中华人民共和国国家标准
GB11902-89
水质 硒的测定 2，3-二氨基萘荧光法
Water quality-Determination ofselenium-Diaminonaphthalene fluorometricmethod
国家技术监督局 发布
中华人民共和国国家标准
GB 11902-89
水质硒的测定2，3-二氨基萘荧光法
Water quality-Determination of selenium-Diaminonaphthalene fluorometric method
1主题内容与适用范围
1.1主题内容
水样经混合酸液消解，再经盐酸还原，然后测定硒浓度，他包括无机的六价和四价晒，以及低价晒（系指四价以下的无机和有机硒），
1.2适用范圈
本标准适用于各种清洁水、生活污水及某些工业废水（见附录A）.
水中一般常见的阴、阳离子不干扰硒的测定.铜、铁、钼等重金属离子及大量氧化物对测定晒有干扰，可用EDTA及盐酸羟胺消除.在本法测定条件下，醋含量为0.05ug时，30ug劈、钻、铬；5ug铺：20ug镍；27吨g镀；35ug铜：40ug锰：50ug铅、锌；100g铁、等不干扰.
本法最低检出量为0.005g晒，取20mL水样测定，晒的最低检出浓度为0.25吨g/L.
2原理
zopiaselenol）绿色荧光物质，被环已烷萃取，所产生的荧光强度与四价硒含量成正比，水样经硝酸-高氯酸 2 3-二氨基萘在pH1.5~2.0溶液中，选择性地与四价晒离子反应生成4，5-苯并苯硒脑（4，5-ben-混合酸液消解，将四价以下的无机和有机硒氧化为四价晒，再经盐酸消解将六价硒还原为四价晒，然后测定总语含量.
3试剂
除另有说明外，分析中使用蒸馏水及去离子水及公认的分析纯试剂，
3.1蒸馏水及去离子水，电阻率在500000Qcm（25C）以上，3.2环己烷（CgHa），不得含荧光杂质.不纯时需重蒸馏，收集80~81C馏分，使用过的环已烷可重蒸后再用，3.3硝酸（HNOs），密度（p）为1.4g/mL，优级纯， 3.4高氯酸（HCLO），密度（p2）为1.68g/mL，优级纯.3.5硝酸-高氯酸混合酸液，11（V/V）.3.6盐酸（HC1），密度（po）为1.18g/mL，优级纯.3.7盐酸溶液，14（v/v）. 3.8盐酸溶液，约0.1mol/L：将8.4mL盐酸（3.6），用水（3.1）稀释至1000mL.3.9氨水（NHHO），密度（o）为0.9g/mL，优级纯.3.10氨水溶液，11（V/V).3.11甲酚红溶液，0.2g/L：将20mg甲酚红（CgHOS）溶于少量水中加1滴氨水（3.9），使完全溶解，加水（3.1）稀释至100ml.
3.12混合试剂：将10g2Na-EDTA溶于少量水中，加热溶解，冷却后加入10g盐酸羟胺（NHOHHCI）及10mL甲酚红溶液（3.11）.用水稀释至200mL，贮于冰箱内，临用前将此液用水稀释10倍.
3.13精密pH试纸，pH0.5~5.0.
3.142.3-二氨基茶，0.1%溶液（此溶液需在暗室中配制）：将100mg2 3-二氨基萘CCoH（NHg），简称DAN）于250mL磨口锥形瓶（4.1）中，加入0.1mol/L盐酸（3.8）100mL，振摇至全部溶解后，加入20mL环已烷（3.2）继续振摇5min，若DAN试剂不纯时，环已烷相有大量褐色悬浮物，弃去，水相再加环已烷反复萃取洗至环已烷相无色透明时，移入底部塞有玻璃棉（或脱脂棉）的分液漏斗（4.2）中，静置分层后1cm厚的环已烷（3.2）以隔绝空气，置冰箱内保存，用前再以环已烷（3.2）萃取一次.经常使用每月配制 将水相放回原锥形瓶内，再用环已烷（3.2）同上操作萃取3次，将此纯化的溶液贮于棕色瓶中，加一层约一次为宜，不经常使用可保存一年.
3.15硒标准贮备溶液，100mg/L：准确称取0.1000g光谱纯元素硒（Se）溶于少量硝酸（3.3）中，加入2mL高氯酸（3.4）.在沸水浴上加热除去确酸，稍冷后加入少量水和8.4mL盐酸（3.6），继续加热2min，然后转移至1000mL容量瓶，用水稀释至标线并混匀.本溶液在冰箱内可贮存一年.每毫升标准溶 液含100μg晒.
3.16晒标准溶液，5.00mg/L；取5.00mL硒标准贮备溶液（3.15）于100mL容量瓶内，用0.1mol/L盐酸溶液（3.8）稀释至标线并混匀，于冰箱内贮存：每毫升溶液含5.00g硒.
3.17硒标准使用溶液，5.00μg/L：取1.00mL晒标准溶液（3.16）置100mL容量瓶内，用0.1mol/L盐 酸溶液（3.8）稀释至标线并混匀，于冰箱内贮存.每月配制，每毫升标准溶液含0.050g硒.
