中华人民共和国国家标准
GB/T 14926.56-2008代替GB/T 14926.56-2001
实验动物 狂犬病病毒检测方法
Laboratory animal-Method for examination of Rabies virus
中国国家标准化管理委员会 中华人民共和国国家质量监督检验检疫总局 发布
前言
GB/T14926《实验动物》共54个部分，为不同微生物和病毒检测技术方法， 本部分自实施之日起代替GB/T14926.56-2001《实验动物狂犬病病毒检测方法》.本部分与GB/T14926.56-2001相比主要技术差异如下：a）删除原标准中“2引用标准”内容；b）对原标准中”3原理”中内容改为“在微孔板上预包被纯化狂犬病毒抗原，使免疫反应在固相载体上进行.当被检血清中有狂大病病毒抗体存在时，则与孔壁上的抗原形成抗原-抗体 复合物，再与抗犬IgG酶标记物反应，最后通过测定酵作用底物催化后的产物，进行定性检测”：c）删除原标准中关于血凝抑制试验的试剂、方法及结果判定：d）对原标准中关于酶联免疫吸附试验的内容进行修改，包括试剂、方法及结果判定等：e）对原标准中"6结果判定"中增加了"6.3基础级犬群体免疫抗体合格率：免疫抗体合格率= （被检动物抗体阳性数/被检动物总数）×100%.基础级犬群体免疫抗体合格率达到70%以上可判为该犬群免疫合格"内容.本部分由全国实验动物标准化技术委员会提出并归口.本部分由全国实验动物标准化技术委员会负责起草.本部分主要起草人：田克恭、陈西钊、曹振、王传彬、何秀敏、汤汉文. 本部分所代替标准的历次版本发布情况为：GB/T 14926. 562001.
实验动物狂犬病病毒检测方法
1范围
GB/T14926的本部分规定了狂犬病病毒（RV）的检测方法、试剂等.本部分适用于犬RV的检测.
2原理
在微孔板上预包被纯化狂犬病毒抗原，使免疫反应在固相载体上进行.当被检血清中有狂犬病病作用底物催化后的产物，进行定性检测.
3主要试剂和器材
3.1试剂
犬狂犬病毒IgG抗体检测试剂盒（定性），包括：
a）预包被狂犬病毒抗原的微孔板；b）狂犬病毒lgG酵标记物；c）狂犬病毒IgG阳性对照； d）狂犬病毒IgG临界对照；e）狂犬病毒lgG阴性对照；f）显色液A：磷酸氢=钠-柠檬酸缓冲液（0.05mol/L pH5.0)100mL 30%过氧化氢HOg）显色液B：柠檬酸1.052g.乙二胺四乙酸二钠（EDTA-Na）0.186g，四甲基联苯胺（TMB） (MW34. 0)3.5 mL;0.25g，二甲基亚矾（DMSO）8.0mL，纯化水992mL;h）终止液：98%硫酸27.8mL，纯化水972.2mL；i）10 倍浓缩洗涤液：PBS(0.1 mol/L pH7.2~7. 4)995 mL，吐温-20，5 mL;j）样品稀释液：硼酸盐缓冲液（0.01mol/LpH8.0）956.0mL，甘油（MW92.09）40.0mL，酪蛋白 （casein）10%硫柳汞钠溶液2.0mL，吐温-20，1.0mL1%酚红溶液，1.0mlL.试剂在使用前应恢复至室温（18C～25C）.
3.2器材
器材包括：
00~0（ b）一次性移液器吸头；c）振荡器；d）酶标仪（含450nm波长滤光片）；e）37C恒温培养箱；g）100mL量筒： {）蒸馏水或去离子水：h）离心机；i）吸水纸.
