中华人民共和国国家标准
GB/T 14927.2-2008代替GB/T14927.2-2001
实验动物 近交系小鼠、大鼠免疫标记检测法
Laboratory animalImmunological marker of inbred mice and rats
中国国家标准化管理委员会 中华人民共和国国家质量监督检验检疫总局 发布
前言
GB/T14927共分2个部分:
本部分为GB/T14927的第2部分.
本部分自实施之日起,代替GB/T14927.2-2001《实验动物近交系小鼠、大鼠皮肤移植检测法》.
a)修订实验动物近交系小鼠、大鼠皮肤移植法部分内容:b)增加小鼠H-2单倍型微量细胞毒检测法:c)本部分名称修改为”实验动物近交系小鼠、大鼠免疫标记检测法”.
本部分附录A为资料性附录.
实验动物 近交系小鼠、大鼠免疫标记检测法
1范围
GB/T14927的本部分规定了近交系小鼠、大鼠皮肤移植术法和近交系小鼠H-2单倍型(Haplotype)检测方法.
及近交系小鼠和大鼠在繁殖饲养过程中的遗传监测.近交系小鼠H-2单倍型(Haplotype)检测方法适 本部分近交系小鼠、大鼠皮肤移植术法适用于近交系小鼠和大鼠在培育过程中遗传纯度的检查以用于近交系小鼠培育和繁殖词养过程中的遗传监测,主要检测H-2复合体D区和K区的抗原分型.
2近交系小鼠和大鼠皮肤移植术法
2.1技术原理
移植物在同一近交系中可以被互相接受,即同系移植(isograft)是成功的.移植物在不同近交系中互相排厅,亦即同种移植(allograft)是不成功的.F1代动物可以接受任何一个双亲的组织移植物,双亲则不能接受F1代的移植物.F1代动物可以接受F2代以后各代动物的移植物.本部分采用背部皮肤移植法和尾部皮肤移植法.两种方法原理相同,并具有同等标准效力. 亲本品系可以接受某些F2代以后各代动物的移植物,但是绝大部分被排厅.
2.2背部皮肤移植法
2.2.1设备和材料
2.2.1. 1固定板(18 cm×12 cm).2.2.1.3医用橡皮膏. 2.2.1.2戊巴比妥钠(医用).2.2.1.4医用凡士林.2.2.1.5粉剂青霉素G钠(80万U,人或兽用).2.2.1.63%碘酒棉球.2.2.1.775%酒精棉球, 2.2.1.8眼科剪刀,2.2.1.9眼科锻子.2.2.1.10一次性注射器(1mL).2.2.1.11纱布(剪成40mm长.25mm宽若干条:厚2层~3层若干块,其上涂医用凡士林及粉剂青2.2.1.12脱脂棉做成的棉球. 霉素G钠).2.2.1.13将手术器材置于高压锅内121C、40min高压灭菌.
2.2.2.2每只动物分别编号并称取体重,详细记录品系名称、性别、出生年月日、谱系及其他特征.2.2.2.3用无菌生理盐水配制0.7%戊巴比妥钠溶液.2.2.2.4采用腹腔注射0.7%戊巴比妥钠溶液麻醉动物.小鼠每10g体重注射0.1mL,大鼠每20g