中华人民共和国出入境检验检疫行业标准
SN/T4451-2016
Determination of migration of N-Nitrosamines in child feeding nipplesGC-MS
国家质量监督检验检疫总局 中华人民共和国 发布
前言
本标准按照GB/T1.1一2009给出的规则起草.
本标准起草单位：中华人民共和国陕西出入境检验检疫局、中华人民共和国上海出人境检验检疫局、中华人民共和国莆田出入境检验检疫局.
本标准主要起草人：蔡砚、孔祥虹、卫碧文、杨荣静、何强、童玉贵，
婴儿奶嘴中迁移的N-亚硝胺含量测定 方法气相色谱-质谱法
1范围
本标准规定了要儿奶嘴中迁移的N-亚硝胺的气相色谱-质谱测定方法.
2规范性引用文件
下列文件对于本文件的应用是必不可少的.凡是注日期的引用文件，仅注日期的版本适用于本文件.凡是不注日期的引用文件，其最新版本（包括的修改单）适用于本文件.
GB/T6682分析实验室用水规格和武验方法
3方法提要
谱测定，外标法定量. 将试样用人工睡液浸泡，N-亚硝腰迁移到人工睡液中，经固相萃取柱净化.气相色谱-正化学源质
4试剂和材料
除非另有说明，所用试剂均为分析纯.水为GB/T6682
4.4氢氧化钠.
4.5碳酸氢钠.
4.6氧化钠.
4.7碳酸钾.
4.8亚硝酸钠.
4.9无水硫酸钠：650C灼烧4h，储于密封容器中备用.
4.100.1mol/L盐酸溶液：取2.0ml盐酸（4.3）加水稀释至250ml.
4.110.1mol/L.氢氧化钠溶液：称取1.0g氢氧化钠（4.4）加水稀释至250ml.
4.121mol/L氢氧化钠溶液：称取4.0g氢氧化钠（4.4）加水稀释至100ml.
4.1312种N-亚硝胺标准品：纯度均不低于97%（见附录A）.
4.14N-亚硝胺标准储备液：分别称取（精确至0.0001g）适量的N-亚硝胺标准品，用二氯甲烷配制成 浓度为100mg/L的标准储备液，在-18C避光密封保存，有效期6个月.
4.15标准工作溶液：根据需要将12种N-亚硝胺标准储备液用二氯甲烷稀释至适当的混合标准工作溶液，在0℃~4C避光密封保存，有效期3个月.
4.16人工唾液的制备：分别称取4.2g碳酸氢钠（4.5），0.5g氧化钠（4.6）.0.2g碳酸钾（4.7）和30mg
SN/T 4451-2016
1000ml.有效期2周. 亚硝酸钠（4.8）加水稀释至900mL，用盐酸（4.10）或氢氧化钠溶液（4.11）调节pH到9.0，加水定容到4.17活性炭固相萃取柱：500mg.6mL.使用前用6ml二氧甲烷（4.1）、6mL甲醇（4.2）和10mL水依次以不大于3ml./min的流速通过活性炭固相萃取柱进行活化4.18干燥柱：在6ml针式过滤器底部填充适量玻璃棉，加人2.5g无水硫酸钠（4.9）.使用前用4mL
二氯甲烷（4.1）活化.
5仪器和设备
5.2分析天平：感量0.01g和感量0.0001g. 5.1气相色谱-质谱联用仪：配有化学源（C1）.5.3旋转蒸发仅.5.4恒温水浴锅.5.5固相萃取装置.
6分析步骤
6.1试样制备
用中性清洁剂洗净试样，用自来水冲洗干净，再用纯水冲洗三次，晾干备用.取不少于40g代表性试样.放人装有涉水的150ml.烧杯中（水量能浸没试样即可）保持沸腾10min后.用不锈钢摄子将试样取出，冷却至室温用剪刀纵向制开，晾干备用.
6.2提取
称取约10g（精确至0.001g）试样（6.1）于150mL棕色具塞锥形瓶中，加人40mL人工液（4.16），盖好瓶塞.将瓶放人（402）℃的恒温水搭锅中提取（240.5）h，期间不时振摇.然后将瓶中溶液倒入100mL棕色具塞梨形瓶中.分别用4mL人工液洗涤锥形瓶壁两次，合并洗涤液于梨形瓶 中.在梨形瓶中加入1.0mL氢氧化钠溶液（4.12），摇匀提取液，待净化.做两份试样的平行测定.
6.3净化
将提取液（6.2）以不大于3mL/min的流速经过活化好的固相萃取柱，弃去流出液，真空抽于30min，将固相萃取柱下端串联干燥柱（4.18），用10mL二氯甲烷洗脱，流速控制在1mL./min，洗脱并定容至1.0mL，待测. 液收集于50mL棕色梨形瓶中，于30C水浴中旋转蒸发至约5mL.用氮气吹至近干，用二氯甲烷溶解
6.4测定
6.4.1气相色谱-质请仪条件
下述气相色谱-质谱仪操作条件是典型操作参数，可根据不同仅器的特点，对操作参数做适当调整，以期获得最佳效果：
a）色谱柱：DB-WAX.30mX0.25mm（内径），膜厚0.25μm，或相当者：b）色谱柱温度：初始柱湿60°℃.保持1min.以8C/min升至140C，保持5min，以50C/min升至240C.保持10min；c）进样口温度：260℃；
d）离子源温度：150℃； e）接口温度：240℃；载气：氮气（纯度≥99.999%），流量1.0ml/min；g）进样量；1pl;h）进样方式：不分流进样，1min后打开分流阀；j）检测方式：选择离子监测（SIM）：监测离子参见附录B； i) 电离方式：正化学电离（PC1）；k）溶剂延迟：3.5min.
6.4.2气相色谱-质谱检测及确证
根据试样中被测物的含量情况，选定峰面积相近的标准工作溶液，按6.4.1相同条件下对标准工作溶液和试样溶液等体积参插进样，测定标准工作溶液和待测试样溶液中目标物的响应值均应在仪器检测的线性范围内.
如果试样溶液和标准工作溶液的选择离子色谱图在相同保留时间处（小于士0.5%）有色谱峰出现，并且在扣除背景后的样品质语图中所选择的离子均出现，而且所选择的离子丰度比与标准样品的离子 丰度比相一致（允许偏差见表1），则可定性确证目标分析物.12种N-亚硝胺的保留时间、定性离子和定量离子参见附录B，选择离子色谱图参见附录C
注：为得到准确的结果，建议在试样处理好后12h内进行分析.否则应将提取液在低于0C~4C避光保存，3d内测定.
表1质谱相对离子丰度最大允许偏差
相对离子丰度/% >50 >20~50 >10~20 10允许的相对编差/% ±20 ±25 ±30 ±50
空白试验
随同试样做空白.
8结果计算
按式（1）计算试样中每种N-亚硝胺的含量：
式中：
X. 试样中N-亚硝胺：的迁移量，单位为毫克每千克（mg/kg）：A. 试样溶液中N-亚硝胺i的峰面积：A 标准溶液中N-亚硝胺i的峰面积；B 标准工作溶液中N-亚硝胺i的浓度，单位为微克每毫升（pg/mL）； 空白实验中目标分析物的浓度，单位为微克每毫升（μg/mL）：v 试样溶液定容体积，单位为毫升（mL）；试样质量，单位为克（g）.
取两次测定结果的算术平均值，计算结果保留三位有效数字.
