中华人民共和国国家标准
GB/T46387-2025
硫酸软骨素酶活力的测定
Determination of the activity of chondroitinase
国家市场监督管理总局 国家标准化管理委员会 发布
emc
前言
本文件按照GB/T1.1一2020《标准化工作导则第1部分：标准化文件的结构和起草规则》的规定起草.
请注意本文件的某些内容可能涉及专利.本文件的发布机构不承担识别专利的责任.
本文件由全国生化检测标准化技术委员会（SAC/TC387）提出并归口.
本文件起草单位：清华大学、河北省食品检验研究院、中国测试技术研究院、清华大学深圳国际研究生院、北京衍微科技有限公司、苏州世谱检测技术有限公司、清华大学北京清华长庚医院、苏州大学、深圳市第二人民医院、中国生化制药工业协会、中国生物发酵产业协会、中国计量测试学会.
顾大勇、王旭、李卫峰、张真庆、徐冰、杨扬仲夫、胡文言、周斌、王晋、王洁. 本文件主要起草人：王怡、邢新会、张岩、周李华、张办、张微微、苏楠、王苗苗、卢剑、杜岩、蒋绚、
硫酸软骨素酶活力的测定
1范围
本文件描述了测定硫酸软骨素酶活力的分光光度法.本文件适用于生化试剂硫酸软骨素酶AC和硫酸软骨素酶B活力的测定.
2规范性引用文件
下列文件中的内容通过文中的规范性引用而构成本文件必不可少的条款.其中，注日期的引用文本文件.
GB/T6682分析实验室用水规格和试验方法
3术语和定义
下列术语和定义适用于本文件.
3.1
硫酸软骨素酶活力单位chondroitinase activity unit
1 000μL底物溶液（5.2.2、5.2.3）在30℃C、pH7.5的条件下，每分钟酶解产生1μmol 4 5-不饱和糖醛酸所需的解量.
注：酶活力单位以IU表示，1IU-1.667×10-mol/s
4原理
硫酸软骨素酶催化底物硫酸软骨素钠或硫酸皮肤素裂解，会生成裂解产物4，5-不饱和糖醛酸.4.5-不饱和糖醛酸在波长232nm具有特征吸收峰.通过测定232nm处的吸光度变化，结合4，5-不饱和糖醛酸在232nm的摩尔消光系数，计算酶活力.
5试剂和材料
除非另有说明，本方法所用试剂均为分析纯，水为GB/T6682规定的二级水.
5.1试剂
5.1.1硫酸软骨素钠（CAS号9082-07-9）：纯度≥99%，或经国家认证并授予证书的标准物质/标准样品.5.1.2硫酸皮肤素（CAS号54328-33-5）：纯度≥99%，或经国家认证并授予证书的标准物质/标准“5.1.3盐酸（HCI）.
5.1.4三羟基甲基氨基甲烷（Tris).
