中华人民共和国国家标准
GB23200.113-2018
食品安全国家标准 植物源性食品中208种农药及其代谢物 残留量的测定 气相色谱-质谱联用法
National food safety standard-Determination of 208 pesticides and metabolitesresidues in foods of plant originGas chromatography-tanderm mass spectrormetry method
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食品安全国家标准 植物源性食品中208种农药及其代谢物残留量的测定 气相色谱-质谱联用法
1范围
本标准规定了植物源性食品中208种农药及其代谢物（参见附录A）残留量的气相色谱-质诺联用测定方法.
本标准适用于植物源性食品中208种农药及其代谢物残留量的测定.
2规范性引用文件
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3原理
试样用乙請提取，提取液经固相萃取或分散固相萃取净化，植物油试样经凝胶渗透色谱净化，气相色谱-质谱联用仪检测，内标法或外标法定量.
4试剂和材料
除非另有说明，在分析中仅使用分析纯的试剂，水为GB/T6682规定的一级水.
4.1试剂
4.1.1乙晴（CH CN CAS号：75-05-8).4.1.3甲苯（C;H，CAS号；108-88-3）：色谱纯.4.1.5氯化钠（NaC1.CAS号：7647-14-5）. 4.1.4环己烷（CH，CAS号：110-82-7）：色谱纯.4.1.6醋酸钠（CHCOONa CAS号；6131-90-4).4. 1. 7腊酸(CH COOH，CAS号：55896-93-0).4.1.8硫酸镁（MgSO.CAS号：7487-88-9）4.1.9柠橡酸钠（Na C H;O;，CAS号：6132-04-3)4.1.10柠檬酸氢二钠（CHNaO，CAS号：6132-05-4）.
4.2.1乙睛-酯酸溶液（991.体积比）：量取10mL醋酸加人990ml乙晴中，混匀. 4.2.2乙晴-甲苯溶液（31.体积比）：量取100mL甲苯加人300mL乙晴中，混匀.4.2.3GPC流动相：环已烷-乙酸乙酯溶液（11.体积比）：量取500mL环己烷加人500mL乙酸乙酯中，混匀.
GB 23200.113-2018
4.3标准品
环氧七氯B内标和208种农药及其代谢物标准品，参见附录A，纯度≥95%.
4.4标准溶液配制
4.4.1标准储备溶液（1000mg/L)：准确称取10mg（精确至0.1mg）各农药标准品.根据标准品的溶 解性和测定的需要选丙酮或正已烷等溶剂溶解并定容至10mL，避光一18℃保存，有效期1年.4.4.2混合标准溶液（混合标准溶液A和B)：按照农药的性质和保留时间，将208种农药及其代谢物分成A、B两个组，吸取一定量的农药标准储备溶液于250mL容量瓶中，用乙酸乙酯定容至刻度，混合标准溶液避光0C～4C保存，有效期1个月.4.4.3内标溶液：准确称取10mg环氧七氯B（精确至0.1mg）用乙酸乙酯溶解后转移至10mL容量瓶4.4.4基质混合标准工作溶液：空白基质溶液氮气吹干，加人20uL内标溶液，加人1mL相应质量浓 中，定容混匀为内标储备液.内标储备溶液用乙酸乙酯稀释至5mg/L为内标溶液.度的混合标准溶液复溶，过微孔滤膜（4.5.6）.基质混合标准工作溶液应现用现配.注：空白基质溶液取样量应与相应的试样处理取样量一致.
4.5材料
4.5.1固相萃取柱：石墨化炭黑-氨基复合柱，500mg/500mg，容积6mL. 4.5.2乙二胺-N-丙基硅烷化硅胶（PSA）:40μm~60μm.4.5.3十八烷基硅烷键合硅胶（C）：40μm~60μm，4.5. 4石墨化炭黑（GCB)：40μm~120μm4.5.5陶瓷均质子：2cm（长）×1cm（外径）.4.5.6微孔滤膜（有机相）：13mm×0.22μm.