4仪器
本法首次使用的玻璃器皿，均须以硝酸（11）漫池4h以上，用自来水及水（3.1）洗净，本法用过的玻璃器皿，以自来水冲洗后，于0.5%洗衣粉溶液中浸池2h以上，用自来水及水（3.1）洗净，
常用实验室设备和以下仪器.
4.1具标准磨口塞锥形瓶，250ml及100mL.4.2分液漏斗，250mL及25mL.活塞上不得涂油.若不易转动时，可加一点水（3.1）润湿即可.4.4电热板. 4.3具塞比色管，5mL.4.5水浴锅.4.6荧光分光光度计或荧光光度计.
5采样与样品
5.1采样
水样采集时必须使用经硝酸（11）授泡4h以上，然后用大量自来水和水（3.1）冲洗干净的玻璃瓶或塑料瓶，
5.2祥品
采样后不能立即进行测定时，一般天然水及饮用水可于室内阴凉处保存，工业废水最好及时分析或贮于冰箱内.勿加酸保存（注）.
注：天然水及饮用水中主要含有六价或四价晒，水样加与不加酸保存均影响不大：但工业瘦水成分复杂，含有各种价态硒，有的水样中晒以费二价的为主，若加酸保存时可生成硒化氢气体选散，使总硒含量损失很大.
6分析步骤
6.1试样
将样品（5.2）摇匀后立即取20mL或适量，按步骤（6.2）进行测定.
6.2空白试验
用水（3.1）代菩试样，加入试剂的量均与测定试样时所用的试剂量相同，按6.4.1~6.4.3测定步骤进行空白试验.
当测定试样中硒浓度接近检出限浓度时，必须控制空白试验的荧光强度应尽可能低，其平行管的荧光强度值之差不应超过平均值的5%，否则应将DAN试剂（3.14）用之前用环已烷（3.2）多提纯几次，所用器Ⅲ均需重新洗净.
6.3校准曲线
2.0mL加水（3.1）至与试样相同体积，燃后按照测定步骤（6.4.1~6.4.3）进行操作. 取8个100mL锥形瓶（4.1），分别加入硒标准溶液（3.17）0.0、0.1、0.3、0.5、0.7、1.0、1.5及
分别以测定的各荧光强度减去空白试验（零浓度）的荧光强度后，与对应的硒含量绘制校准曲线.
6.4测定
6.4.1消解
将适量试样（6.1）.其含晒不超过0.1ug，放入锥形瓶（4.1）中，小心地加入2.5mL硝酸-高氯酸（3.5），混匀后于电热板上加热至瓶内产生浓白烟，立即取下，稍冷后加入2.5mL盐酸溶液（3.7）.继续加热至再产生浓白烟，立即取下放冷.
注：样品以硝酸-高氯酸消解不完全时杂质荧光高，若消解时间过长硒损失很大.所以消解快到终点时，需要注意观察浓厚白磊的变化，不要过多据动瓶，当瓶内浓白爆分层滚动时，应立即取下.
6.4.2荧光物质的形成及萃取
向消解的溶液中加入10mL混合试剂（3.12），溶液呈桃红色，用氨水（3.10）调节至淡澄色（pH1.5~2.0)，放冷.
注：硒与2.3-二氨基恭必强在酸性溶液中反应，pH值以1.5~2.0为最佳，过低时溶液易乳化，太高时测定结果编
高.甲酚红指示剂有pH2~3及7.2一8.8两个变色范围，前者是由桃红色变为黄色，后者是由黄色变成挑红（微
以下步骤需在暗室内黄色灯光下操作：将2.0mLDAN溶液（3.14）加入上述各瓶中，混匀，置沸水浴中加热5min（自放入水溶锅中算起），取出以冷水冷却后准确加入环已烷（3.2）4.0mL萃取2min，然 后将全部溶液移入25mL分液漏斗（4.2）中，待分层后放掉水相.将环已烷相由分液漏斗上口倾入具塞比色管（4.3）中，盖严待测，
6.4.3荧光测定
片，测定荧光强度.以测定试样的荧光强度减去空白试验（6.2）的荧光强度，从校准曲线上查得硒量. 用费光分光光度计，激发光波长为376nm，发射光波长为520nm：或用荧光光度计，选择适宜滤
注：1）不同型号的荧光光度计，所具有的滤片不同，需根据使用的仅器，进行选择适宜的滤片，例如用国产930型荧光光度计可选择激发光滤片为330nm，荧光滤片为510mm（截止蛋）和530mm（参通型）组合滤片.
7结果的表示
确含量c（ug/L）按下式计算：
式中：一-从校准曲线上查得样中晒含量，8；
V--测定用试样体积，ml.
结果以两位小数表示.
8精密度与准确度
六个实验室测定含硒9.04g/L的统一样品，含其他元素浓度（ug/L）为：铝（84.8），砷（22.4），铍
（23.7)，（7.4)，铬（5.8)，估（34.4），铜（7.2），铁（17.1)，汞（0.56），锰（10.3），镍（13.7），铅（34.4），钒（104.8)，锌（80.0）.
8.1重复性 各实验室的室内相对标准偏差分别为0.6%，1.3%，1.4%，1.9%，2.6%和3.7%.
8-2再现性实验室间相对标准偏差为5.2%.
8.3准确度相对误差为4.5%.
