中华人民共和国国家标准
GB/T 14926.26-2001代替GB/T 14926.26-1994
实验动物 小鼠脑脊髓炎病毒检测方法
Laboratory animalMethod for examination ofTheiler's mouse encephalomyelitis virus (TEMV)
中华人民共和国 国家质量监督检验检疫总局 发布
前 旱
未作改动,仅对原标准的个别文字作了修改. 本标准是对GB/T14926.26-1994(实验动物小鼠脑脊髓炎病毒检验方法3的修订.对检测方法
本标准由中华人民共和国科学技术部提出并归口.
本标准主要起草人:届霞琴.
本标准于1994年1月首次发布,
中华人民共和国国家标准
实验动物 小鼠脑脊髓炎病毒检测方法
GB/T 14926.26-2001代替GB/T 14926.25-1994
Laboratory animal-Method for examination ofTheiler's mouse encephalomyelitis virus (TMEV)
1范围
本标准规定了小鼠脑脊髓炎病毒(TMEV)的检测方法、试剂等.本标准适用于小鼠TMEV的检测.
2引用标准
下列标准所包含的条文,通过在本标准中引用而构成为本标准的条文.本标准出版时,所示版本均为有效.标准都会被修订,使用本标准的各方应探讨使用下列标准最新版本的可能性.
GB/T14926.50-2001实验动物酶联免疫吸附试验GB/T14926.52-2001实验动物免疫荧光试验 GB/T14926.51-2001实验动物免疫酶试验GB/T14926.54-2001实验动物血凝抑制试验
3原理
下,能集人“O”型红细胞,这种凝集红细胞的能力可被特异性抗体所抑制的原理,检测小鼠血清中 根据免疫学原理,采用TMEV抗原检测小鼠血清中TMEV抗体:或根据TMEV在一定的条件TMEV抗体.
4主要试剂和器材
4.1试剂 4.1.1ELISA抗原4.1.1.1特异性抗原
TMEV(GD株)感染小鼠,待发病后取脑,研磨,制成10%悬液,3000r/min离心10min后取上冻融三次或超声波处理后,低速离心去除细胞碎片,上清液再经超速离心浓缩后制成ELISA抗原.
BHK21细胞冻融破碎后经低速离心去除细胞碎片面获得的上清液.
4.1.2抗原片
TMEV(GDV株)感染BHK21细胞,培养4~5d,病变达十~十十时,将细脑用胰酶分散,用PBS洗涤,滴片.室温干燥后,冷丙酮固定10min,一20C保存.