5仪器
5.1气相色谱-三重四极杆质谱联用仪：配有电子轰击源（EI）.5.2凝胶渗透色谱仪或装置：配有25mm（内径）×500mm，内装Bio-BeadsSX-3填料或相当的净化柱.5.3分析天平：感量0.1mg和0.01g.5.4高速匀浆机：转速不低于15000r/min.5.5离心机：转速不低于4200r/min. 5.6组织热碎机.5.7旋转蒸发仪，5.8氮吹仪：可控温.5.9涡旋振荡器.
6试样制备
6.1试样制备
蔬莱和水果的取样量按照相关标准的规定执行，食用菌样品随机取样1kg.样品取样部位按照GB2763的规定执行.对于个体较小的样品，取样后全部处理；对于个体较大的基本均匀样品，可在对称轴或对称面上分制或切成小块后处理：对于细长、扁平或组分含量在各部分有差异的样品，可在不同部位捣碎成匀浆，放人聚乙烯瓶中. 切取小片或截成小段后处理；取后的样品将其切碎，充分混匀，用四分法取样或直接放人组织捣碎机中
取谷类样品500g，粉碎后使其全部可通过425μm的标准网筛，放人聚乙烯瓶或袋中.取油料作2
物、茶叶、坚果和香辛料各500g，粉碎后充分混匀，放人聚乙烯瓶或袋中.
植物油类搅拌均匀，放入聚乙烯瓶中.
6.2试样储存
将试样按照测试和备用分别存放，于一18℃条件下保存.
7分析步骤
7.1QuEChERS 前处理
7.1.1蔬菜、水果和食用菌
1g柠檬酸钠、0.5g柠檬酸氢二钠及1颗陶瓷均质子，盖上离心管盖，剧烈振荡1min后4200r/min离 称取10g试样（精确至0.01g）于50mL塑料离心管中，加人10mL乙晴、4g硫酸镁、1g氯化钠、心5 min.吸取6mL上清液加到内含 900 mg 硫酸镁及150mg PSA的15 mL塑料离心管中;对于颜色较深的试样，15mL塑料离心管中加人885mg硫酸镁、150mgPSA及15mgGCB，涡旋混匀1min.4 200r/min离心5min，准确吸取2mL上清液于10mL试管中，40°℃水浴中氮气吹至近干.加人20L的内标溶液，加人1ml.乙酸乙酯复溶，过微孔滤膜（4.5.6），用于测定.
7.1.2谷物、油料和坚果
称取5g试样（精确至0.01g）于50mL塑料离心管中，加10mL水涡族混匀，静置30min，加人15mL乙晴-醋酸溶液（4.2.1）、6g无水硫酸镁、1.5g醋酸钠及1颗陶瓷均质子，盖上离心管盖，剧烈振荡 1 min后 4 200 r/min 离心5 min.吸取 8mL上清液加到内含1 200 mg 硫酸镁、400 mg PSA及10ml.试管中，40℃水浴中氮气吹至近干，加人20xL的内标溶液，加人1mL乙酸乙酯复溶，过微孔滤 400mgC的15mL塑料离心管中，涡旋混匀1min.4200r/min离心5min.准确吸取2mL上清液于膜（4.5.6），用于测定.
7.1.3茶叶和香辛料
称取2g试样（精确至0.01g）于50mL塑料离心管中，加10mL水涡旋混匀，静置30min.加人荡 1 min后 4 200 r/min 离心5 min.吸取 8 mL上清液加到内含 1 200 mg 硫酸镁、400 mg PSA、400 mg 15 mL乙晴-醋酸溶液（4.2.1)、6g无水硫酸镁、1.5g醋酸钠及1颗陶瓷均质子，盖上离心管盖，剧烈振C及 200 mg GCB的15 mL 塑料离心管中，涡旋混匀 1 min.4 200 r/min离心 5 min，准确吸取 2 mL 上清液于10mL试管中，40C水浴中氮气吹至近干.加人20gL的内标溶液，加人1mL乙酸乙酯复溶，过微孔滤膜（4.5.6）.用于测定.
注：上述处理中净化前的上清液吸取量可根据需要调整-净化材料（无水硫酸镁、PSA、C、GCB）用量按比例增减.
7.2固相萃取前处理
7.2.1提取
7.2.1.1蔬菜、水果和食用菌
称取20g试样（精确至0.01g）于100mL塑料离心管中，加人40mL乙晴，用高速匀浆机15000r/min匀浆2min.加入5g~7g氯化钠剧烈振荡数次，4200r/min离心5min.准确吸取10mL上清液 于100mL茄型瓶中.40C水浴旋转蒸发至1mL左右，氮气吹至近干，待净化.
