中华人民共和国国家标准
GB23200.110-2018
食品安全国家标准 植物源性食品中氯吡脲残留量的测定 液相色谱-质谱联用法
National food safety standardDeterrmination of forchlorfenuron in foods of plant origin
版 中华人民共和国农业农村部发布
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植物源性食品中氯吡脲残留量的测定液相色谱-质谱联用法 食品安全国家标准
1范围
本标准规定了植物源性食品中氯吡脲残留量液相色谱-质谱/联用（HPLC-MS/MS）的测定方法.本标准适用于植物源性食品中氯吡脲残留量的测定.
2规范性引用文件
件.凡是不注日期的引用文件，其最新版本（包括的修改单）适用于本文件. 下列文件对于本文件的应用是必不可少的.凡是注日期的引用文件，仅注日期的版本适用于本文
GB2763食品安全国家标准食品中农药最大残留限量
3原理
试样中的氯毗豚用乙晴提取，分散固相萃取净化，液相色谱-质谱联用法测定，外标法定量.
4试剂与材料
除非另有说明，在分析中仅使用确认为分析纯试剂和符合GB/T6682规定的一级水.
4.1试剂
4.1.1甲酸（HCOOH CAS号：64-18-6）：色谱纯.4.1.2乙晴（CHCN CAS号：75-05-8）：色谱纯.4.1.3无水硫酸镁（MgSO，CAS号：7487-88-9）.4.1.4氧化钠（NaC1，CAS号：12125-02-9）.
4.2溶液配制
甲酸溶液（1499，体积比）：准确吸取1mL甲酸加人499mL水，混匀，然后将其置于超声波中超声15min，备用.
4.3标准品
氯毗脲标准品（CHCINO，CAS号：68157-60-8）：纯度≥99.0%.
4.4标准溶液配制
4.4.1氯毗豚标准储备溶液（100mg/L)：准确称取10mg（精确到0.1mg）氯吡脲标准品于50mL烧杯中，用乙溶解并转移至100mL容量瓶中，用乙晴定容至刻度，混匀，一18℃C冷冻避光保存，有效期6个月.
4.4.2氯耽豚标准工作溶液（10mg/L）：准确吸取1mL标准储备溶液加到10mL容量瓶中，用乙睛稀释至刻度，混匀，4℃下保存，有效期1个月.
4.5材料
4. 5. 1N 丙基乙二胺(PSA)，40 μm~60 μm.4.5.2石墨化炭黑（GCB）.38μm~120μm.4.5.3十八烷基键合硅胶（C）.50μm，
GB 23200.110-2018
4.5.4滤膜；0.22pm，有机系.
5仪器和设备
5.2分析天平，感量0.01g和0.0001g. 5.1液相色谐-质谱联用仪：配备电喷雾离子源（ESI）.5.3离心机，转速不低于8000r/min.5.4涡旋振荡器.
6试样的制备
的样品，取样后全部处理：对于个体较大的基本均匀样品，可在对称轴或对称面上分割或切成小块后处 蔬菜、水果和食用菌样品按相关标准取一定量，取样部位按GB2763的规定执行，对于个体较小理；对于细长、肩平或组分含量在各部分有差异的样品，可在不同部位切取小片或截成小段后处理；取后的样品将其切碎，充分混匀，用四分法取样或直接放人组织捣碎机中捣碎成匀浆，匀浆放人聚乙烯容器中.
物、茶叶、坚果和香辛料样品各500g，粉碎后充分混匀，放人聚乙烯瓶或袋中， 取谷类样品500g，粉碎后使其全部可通过425μm的标准网筛，放人聚乙烯瓶或袋中.取油料作
植物油类搅拌均匀.
试样于一18℃及以下温度条件下保存.
7分析步骤
7.1提取
7.1.1蔬菜、水果、食用菌、植物油
称取10g（精确到0.01g）试样于50mL的离心管中，加人10mL乙晴，涡旋振荡提取3min：蔬菜、水果、食用菌向离心管中加人4g无水硫酸镁和1g氯化钠，植物油向离心管中加入5g氯化钠，涡旋1min;然后4 000 r/min离心5min，取1.5mL上清液待净化.
7.1.2谷物、油料、坚果
称取5g（精确到0.01g）试样于50mL的离心管中，加人10mL水，涡旋30s使试样完全润湿；然后加人10mL乙晴，涡旋振荡提取3min：向离心管中加人5g氯化钠，涡旋1min；4000r/min离心5min，取1.5mL上清液待净化.
7.1.3茶叶、香辛料
称取2g（精确到0.01g）试样于50mL的离心管中，加人10mL水、涡旋30s使试样完全润湿；然后加人10ml.乙睛，涡旋振荡提取3min；向离心管中加人5g氯化钠，涡旋1min；4000r/min离心5min，取1.5mL上清液待净化.
7.2净化
7.2.1蔬菜、水果、食用菌、植物油
将1.5mL蔬菜（色素含量高的蔬菜如韭菜除外）或水果样品上清液放人装有50mgPSA和150mg无水硫酸镁的2mL离心管中：将1.5mL色素含量高的蔬菜样品上清液放入装有40mgPSA、15mgGCB和150mg无水硫酸镁的2mL离心管中：将1.5mL食用菌或植物油样品上清液故人装有50mgC和150mg无水硫酸镁的2mL离心管中：涡旋30s 5000r/min离心5min，取上清液过有机系滤膜，供HPLC-MS/MS检测.
