GB
中华人民共和国国家标准
GB 23200.3-2016代替SN/T1737.3-2010
食品安全国家标准 除草剂残留量检测方法 第3部分：液相色谱-质谱/质谱法测定 食品中环己烯酮类除草剂残留量
National food safety standards-
Determination of cyclohexanediones herbicide residues in foods
Liquid chromatography - mass spectrometry
中华人民共和国国家卫生和计划生育委员会 中华人民共和国农业部 国家食品药品监督管理总局
发布
前言
出口食品中环己烯酮类除草剂残留量》. 本标准代替SN/T1737.3-2010《除草剂残留量检验方法第3部分：液相色谱-质谱/质谱法测定进
本标准与SN/T1737.3-2010相比，主要变化如下：一标准文本格式修改为食品安全国家标准文本格式：一标准名称中“进出口食品”改为“食品”：本标准所代替标准的历次版本发布情况为： 一标准范围中增加“其它食品可参照执行”.SN/T 1737. 32010.
食品安全国家标准
除草剂残留量检测方法
第3部分：液相色谱-质谱/质谱法测定食品中环已酮类除 草剂残留量
1范围
本标准规定了食品中吡喃草酮、禾草灭、噻草酮、烯草酮、烯禾啶、丁苯草酮、三甲苯草酮、环苯草酮残留量的液相色谱一质谱/质谱测定方法.
本标准适用于大米、大豆、猪肉、牛肝、鸡肝、牛奶、橙子、蓝莓、菠菜、洋葱、核桃仁、茶叶中吡哺草酮、禾草灭、噻草酮、烯草酮、烯禾啶烯禾啶、丁苯草酮、三甲苯草酮、环苯草酮残留量的测定和确证，其它食品可参照执行.
2规范性引用文件
件.凡是不注日期的引用文件，其最新版本（包括的修改单）适用于本文件. 下列文件对于本文件的应用是必不可少的.凡是注日期的引用文件，仅所注日期的版本适用于本文
GB2763食品安全国家标准食品中农药最大残留限量
GB/T6682分析实验室用水规格和试验方法
3原理
基硅烷（ODS）和石墨化炭黑净化，用液相色谱-质谱/质谱仪检测和确证，外标法定量. 试样中残留的环已烯酮类除草剂用酸性乙晴或乙腊提取，提取液经N-丙基乙二胺（PSA）、十八烷
4试剂和材料
除另有规定外，试剂均为分析纯，水为符合GB/T6682中规定的一级水.
4.1试剂
4.1.1乙晴（CHCN）：色谱纯.4.1.3甲酸（HCOOH）（88.0%）， 4.1.2乙酸（CH;COOH）（99.5%）.4.1.4乙酸钠（CHCOONa）.4.1.6无水硫酸镁（MgSOg）：经650C灼烧4h，置于干燥器内备用. 4.1.5氯化钠（NaCI）.
4.2溶液配制
4.2.11%乙酸乙腊溶液：取10mL乙酸，加入990mL乙腊，混匀. 4.2.260%乙晴水溶液：取60mL乙晴，加入40mL水，混匀.4.2.3甲酸-水溶液（0.2999.8，V/V：取0.2mL甲酸，用水溶解并稀释至1000mlL.
4.3标准品
4.3.1环已烯酮类标准品：烯草酮（Clethodim），CAS:99129-21-2 纯度≥99%：毗喃草酮（Tepraloxydim）CAS：149979-41-9 纯度≥99%：噻草酮（Cycloxydim），CAS：101205-02-1，纯度55634-91-8，纯度≥98%；环苯草酮（Profoxydim），CAS：139001-49-3，纯度≥98.5%：丁苯草酮 ≥93.5%：三甲苯草酮（Tralkoxydim） CAS：87820-88-0 纯度≥93.5%：禾草灭（A11oxydim） CAS：（Butroxydim） CAS：138164-12-2：纯度≥99%：烯禾啶（Sethoxydim)CAS：74051-80-2：纯度≥99%.
4.4标准溶液配制
4.4.1环已烯酮类标准储备溶液：准确称取适量环已烯酮类的标准品，用乙晴溶解并定容至100ml棕色容量瓶中，得浓度为100ug/mL的标准储备溶液，此溶液避光储存.
GB 23200.32016
4.4.2混合标准中间溶液：准确吸取环已烯酮类的标准储备溶液各2.5mL于50mL棕色容量瓶中，用乙睛稀释成浓度为5.0μg/mL的混合标准中间溶液，此溶液避光储存.
4.4.3混合标准工作溶液：根据需要使用前用空白样品基质配制适当混合标准工作溶液.
4.5材料
4.5.1石墨化炭黑吸附剂：120μm~400μm. 4.5.2N-丙基乙二胺（PSA）吸附剂：40μm~100μm.4.5.3十八烷基硅烷（0DS）键合相：40μm~100μme4.5.4水相滤膜：0.22μm.
5仪器和设备
5.2电子天平：感量0.01g和0.0001g. 5.1液相色谱一质谱/质谱联用仪：配ESI电离源.5.3粉碎机.5.4组织捣碎机.5.6旋涡混合器. 5.5离心机：4000r/min.5.8均质器：10000r/min. 5.7氮吹仪.5.9螺旋盖聚丙烯离心管：50mL、15ml.5.10玻璃具塞离心管：15mL.
6试样制备与保存
6.1试样制备
6.1.1橙子、蓝莓、菠菜、洋葱
取有代表性样品约500g（不可用水洗涤），将其切碎后，用组织搞碎机将样品加工成浆状，装入洁净容器作为试样，密封并标明标记.
