中华人民共和国国家标准
GB/T15670.17-2017部分代替GB/T156701995
农药登记毒理学试验方法 第17部分：哺乳动物精原细胞/精母细胞 染色体畸变试验
Toxicological test methods for pesticides registration-Part 17:Mammalianspermatogonial/spermatocyte chromosome aberration test
中国国家标准化管理委员会 中华人民共和国国家质量监督检验检疫总局 发布
前言
GB/T15670《农药登记毒理学试验方法》分为以下部分：第1部分：总则：-第2部分：急性经口毒性试验霍恩氏法；第3部分：急性经口毒性试验序贯法； 第4部分：急性经口毒性试验概率单位法；第5部分：急性经皮毒性试验；第6部分：急性吸人毒性试验；第7部分：皮肤刺激性/腐蚀性试验；第8部分：急性眼刺激性/腐蚀性试验； 第9部分：皮肤变态反应（致敏）试验：第10部分：短期重复经口染毒（28天）毒性试验：第11部分：短期重复经皮染毒（28天）毒性试验；第12部分：短期重复吸人染毒（28天）毒性试验；第13部分：亚慢性毒性试验； 第14部分：细菌回复突变试验；一第15部分：体内哺乳动物骨髓嗜多染红细胞微核试验；-一第16部分：体内哺乳动物骨髓细胞染色体畸变试验；第18部分：嘀齿类动物显性致死试验： 一第17部分：哺乳动物精原细胞/精母细胞染色体畸变试验：第19部分：体外哺乳动物细胞染色体畸变试验：第20部分：体外哺乳动物细胞基因突变试验：第21部分：体内哺乳动物肝细胞程序外DNA合成（UDS）试验：第23部分：致畸试验； 第22部分：体外哺乳动物细胞DNA损害与修复/程序外DNA合成试验；第24部分：两代繁殖毒性试验；第25部分：急性迟发性神经毒性试验；第26部分：慢性毒性试验；第27部分：致癌试验； 第28部分：慢性毒性与致癌合并试验；第29部分：代谢和毒物动力学试验.本部分为GB/T15670的第17部分.本部分按照GB/T1.1-2009给出的规则起草.本部分与GB/T15670-1995的小鼠案丸精母细胞染色体畸变试验部分相比主要变化如下： 本部分部分代替GB/T15670-1995《农药登记毒理学试验方法》.修改了本部分的试验名称；修改和调整了标准的总体结构和编排格式；修改了动物要求（见7.2.1995年版的14.6.2）； 一增加了部分章节内容（见第1章、第2章、第3章、第4章、第5章、7.1和第9章）；
GB/T 15670.17-2017
修改了剂量及分组要求（见7.3，1995年版的14.6.3）；修改了染毒方法（见7.4.1，1995年版的14.6.4）；修改了操作步骤（见7.4，1995年版的14.6.5）.本部分由中华人民共和国农业部提出并归口.本部分起草单位：农业部农药检定所. 本部分主要起草人：李宁、张丽英、陶传江.本部分所代替标准的历次版本发布情况为：GB/T 15670-1995
农药登记毒理学试验方法 第17部分：哺乳动物精原细胞/精母细胞 染色体畸变试验
1范围
GB/T15670的本部分规定了哺乳动物精原细胞/精母细胞染色体畸变试验的基本原则、方法和要求.
本部分适用于为农药登记面进行的哺乳动物精原细胞/精母细胞染色体畸变试验.
2规范性引用文件
下列文件对于本文件的应用是必不可少的.凡是注日期的引用文件，仅注日期的版本适用于本文件.凡是不注日期的引用文件其最新版本（包括的修改单）适用于本文件.
GB14925实验动物环境及设施
3术语和定义
下列术语和定义适用于本文件.
染色体结构损伤，表现为染色单体断裂或染色单体断裂重组的损伤.
染色体型畸变chromosome-type aberration
染色体结构损伤，表现为在两个染色单体的相同位点均出现断裂或断裂重组的改变.
3.3
裂障gap
染色体和染色单体的损伤长度小于一个染色单体的宽度，为染色单体的最小的错误排列.
3.4
多倍体polyploid
哺乳动物细胞染色体数目正常为二倍体，在化学诱变剂的作用下染色体数目成倍地增加，如三倍体、四倍体等，
3.5
染色体结构畸变chromosomal structure aberration
通过显微镜观察到的细胞分裂中期相的结构改变，如染色体缺失、染色体互换和内交换等.
4试验目的
检测受试物引起哺乳动物生殖细胞染色体畸变的效应，以评价受试物引起生殖细胞遗传突变的可
能性.
5试验概述
诱发染色体型畸变，而作用于G2期时则诱发染色单体型畸变.以适当的染毒途径给动物染毒，并在染 染色体是细胞核中具有特殊结构和遗传功能的小体，当化学物质作用于细胞周期G1期和S期时，毒后适当的时间处死，在动物处死前，动物用中期相阻断剂（如秋水仙素）处理，制备睾丸细胞染色体并染色，对中期相细胞进行染色体畸变分析.
6仅器与试剂
6.1仪器
实验室常用设备.
6.2低渗液
1%柠檬酸三钠：取1g柠檬酸三钠（分析纯），加蒸馏水至100mL. 0.4%氯化钾：取0.4g氯化钾（分析纯），加蒸馏水至100mL.
6.360%冰乙酸
取60mL冰乙酸（分析纯），加蒸缩水至100mL.宜新鲜配制.
6.4固定液
甲醇：冰乙酸=3：1，新鲜配制.
6.5姬姆萨（Giemsa）染液
姬娜萨（Giemsa）染料 gg甲醇 375 mL甘油 125 mL
配制：将姬姆萨（Giemsa）染料和少量甲醇置于研钵里仔细研磨，再加人甲醇到375mL，待完全溶溶解.取出过滤，两周后使用. 解后，再加人125mL甘油，混合均匀.置37℃恒温箱中保温48h.保温期间振摇数次，促使染料充分
6.6磷酸盐缓冲液（pH6.8）
1/15mol/L磷酸氢二钠溶液，称取NaHPO 9.47g溶于1000mL蒸馏水中. 1/15mol/L磷酸二氢钾溶液：称取KHPO 9.07g溶于1000mL燕镐水中.将磷酸氢二钠溶液50ml与磷酸二氢钾溶液50mL混合，用pH计测定并调节至pH6.8.
6.7姬姆萨（Giemsa）应用液
取1份姬姆萨（Giemsa）染液与9份磷酸盐缓冲液（pH6.8）混合面成，临用时现配.
