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中华人民共和国国家标准
GB 23200.52-2016代替SN/T2235-2008
食品安全国家标准
National food safety standards-
Determination of cyprodinil residue in foods
Gas chromatography-mass spectrometry
中华人民共和国国家卫生和计划生育委员会 中华人民共和国农业部 国家食品药品监督管理总局
发布
前言
本标准与SN/T2235-2008相比，主要变化如下：一标准文本格式修改为食品安全国家标准文本格式：一标准范围中增加“其它食品可参照执行”. 本标准所代替标准的历次版本发布情况为：-SN/T .
食品安全国家标准
食品中嘧菌环胺残留量的测定气相色谱-质谱法
1范围
本标准规定了食品中嘧菌环胺残留量的气相色谱-质谱检测及确证方法. 本标准适用于大米、大豆、小菘菜、甜豌豆、梨、柑桔、花生、茶叶、牛肉、鸡肉、虾肉、蜂蜜中嘧菌环胺残留量的检测和确证，其它食品可参照执行.
2规范性引用文件
下列文件对于本文件的应用是必不可少的.凡是注日期的引用文件，仅所注日期的版本适用于本文件.凡是不注日期的引用文件，其最新版本（包括的修改单）适用于本文件.
GB2763食品安全国家标准食品中农药最大残留限量
GB/T6682分析实验室用水规格和试验方法
3原理
试样中残留的嘧菌环胺经正已烷-丙酮（11，体积比）提取，用凝胶渗透色谱柱和丙磺酰基甲硅烷基硅胶阳离子交换柱净化，气相色谱-质谱检测和确证，外标法定量.
4试剂和材料
除另有规定外，试剂均为分析纯，水为符合GB/T6682中规定的一级水.
4.1试剂
4.1.1正已烷（CgHμ）：色谱纯.4.1.3环已烷（CgH）：色谱纯. 4.1.2丙酮（CHO）：色谱纯.4.1.4乙酸乙酯（CHgO）：色谱纯.4.1.5甲醇（CHOH）：色谱纯. 4.1.5氨水（NHHO）：分析纯.4.1.7盐酸（HC1）：分析纯.4.1.9无水硫酸钠（NaSOg）：分析纯，650C灼烧4h，在干燥器内冷却至室温，贮于密封瓶中备用. 4.1.8氯化钠（NaC1）：分析纯.
4.2溶液配制
4.3标准品
4.3.1嘧菌环胺（Cyprodinil）标准物质：纯度>99%，分子式：CHisN，分子量：225.3CAS 登记号：121552-61-2.
4.4标准溶液配制
4.4.1嘧菌环胺标准溶液：准确称取适量的嘧菌环胺标准物质，用丙酮配成浓度为100ug/mlL的标准储备液.根据需要用丙酮稀释至适当浓度的标准工作液.标准储备液在0C～4C冰箱中保存，有效期为12个月，标准工作液在0℃～4C冰箱中保存，有效期为6个月.
4.5材料
4.5.1丙磺酰基甲硅烷基硅胶阳离子交换柱：3ml，500g或相当者.
5仪器和设备
5.1气相色谱-质谱仪：配有电子轰击源（EI）.5.2分析天平：感量0.01g和0.0001g. 5.3离心机：转速大于5000r/min5.4氮吹仪.5.5旋转蒸发器.
5.6均质器.5.7固相萃取装置. 5.8多功能食品搅拌机.5.9粉碎机.5.10凝胶渗透色谱仪. 5.11旋涡混合器.
6试样制备与保存
6.1试样制备
6.1.1茶叶、粮谷类
取代表性样品约500g，经粉碎机粉碎并通过2.0mm圆孔筛，混匀，装入洁净容器内密封，标明
6.1.2蔬菜、水果及坚果类
取代表性样品约500g，切碎，经多功能食品搅拌机充分搞碎均匀，装入洁净容器内密封，标明标记.
6.1.3畜、禽、水产品类
标记. 取代表性样品约500g，切碎后，用多功能食品搅拌机充分捣碎均匀，装入洁净容器内密封，标明
6.1.4蜂产品类
取代表性样品约500g，未结晶的样品将其用力搅拌均匀，有结晶析出的样品可将样品瓶盖塞紧后，置于不超过60℃的水浴中温热，等样品全部融化后搅匀，迅速冷却至室温.在融化时必须注意防止水 分挥发.装入洁净容器内密封，并标明标记.
注：以上样品取样部位按GB2763附录A执行.
6.2试样保存
茶叶、粮谷、蜂产品、坚果类等试样于4C以下保存：蔬菜、水果、畜、禽、水产品类等试样于-18℃以下保存.在制样过程中，应防止样品受到污染或发生嘧菌环胺残留量的变化.
7分析步骤
7.1提取
7.1.1虾肉
称取20g（精确至0.01g）试样，加入10mL水混匀，加入30mL正已烷-丙酮（11，体积比）混合溶液，以10000r/min均质0.5min，加入5g氯化钠，摇匀，并于4000r/min离心3min.吸取上层有机相于浓缩瓶中，残渣中加入30mlL正已烷-丙酮（11，体积比）混合溶液，重复提取一次，合并上层 有机相，在45℃水浴中减压浓缩至近干.准确加入10.0mL环己烷-乙酸乙酯（1十1，体积比）溶解残渣，供凝胶色谱净化.
