中华人民共和国出入境检验检疫行业标准
SN/T 4891-2017
出口食品中螺虫乙酯残留量的测定 高效液相色谱和液相色谱-质谱/质谱法
Determination of Spirotetramatresidue in foodstuffs for export-HPLC andLC-MS/MSmethod
中华人民共和国 国家质量监督检验检疫总局 发布
前言
本标准按照GB/T1.1-2009给出的规则起草.
请注意本文件的某些内容可能涉及专利.本文件的发布机构不承担识别这些专利的责任.
本标准由国家认证认可监督管理委员会提出并归口.
本标准起草单位：中华人民共和国重庆出人境检验检疫局、中华人民共和国万州出入境检验检疫局.
本标准主要起草人：唐柏彬、夏明星、李光满、都存显、曹淑瑞、郑小玲、张雷、李贤良、王国民.
高效液相色谱和液相色谱-质谱/质谱法 出口食品中螺虫乙酯残留量的测定
1范围
本标准规定了出口食品中螺虫乙酯及其代谢物残留量的液相色谱-质谱/质谱测定方法和出口食品中螺虫乙酯残留量的高效液相色谱测定方法.
本标准液相色谱-质谱/质谱法适用于猪肉、猪肝、猪脂肪、牛奶、鸡蛋、蜂蜜、大豆、小麦、白菜、荔枝和葡萄干等出口食品中螺虫乙酯及其代谢物残留量的定量测定和确证：高效液相色谱法适用于大豆、小麦、白菜、荔枝和葡萄干等出口食品中螺虫乙酯残留量的定量测定.
2规范性引用文件
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GB/T6682分析实验室用水规格和试验方法
第一法液相色谱-质谱/质谱法（LC-MS/MS法）
3方法提要
法定量和确证. 试样用乙睛提取，提取液经浓缩，定容后用正已烷液液萃取净化，用油相色谱-质谱/质谱测定，外标
4试剂和材料
除另有规定外，所用试剂均为分析纯，水为符合GB/T6682规定的一级水.
4.6无水乙酸钠：分析纯.
4.750%乙腩：乙腊-水（5050.体积比）.
4.82mmol/1.乙酸铵（含0.1%甲酸）：称取0.154g乙酸铵（4.4），用950ml.水溶解，加人1.0mL甲酸（4.3）.用水稀释至1000mL
4.9标准品：螺虫乙酯及其4种代谢物，纯度均大于90%，化合物详细信息参见附录A中表A.1.
4.10混合标准储备液（100mg/L）：分别准确称取含螺虫乙酯及其代谢物5mg的标准品，用乙晴（4.1）溶解并定容至50mL.混匀.-18C以下避光保存.
4.11混合标准中间液（1.0μg/mL）：临用前取适量100mg/L混合标准储备液（4.10），用50%乙睛
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4.12混合标准工作液：临用前取适量1.0μg/mL标准中间液（4.11），用50%乙腊稀释至0.5ng/ml、 （4.7）稀释成1.0μg/mL.标准中间液4.13微孔滤膜：尼龙66或相当者，0.22μm.
5仪器和设备
5.1液相色谱-质谱/质谱仪：配电喷雾离子源（ESI）.5.2分析天平：感量为0.01g和0.1mg.5.4旋涡混合器，5.6组织搞碎机，5.7氮吹浓缩仅.5.8超声波清洗器.
5.3均质器，20000r/min.
5.5离心机：10000r/min.
6试样的制备与保存
6.1荔枝、白菜、猪肉、猪肝、鸡蛋
取有代表性样品约500g，荔枝去皮去核，猪肉、猪肝去脂肪，鸡蛋去壳后，用高速匀浆机绞碎，装人洁净容器，密闭并标明标记.于一18C保存.
6.2大豆、小麦
取整粒有代表性样品约500g，用高速粉碎机粉碎，装人洁净容器，密闭并标明标记，于阴凉干燥处保存.
6.3葡萄干
取有代表性样品约500g，加人等量水，密封浸泡过夜，用高速匀浆机绞碎，装人洁净容器，密闭并标明标记，于一18C保存.
6.4牛奶、蜂蜜
取有代表性样品约500mL，混合均匀，装入洁净容器，密闭并标明标记，于4C保存.
6.5猪脂肪
取有代表性样品约500g，加热熬制，弃去油渣，冷却后装入洁净容器，密闭并标明标记，于4C保存. 在制样操作过程中应防止样品受到污染或发生残留物含量的变化
7样品处理
7.1提取
7.1.1荔枝、白菜、葡萄干
准确称取10g（精确至0.01g，葡萄干样品相当于5g样品）样品，置于50mL离心管中.加人
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20ml乙睛（4.1），20000r/min均质提取3min，加人6.0g无水硫酸镁（4.5），1.0g无水乙酸钠（4.6）， 混匀，静置2min，7000r/min离心3min，将上清液转移至50mL比色管中.用20mL乙晴清洗均质器刀头，将清洗液转移至残渣中，并将残渣揭碎，置于超声波中超声提取30min（每隔10min取出振摇一次）.7000r/min离心3min，合并提取液至50mL比色管中并用乙腊定容至刻度，混匀后待净化.
7.1.2大豆、小麦
准确称取5g（精确至0.01g）样品，置于50mL离心管中.加人8mL水，混匀.静置30min，接下来按照7.1.1中加人20mL乙晴的步骤进行.
7.1.3鸡蛋、牛奶
取30min（每隔10min取出振摇一次），取出，接下来按照7.1.1中"加人6.0g无水硫酸镁."的步骤 准确称取10g（精确至0.01g）样品，置于50mL离心管中，加人20mL乙晴，置于超声波中超声提进行.
7.1.4蜂蜜
涡旅混合提取2min，7000r/min离心3min.将上清液转移至50mL比色管中，样品再用20mL乙睛 准确称取10g（精确至0.01g）样品，置于50mL离心管中，加人10mL水，混匀，加入20ml乙晴，涡旋提取一次，合并提取液至50mL比色管中并用乙請定容至刻度，混匀后待净化.
7.1.5猪脂肪
准确称取10g（精确至0.01g）样品，置于50mL离心管中，加人10mL正已烷（4.2），混匀，加人用20mL乙腊涡旋提取一次，合并提取液至50mL比色管中并用乙睛定容至刻度，混匀后待净化.
7.2净化
荔枝、白菜、鸡蛋、牛奶和蜂蜜样液移取5.00mL待净化液，葡萄干、大豆和小麦样液移取10.00mL待净化液于试管中，于40C水浴氮气吹干，加人1.00mL50%乙睛（4.7）溶解残渣，加人1mL正已烷， 涡旋混合30s.4000r/min离心3min，取下层溶液过微孔滤膜（4.13），用液相色谱-质谱/质谱仪测定.
7.3基质标准工作溶液的制备
取空白样品，按7.1和7.2操作至“于40C水浴氮气吹干".加人1.00mL标准工作液（4.12）溶解残渣”，加人1mL正己烷，涡旋混合30s，4000：/min离心3min，取下层溶液过微孔滤膜，用液相色谱-质 谱/质谱仅测定.
7.4测定
7.4.1液相色谱-质谱/质谱条件
液相色谱-质谱/质谱条件如下：
b）流动相：乙睛（A）-2mmol/L乙酸铵（含0.1%甲酸）（4.8），梯度洗脱程序见表1； a）色谱柱：C柱，100mm（柱长）×2.1mm（内径）.粒度1.7gm，或相当者：c）流速：0.3mL/min;d）柱温：40℃；e）进样量：5pL；