6.1.2大豆、大米、茶叶、核桃仁
取有代表性样品约500g，用粉碎机粉碎，混匀，装入洁净容器作为试样，密封并标明标记.
6.1.3猪肉、牛肝、鸡肝
取有代表性样品约500g，切碎后，用组织搞碎机将充分搞碎均匀，装入洁净容器作为试样，密封并标明标记.注：以上样品取样部位按GB2763附录A执行.
6.2试样保存
大豆、大米、茶叶、核桃仁和牛奶等试样于0℃～4C保存：橙子、蓝莓、菠菜、洋葱、猪肉、牛肝、鸡肝等试样于-18℃以下保存.
在制样的操作过程中，应防止样品污染或发生残留物含量的变化.
7分析步骤
7.1提取
7.1.1大豆、大米、茶叶和核桃仁
称取试样5g（茶叶试样2g，精确到0.01g）于50ml螺旋盖聚丙烯离心管中，加入10mL水，于旋涡混合器上混合30s，放置15min.加入3g无水硫酸镁、1g氯化钠、1g乙酸钠和15mL1%乙酸乙晴溶液， 用均质器以10000r/min均质2min，4000r/min离心5min.将上清液转移至25mL容量瓶中.再用10mL1%乙酸乙晴溶液重复提取一次，合并提取液于同一25mL容量瓶中，并用乙定容至刻度，待净化.
7.1.2猪肉、牛肝、鸡肝、牛奶、橙子、菠菜和洋葱
称取试样约5g（精确到0.01g）于50mL螺旋盖聚丙烯离心管中，加入5mL水、3g无水硫酸镁、1g氯化钠、1g乙酸钠和15mL1%乙酸乙溶液，用均质器以10000r/min均质2min，4000r/min离心5min.将上清液转移至25mlL容量瓶中.再用10mlL1%乙酸乙溶液重复提取一次.合并提取液于同一25m 容量瓶中，并用乙晴定容至刻度，待净化.
7.1.3蓝莓
称取试样约5g（精确到0.01g）于50mL螺旋盖聚丙烯离心管中，加入5mL水、3g无水硫酸镁、1g氯化钠、1g乙酸钠和15mL乙晴，用均质器以10000r/min均质2min，4000r/min离心5min.将上 清液转移至25mL容量瓶中.再用10mL乙腊重复提取一次，合并提取液于同一25mL容量瓶中，并用乙晴定容至刻度，待净化.
7.2净化
7.2.1大豆、大米、核桃仁、猪肉、牛肝、牛奶、洋葱
移取8mL上述提取液于15mlL螺旋盖聚丙烯离心管中，加入300mg无水硫酸镁、250mgPSA和500mgODS，在旋涡混合器上混合2min，4000r/min离心5min.准确移取5ml净化液于15mL玻璃具塞离心管中，经60℃氮吹仪吹干后，用60%乙晴水溶液溶解并定容1.0mL，过0.22Hm滤膜供液相色谱一质谱/质谱仪测定.
7.2.2鸡肝、橙子、菠菜、蓝莓、茶叶
和10mg石墨化炭黑，在旋涡混合器上混合2min，4000r/min离心5min.准确移取5mL净化液于15mL 移取8mL上述提取液于15mlL螺旋盖聚丙烯离心管中，加入300mg无水硫酸镁、250mgPSA、500mg0DS玻璃具塞离心管中，经60℃氮吹仪吹干后，用60%乙晴水溶液溶解并定容1.0ml，过0.22μ滤膜供液相色谱一质谱/质谱仪测定.
7.3测定
7.3.1液相色谱参考条件
7.3.1.1色谱柱：Cs50mm×2.1mm（i.d.），粒度1.7um，或相当者：7.3.1.2流动相：见梯度洗脱程序表1：
表1梯度洗脱程序表
时间（nin） 甲酸水溶液（3.9）.% 乙睛，%0. 25 60 401. 50 1. 60 60 40 40 602. 00 40 603. 00 4.50 20 20 80 805. 00 60 406 00 60 40
7.3. 1.3流速：0.25ml/min:7.3.1.4柱温：30℃;7.3.1.5进样量：5μ：
7.3.2质谱参考条件
参见附录A.
7.3.3液相色谱一质谱/质谱检测和确证
烯酮类响应值均应在仪器检测线性范围内.对标准工作溶液和样液等体积参插进样测定.在上述液相色 根据样液中被测物的含量情况，选定浓度与样液相近的标准工作溶液.标准工作溶液和样液中环已谱一质谱条件下，环已烯酮类的保留时间分别为吡喃草酮2.83min，禾草灭3.40min，噻草酮3.81min， 烯草酮3.89min，烯禾啶4.05min 丁苯草酮4.08min，三甲苯草酮4.17min，环苯草酮4.83min.环已烯酮类标准品的液相色谱一质谱/质谱多反应监测色谱图见附录B中图B.1.
土2.5%，且样品中被测物质的相对离子丰度与浓度相当标准工作溶液的相对离子丰度进行比较，相对丰 在上述液相色谱-质谱条件下，样品中待测物质保留时间与标准工作溶中对应的保留时间的偏差在度允许相对偏差不超过表2规定的范围，则可确定样品中存在对应的被测物.
表2定性确证时相对离子丰度的最大允许偏差
相对丰度（基峰） 允许的相对偏差 >50 % ±20 % >20 %至 50 % ±25 % >10%至20% ±30 % ≤10% %0S干
7.4空白试验
除不加试样外，均按上述步骤进行.