7.2.1.2谷物、油料、坚果、茶叶和香辛料
称取5g试样（精确至0.01g）于100mL塑料离心管中，加10mL水涡旋混匀，静置30min.加人20mL乙晴，用高速匀浆机15000r/min匀浆2min，加人5g~7g氯化钠剧烈振荡数次，4200r/min离心5min，准确吸取5mL上清液于100mL茄型瓶中，40C水溶旋转蒸发至1mL左右，氮气吹至近干，待净化.
7.2.2净化
用5mL乙晴-甲苯溶液（4.2.2）预洗固相萃取柱（4.5.1），弃去流出液.下接150mL鸡心瓶放人
固定架上.将上述待净化试样用3mL乙晴-甲苯溶液（4.2.2）洗涤至固相萃取柱中，再用2mL乙晴-甲苯溶液（4.2.2）洗涤，并将洗涤液移人柱中，重复2次.在柱上加上50mL储液器，用25mL乙晴-甲苯溶液淋洗小柱，收集上述流出液于150mL鸡心瓶中，40C水浴中旋转浓缩至近干，加人50gL内标溶液，加人2.5mL乙酸乙酯复溶，过微孔滤膜（4.5.6）.用于测定.
7.3GPC前处理
称取1g食用油试样（精确至0.01g）于10mL样品瓶中-加人GPC流动相（4.2.3）7mL混匀，将试样溶液置于GPC仪上净化，上样体积为5mL，流速为5mL/min，收集1000s~2700s时间段的洗脱液.将流出液浓缩至5mL，准确吸取4mL于10mL玻璃离心管中，40℃水浴中氮气吹至近干.加人20L的内标溶液，加人1mL乙酸乙酯复溶，过微孔滤膜（4.5.6），用于测定.
7.4测定
7.4.1仪器参考条件
a）色谱柱：14%晴丙基苯基-86%二甲基聚硅氧烷石英毛细管柱；30m×0.25mm×0.25μm，或相当者；b）色谱柱温度：40℃保持1min.然后以40℃/min程序升温至120℃，再以5C/min升温至 240℃，再以12℃/min升温至300℃，保持6min；c）载气：氮气，纯度≥99.999%，流速1.0mL/min；d）进样口温度：280℃；e）进样量：1μL；g）电子轰击源：70eV； f）进样方式：不分流进样；h）离子源温度：280℃：i）传输线温度：280°℃；j）溶剂延迟：3min； k）多反应监测：每种农药分别选择一对定量离子、一对定性离子.每组需要检测离子对按照出峰顺序，分时段分别检测.每种农药的保留时间、定量离子对、定性离子对和碰撞电压，参见附录B.
7.4.2标准工作曲线
mg/L、0.1mg/L和0.5mg/L的标准工作溶液.空白基质溶液氮气吹干.加人20μL内标溶液，分别加 精确吸取一定量的混合标准溶液，逐级用乙酸乙酯释成质量浓度为0.005mg/L、0.01mg/L、0.05人1mL上述标准工作溶液复溶，过微孔滤膜（4.5.6）配制成系列基质混合标准工作溶液，供气相色谱-质谱联用仪测定.以农药定量离子峰面积和内标物定量离子峰面积的比值为纵坐标、农药标准溶液质量浓度和内标物质量浓度的比值为横坐标，绘制标准曲线，
7.4.3定性及定量
7.4.3.1保留时间
被测试样中目标农药色谱峰的保留时间与相应标准色谱峰的保留时间相比较，相对误差应在±2.5%之内.
7.4.3.2定量离子、定性离子及子离子丰度比
在相同实验条件下进行样品测定时，如果检出的色谱峰的保留时间与标准样品相一致，并且在扣除背景后的样品质谱图中，目标化合物的质谱定量和定性离子均出现，而且同一检测批次，对同一化合物， 样品中目标化合物的定性离子和定量离子的相对丰度比与质量浓度相当的基质标准溶液相比，其允许偏差不超过表1规定的范围，则可判断样品中存在目标农药.