7.1.2蜂蜜
称取20g（精确至0.01g）试样，加入20mL水混匀，加入30mL正已烷-丙酮（11，体积比）涡旋混匀1min，加入5g氯化钠，摇匀，并于4000r/min离心3min.吸取上层有机相于浓缩瓶中，残渣减压浓缩至近干.准确加入10.0ml环已烷-乙酸乙酯（11，体积比）溶解残渣，供凝胶色谱净化. 中加入30mL正已烷-丙酮（11，体积比）混合溶液，重复提取一次，合并上层有机相，在45C水浴中
7.1.3大米、大豆、花生、茶叶、小菘菜、甜豌豆、梨、柑桔、牛肉、鸡肉
加入15mL正已烷-丙酮（11，体积比）混合溶液，以10000r/min均质0.5min，加入5g氯化钠，摇 称取5g（茶叶称取2g）（精确至0.01g）试样，加入5mL水混匀（茶叶、大米和花生需放置0.5h），匀，并于4000r/min离心3min.吸取上层有机相于浓缩瓶中，残渣中加入15mlL正已烷-丙酮（11，体积比）混合溶液，重复提取一次，合并上层有机相，在45C水浴中减压浓缩至近干.准确加入10.0ml 环已烷-乙酸乙酯（1十1，体积比）溶解残渣，供凝胶色谱净化.
7.2净化
7.2.1凝胶色谱净化
7.2.1.1凝胶色谱净化条件
a)凝胶净化柱：400mmx25mm（id）：填料：Bio-Beads，S-X3，38μm~75μm，或相当者（在使用前需先做淋洗曲线）.
b）流动相：环已烷-乙酸乙酯（11，体积比）：d）样品定量环：5ml：e）收集时间：20min~25min.
c)流速：5.0ml./min;
7.2.1.2凝胶色谱净化步骤
将提取液转移到离心管中，4000r/min离心3min，将上清液转移到凝胶渗透色谱仪的样品瓶中，按7.2.1.1条件净化，将收集液在45C以下水浴减压浓缩至近干，加入5mL甲醇溶解后，加入5mL 水混匀.
7.2.2丙磺酰基甲硅烷基硅胶阳离子交换柱净化
再加入5mL0.1moL/L盐酸溶液，弃去流出液.加入7.2.1所得溶液，加入10mL甲醇-水（11，体积 将丙磺酰基甲硅烷基硅胶阳离子交换柱安装在固相萃取装置上，加入5mL甲醇，弃去流出液，比），弃去流出液，抽真空至尽干，再加入10mL氨水-甲醇（595，体积比），收集10mL流出液.在45C水浴中减压浓缩至近干.准确加入0.5mL丙酮溶解残渣并定容，供GC-MS检测.
7.3测定
7.3.1气相色谱-质谱参考条件
a) 色谱柱：DB-5ms石英毛细管柱，30m×0.25mm（i.d）×0.25um（膜厚），或相当者. 色谱柱温度：50℃（1min）20C/minb) c) 进样口温度：250℃. 300 (10 min ).d) 接口温度：280℃.e) f) 进样量：2L. 载气：氨气，纯度大于等于99.999%.流速：1.0ml/min.g） 进样方式：脉冲不分流进样，脉冲压力25psi，延时0.75min，0.75min后开阔.i）电离能量：70eV. h）离子源：电子轰击源（EI）.j）溶剂延迟时间：8min.k）检测方式：选择离子监测方式. 1）选择离子及相对丰度：见表1
表1选择离子和相对丰度
(m/2) 选择离子224（定量） 225 226 210相对丰度(%） 100 61.7 9.0 11.3
7.3.2定量测定
根据样液中嘧菌环胺含量的情况，选定峰面积相近的标准工作溶液.标准工作溶液和样液中嘧菌环胺响应值应在仪器检测的线性范围内.标准工作溶液和样液等体积穿插进样检测.在上述色谱条件下，嘧菌环胺的保留时间约为10.5mim，标准品的总离子流色谱图参见附录A中图A.1.
7.3.3定性测定
对标准溶液及样液均按7.3.1规定的条件进行检察，如果样液与标准溶液在相同的保留时间有峰出现，则对其进行质谱确证，在扣除背景后的样品谱图中，所选择离子全部出现，同时所选择的离子的离定样品中存在嘧菌环胺.被确证的样品可判定为嘧菌环胺阳性检出.嘧菌环胺标准品的质谱图参见附录 子丰度比与标准品相关离子的相对丰度一致，波动范围符合表2的最大容许偏差之内（见表2），可判A中图A.2.
表2质谱相对离子丰度最大容许偏差
相对丰度（基峰） % 05 >20 %至 50 % >10 %至 20 % ≤10 %允许的相对偏差 ±20 % ±25 % ±30 % ±50 %
7.3.4空白试验
除不加试样外，均按上述检测步骤进行.
