中华人民共和国国家标准
GB/T 14926.10-2008代替 GB/T 14926.10-2001
实验动物 泰泽病原体检测方法
Laboratory animalMethod for examination of Tyzzer's organism
中国国家标准化管理委员会 中华人民共和国国家质量监督检验检疫总局 发布
前言
GB/T14926《实验动物》共54个部分,为不同微生物和病毒检测技术方法, 本部分自实施之日起代替GB/T14926.10-2001《实验动物泰泽病原体检测方法》.本部分与GB/T14926.102001相比主要技术差异如下:a)删除了可的松激发试验;b)修改了两种血清学方法.本部分由全国实验动物标准化技术委员会提出并归口. 本部分起草单位:全国实验动物标准化技术委员会.本部分主要起草人:李红.本部分所代替标准的历次版本发布情况为:GB/T 14926. 10-1994 GB/T 14926. 10-2001.
实验动物泰泽病原体检测方法
1范围
GB/T14926的本部分规定了实验动物泰泽病原体的检测方法.本部分适用于小鼠、大鼠、豚鼠、地鼠和免泰泽病原体的检测.
2规范性引用文件
下列文件中的条款通过GB/T14926的本部分的引用而成为本部分的条款.凡是注日期的引用文件,其随后的修改单(不包括勘误的内容)或修订版均不适用于本部分,然而,鼓励根据本部分达成 协议的各方研究是否可使用这些文件的最新版本,凡是不注日期的引用文件,其最新版本适用于本部分,
GB/T14926.50实验动物酵联免疫吸附试验GB/T14926.52实验动物免疫荧光试验
3原理
动物感染泰泽病原体后血清中可产生相应的抗体,依据免疫学原理,采用泰泽病原体抗原检测小鼠、大鼠、豚鼠、地鼠和兔血清中相应的抗体.
4主要设备和材料
4.1普通恒温培养箱.4.2荧光显微镜.4.3生物显微镜.4.4酵标仪.4.6聚苯乙烯板,40孔、55孔或96孔(可拆或不可拆),用前洗净晾干,紫外光照射1h. 4.5组织研磨器.4.7微量加样器,容量5p1~50prL、50αL~200μL4.8印有10个~40个小孔的载玻片.4.9盖玻片.
4.10超低温冰箱或液氮罐.
5培养基和试剂
5.1ELISA抗原
5.1.1泰泽病原体抗原
受泰泽病原体感染的、带有严重坏死灶的动物肝脏按1:10加入PBS后在冰浴中用组织研磨器制成匀浆,3600r/min离心,取上清液作抗原.
5.1.2阴性对照抗原
未受泰泽病原体感染的动物肝脏,按5.1.1的方法制成.
5.2抗原片
受泰泽病原体感染的、带有严重坏死灶的动物肝组织用PBS按1110在冰浴中制成勾浆,调整浓