中华人民共和国国家标准
GB/T 14926.19-2001代替GB/T 14926.191994
Laboratory animalMethod for examination ofHantavirus(HV)
中华人民共和国 国家质量监督检验检疫总局 发布
前
物流行性出血热病毒检测方法“改称为“实验动物汉坦病毒检测方法”.删除了GB/T14926.19一 本标准是对GB/T14926-19-1994《实验动物流行性出血热病毒检测方法》的修订.将“实验动1994中"5检测方法和结果判定”的内容，增加了检测病毒抗体的酶联免疫吸附试验和免疫荧光试验.
本标准由中华人民共和国科学技术部提出并归口.本标准起草单位：中国实验动物学会.本标准主要起草人：贺争鸣. 本标准于1994年1月首次发布.
中华人民共和国国家标准
实验动物 汉坦病毒检测方法
GB/T 14926.19-2001代梦GB/T 14926.191994
Laboratory animalMethod for examination ofHantavirus (HV)
1范围
本标准规定了汉坦病毒（HV）的检测方法、试剂等.本标准适用于小鼠、大鼠HV的检测.
2引1用标准
下列标准所包含的条文，通过在本标准中引用而构成为本标准的条文.本标准出版时，所示版本均为有效.标准都会被修订，使用本标准的各方应探讨使用下列标准最新版本的可能性.
GB/T14926.50-2001实验动物酵联免疫吸附试验GB/T14926.52-2001实验动物免疫荧光试验
3原理
根据免疫学原理，采用HV抗原检测小鼠、大鼠血清中HV抗体，
4主要试剂和器材
4.1试剂4.1.1ELISA抗原4.1.1.1特异性抗原
在生物安全柜内，用Hantaan型或Seoul型毒株感染的E6细胞，当特异性荧光达时，即可收获培养物，冻融三次或超声波处理后，低速离心去除细胞碎片，上清液再经超速离心浓缩后制成ELISA抗原.
4.1.1.2正常抗原
E6细胞冻融破碎后，经低速离心去除细胞碎片面获得的上清液.
4.1.2抗原片
在生物安全柜内，用Hantaan型或Seoul型毒株感染E6细胞，每2~3d更换维持液，培养7~10d，用IFA法测定细胞内特异性荧光.当荧光达十十时，将细胞用胰酶分散，用PBS洗涤，涂片.室 温干燥的同时，在紫外线下20cm处照射30min，冷丙酮固定10min，一20C保存.
4.1.3阳性血清
用B丙内脂灭活HV抗原，免疫清洁或SPF小鼠或大鼠所获得的抗血清.
4.1.4阴性血清