7.2.2谷物、油料、坚果
将1.5mL上清液放人装有50mgC和150mg无水硫酸镁的2mL离心管中；涡旋30s.5000r/
min离心5min，取上清液过有机系滤膜，供HPLC-MS/MS检测.
7.2.3茶叶、香辛料
将1.5 mL上清液放人装有 50mg PSA、20mgGCB和150mg无水硫酸镁的2mL离心管中；涡旋30 s 5 000r/min离心5min，取上清液过有机系滤膜，供HPLC-MS/MS检测.
7.3仪器参考条件
7.3.1液相色谱参考条件
a）色谱柱：Cg柱，100mmX2.1mm（内径）.1.7um或相应类型色谱柱：b）柱温：45°℃；d）进样量：5pl； 流动相：A为乙睛，B为0.2%甲酸溶液；e）流速：0.3mL/min;f）流动相及梯度洗脱条件：见表1.
表1流动相及梯度洗脱条件（VV）
时间 流动相V 流动相V.in1.5 0 10 90 90 102.5 90 102.6 5 10 10 90 90
7.3.2质谱参考条件
a）离子源类型：ESI；b) 毛细管电压：3kV；c) d) 离子源温度：120℃： 锥孔气：氮气，50L/h；e) 干燥气：氮气，流速600L/h，温度350C；磁撞气：氢气，0.16mL/min；g）扫描方式：正离子扫描；h）检测方式：多反应监测（MRM），监测条件见表2.
表2多反应监测（MRM）的条件
化合物名称 定性离于对 m/z 定量离子对 m/z 锥孔电压 v 碰撞能量 v248 0/ 129. 0 16玺脲 248 0/93 0 248. 0/ 129. 0 20 34
7.4标准工作曲线
准确吸取适量氯吡脲标准工作溶液（4.4.2），用空白基质提取液稀释，配制成质量浓度为0.002mg/L、0.01mg/L、0.05mg/L.0.1mg/L、1mg/L系列基质标准溶液，供液相色谱-质谱联用仪测定.以测得峰面积为纵坐标、对应的标准溶液质量浓度为横坐标，绘制标准曲线，求出回归方程和相关系数.
7.5定性及定量
7.5.1保留时间
被测试样中目标化合物色谱峰的保留时间与相应标准溶液该组分色谱峰的保留时间相比较，相对
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误差应在土2.5%之内.
7.5.2定量离子、定性离子及子离子丰度比
在相同实验条件下进行样品测定时，如果检出的色谱峰的保留时间与标准样品相一致，并且在扣除背景后的样品质谱图中，目标化合物的质谱定量和定性离子应出现，而且同一检测批次，对同一化合物， 样品中目标化合物的定性离子和定量离子的相对丰度比与质量浓度相当的标准溶液相比，其允许偏差不超过表3规定的范围，则可判断样品中存在氯吡脲.
表3定性测定时相对离子丰度的最大允许偏差
单位为百分率
相对离子丰度 20 >50 20~50(含) ±25 10~20(含) ±30 ≤10 OS干允许相对偏差
7.6测定
将基质标准溶液和待测溶液分别注人液相色谱-质谱联用仪中，以保留时间和定性离子定性，样品中氯吡脲质量浓度应在标准工作曲线质量浓度范围内，超过标准工作曲线最高点的则应稀释后再进行分析.采用外标法定量.
7.7空白试验
除不加试样外，按照7.1～7.6的规定进行平行操作.
8结果计算
试样中氯吡脲残留量用质量分数计，单位以毫克每千克（mg/kg）表示，按式（1）计算.
# = AXpxV A Xm
式中：
-试样中氯毗腺残留量，单位为毫克每千克（mg/kg）； A-样品溶液中氯毗脲峰面积；一标准溶液中氯毗腺质量浓度，单位为毫克每升（mg/L）：V样品溶液定容体积，单位为毫升（mL）；A-一农药标准溶液中氯吡腺峰面积；m一试样的质量，单位为克（g）.
计算结果以重复性条件下获得的2次独立测定结果的算术平均值表示，保留2位有效数字.当结果大于1mg/kg时，保留3位有效数字.
9精密度
9.1在重复性条件下，2次独立测定结果的绝对差值不超过重复性限（r），重复性限（r）的数据为：
a）含量为0.01mg/kg时，重复性限（r）为0.0030；b）含量为0.05mg/kg时.重复性限（r）为0.012；c）含量为0.5mg/kg时，重复性限（r）为0.11.
9.2在再现性条件下，2次独立测定结果的绝对差值不超过再现性限（R），再现性限（R）的数据为：
a）含量为0.01mg/kg时，再现性限（R）为0.004 4；b）含量为0.05mg/kg时，再现性限（R）为0 015；c）含量为0.5mg/kg时，再现性限（R）为0.16.
10其他
本方法定量限为0.01mg/kg.
