出.
本文件由全国粮油标准化技术委员会（SAC/TC270）归口.
和物资储备局科学研究院、福建农林大学、山东省粮油检测中心、黑龙江省粮食质量安全监测和技术中心、辽宁省粮食和物资储备事务服务中心、湖南省粮油产品质量监测中心、陕西省粮食质量安全中心、 河南省食品和盐业检验技术研究院、山西省检验检测中心（山西省标准计量技术研究院）、江西省检验检测认证总院食品检验检测研究院、湖北省粮油食品质量监督检测中心、北京中检葆泰生物技术有限公司.
本文件主要起草人：黄建立、谢婷婷、马宏、张青龄、王松雪、叶金、刘洪美、汪世华、田宪玺、宋永泉、季澜洋、徐春峰、闵国春、朱旭东、范艺凡、倪小英、赵荔、刘莹、宋泽伟、彭志兵、孙婷琳、李华、
粮油检验粮食中T-2/HT-2毒素的 测定胶体金快速定量法
1范围
本文件描述了胶体金快速定量法测定T-2/HT-2毒素的方法，规定了试剂和材料、仪器设备、样品制备、样品测定、结果表述和精密度的要求.
本文件适用于小麦、玉米中T-2/HT-2毒素总量的快速定量检测.
本文件的方法检出限为5μg/kg，定量限为11μg/kg.
2规范性引用文件
下列文件中的内容通过文中的规范性引用而构成本文件必不可少的条款.其中，注日期的引用文件，仅该日期对应的版本适用于本文件：不注日期的引用文件，其最新版本（包括的修改单）适用于本文件.
GB/T5491粮食、油料检验扦样、分样法
GB/T6682分析实验室用水规格和试验方法
3术语和定义
本文件没有需要界定的术语和定义.
4原理
试样提取液中T-2/HT-2毒素与检测条中的胶体金微粒发生呈色反应，颜色深浅与试样中T-2/HT-2毒素含量相关.用读数仅测定检测条上检测线和质控线颜色深浅，根据颜色深浅和读数仪内 置曲线自动计算出试样中T-2/HT-2毒素总量.
5试剂和材料
除另有说明外，所用试剂均为分析纯，实验室用水应符合GB/T6682中三级水的要求，5.1稀释缓冲液：由T-2/HT-2毒素胶体金检测条配套提供，或按照产品使用说明书配制.5.2试样提取液：70%（体积分数）甲醇溶液.5.3定量滤纸.
6仪器和设备
6.1粉碎机：试样粉碎后能够全部通过20目筛.6.2天平：感量0.01g. 6.3振荡器：频率≥2500r/min
LS/T 6152-2025
6.4 移液器:量程为 100 μL~1 000μl、20 p1~200μL、1 000L~5 000L.6.5离心机：转速≥4000r/min.6.6T-2/HT-2毒素胶体金快速定量检测条：冷藏储存，具体储存条件参照使用说明：技术要求按附录A.6.7孵育器：能进行45C恒温（控温精度土1C）孵育. 6.8读数仪：能测定并显示胶体金定量检测条的测定结果.
7样品制备
7.1扦样与分样
按照GB/T5491执行，在采样过程中，应防止样品污染，取代表性样品不少于500g.
7.2样品粉碎
用粉碎机（6.1）将待测样品粉碎至全部通过20目筛，充分混合均匀.
7.3样品处理
用天平（6.2）准确称取粉碎后的样品10.00g于100mL具塞锥形瓶中，加人20.0mL试样提取液(5.2）.密闭，用振荡器（6.3）振荡提取1min~2min.静置1min~2min后用定量滤纸（5.3）过滤，或移 取1.0mL~1.5mL样品提取混合液于离心管中，用离心机（6.5）4000r/min离心1min，取滤液或离心后上清液100gL于另一离心管中，加人1.0mL稀释缓冲液（5.1），充分混匀待测.
8样品测定
8.1将T-2/HT-2毒素胶体金快速定量检测条（6.6）从冷藏状态（2°C～8C）取出放置至室温.将孵育器（6.7）预热至45℃.将T-2/HT-2毒素胶体金快速定量检测条（6.6）平放在孵育器（6.7）凹槽中，打开加样孔.
8.2准确移取300gL待测溶液（7.3），加人检测条加样孔中，关闭加样孔及孵育器（6.7）盖.
8.3孵育10min后，取出T-2/HT-2毒素胶体金快速定量检测条（6.6）观察C线（质控线）和T线（检测线）的显色情况.若出现下述情况，视为无效检测.
a）C线不出现： b）C线出现，但弥散或严重不均匀：c）C线正常出现，但T线弥散或严重不均匀.
8.4选择读数仪（6.8）的T-2/HT-2毒素检测频道，开始样品测定，测定需在2min内完成，读数仪（6.8）自动显示样品中T-2/HT-2毒素的含量.
9结果表述
下获得的两次独立测定结果的算术平均值表示，保留至小数点后两位. 试样中T-2和HT-2毒素总量由读数仪自动计算并显示，单位为μg/kg.计算结果以重复性条件
10精密度
下获得的两次独立测定结果的绝对差值不应超过算术平均值的20%. 在重复性条件下获得的两次独立测定结果的绝对差值不应超过算术平均值的15%，在再现性条件
附录A
（规范性）
T-2/HT-2毒素胶体金快速定量检测条性能评价要求
A.1检出限
对不少于20份独立空白样品进行重复测定，计算平均值加3倍标准差，其结果应小于或等于本文件检出限标示值.
A.2准确性
采用11μg/kg、22μg/kg和110μg/kg3个含量水平的标准样品或采用国家标准方法定值的自然污染样品，每个含量水平测定不低于6次，计算T-2/HT-2毒素胶体金快速定量检测条检测结果与参考值的偏差，3个含量水平的偏差均应控制在一20%~20%之间.
A.3精密度
采用T-2/HT-2毒素含量为200μg/kg左右的标准样品或采用国家标准方法定值的自然污染样品，每个含量水平测定不低于6次，计算T-2/HT-2毒素胶体金快速定量检测条批内变异系数，变异系数应≤15%.
A.4批间稳定性
采用约200pg/kg含量水平的标准样品或采用国家标准方法定值的自然污染样品，不应低于6个批次，每个批次测定不低于2次，批内测定取平均值，计算检测条批间变异系数，变异系数应≤20%.
