中华人民共和国国家标准
GB/T 14926.23-2001代替GB/T 14926.23-1994
Laboratory animal-Method for examination ofSendai virus (SV)
中华人民共和国 国家质量监督检验检疫总局 发布
前 昊
的免疫荧光试验方法. 本标准是对GB/T14926.23-1994《实验动物仙台病毒检验方法》的修订.增加了检测病毒抗体
本标准由中华人民共和国科学技术部提出并归口.
本标准起草单位:中国实验动物学会.
本标准主要起草人:贺争鸣.
本标准于1994年1月首次发布.
中华人民共和国国家标准
实验动物 仙台病毒检测方法
GB/T 14926. 23-2001代格GB/T 14926.23-1994
Laboratory animalMethod for examination ofSendal virus (SV)
1范围
本标准规定了仙台病毒(SV)的检测方法、试剂等.
本标准适用于小鼠、大鼠、聚鼠、地鼠、兔仙台病毒的检测.
2引用标准
下列标准所包含的条文,通过在本标准中引用面构成为本标准的条文.本标准出版时,所示版本均为有效.标准都会被修订,使用本标准的各方应探讨使用下列标准最新版本的可能性,
GB/T14926.50-2001实验动物酶联免疫吸附试验GB/T14926.51-2001实验动物免疫酵试验GB/T14926.52一2001实验动物免疫荧光试验 GB/T14926.54-2001实验动物血凝抑制试验
3原理
根据免疫学原理,采用SV抗原检测小鼠、大鼠、脉鼠、地鼠、兔血清中仙台病毒抗体:或根据SV在鼠、大鼠、豚鼠、地鼠、免血清中仙台病毒抗体. 一定的条件下,能凝集鸡、豚鼠红细胞,这种凝集红细胞的能力可被特异性抗体所抑制的原理,检测小
4主要试剂和器材
4.1试剂:4.1.1ELISA 抗原4.1.1.1特异性抗原
用SV感染9d龄SPF鸡胚尿囊腔,培养于36C温箱,72h后收冻于4C,次日无菌收取尿囊液,4C2000r/min离心10min,用0.5%鸡或豚鼠红细胞和SV阳性血清做血凝和血凝抑制试验,验证其病毒特异性和血凝效价,上清液再经超速离心浓缩后制成ELISA抗原.
4.1.1.2正常抗原
9d龄SPF鸡胚尿囊液.
4.1.2抗原片
SV感染BHK21细胞,接种后2~3d,病变达十十~十十时用胰酶消化分散,PBS洗涤,涂片.室温干燥后,冷丙酮固定10min,一20C保存.